图解微流控芯片实验室培训课件

图解微流控芯片实验室图解微流控芯片实验室1内容提要绪论芯片材料与制作技术表面改性技术微流体驱动与控制技术进样与预处理微混合与微反应微分离技术液滴技术检测技术应用核心技术内容提要绪论核心技术2一、认识微流控芯片实验室一、认识微流控芯片实验室31、什么是微流控芯片实验室？？？微流控芯片实验室又叫微流控芯片或芯片实验室。它将生物和化学领域所涉及的基本操作单元集成在一块几平方厘米的芯片上。操作单元尺寸在微米量级。1、什么是微流控芯片实验室？？？微流控芯片实验室又叫微流控芯4如图所示，微流控芯片的基本构成是各种储液池及联接他们构成体系的微通道网络。如图所示，微流控芯片的基本构成是各种储液池及联接他52、微流控芯片实验室的优势：将多种单元技术在整体可控的微小平台上灵活组合、规模集成。大幅缩短样品处理时间。显著提高分辨率/灵敏度。大幅降低消耗和成本。2、微流控芯片实验室的优势：将多种单元技术在整体可控的微小平63、微流控芯片实验室的最终目标：

使实验设备小型化，家庭化，最终实现检测等仪器的普及化，从根本上改善人类生存质量。3、微流控芯片实验室的最终目标：

使实验设备小7二、微尺度下的流体

二、微尺度下的流体

81、微尺度下流体的特征：微尺度下流体的最主要特征是层流和电渗1、微尺度下流体的特征：微尺度下流体的最主要特征是层流和电渗92、层流判断流体流动是层流还是湍流要看雷诺系数Re

Re小于2000是层流，大于4000是湍流，在微流体流动过程中，惯性力影响很小，黏性力起主导，Re大约在10-6~10，远小于2000，所以是典型的层流。2、层流判断流体流动是层流还是湍流要看雷诺系数ReRe小于210层流提供了在微小空间内控制样品浓度、宽度、温度等指标的可能性，是微流控芯片得以实现强大功能并且具有宽广应用面的重要原因层流提供了在微小空间内控制样品浓度、宽度、温度113、传质由于流体在微通道中以层流形式运动，层与层之间的质量传递主要依靠扩散，扩散传质的公式为：2t=l2/Dt为达到稳态的时间，l为传质距离，D为扩散系数3、传质由于流体在微通道中以层流形式运动，层与层之间的质量传124、电渗电渗是一种流体相对于带点管壁移动的现象，电渗的产生和偶电层有关。在pH>3的条件下，微通道内壁通常带负电（表面电离或吸附），于是表面附近的液体中形成了一个带正电的偶电层（stem层和扩散层），在平行于内壁的外电场作用下，偶电层中的溶剂化阳离子或质子引起微通道内流体朝着负极方向运动4、电渗电渗是一种流体相对于带点管壁移动的现象，电渗的产生138、考核要求区隔服务的应用案例4.2承包方可在需要时向业主申请领用日常维护所需的材料和备品配件。从企业的角度来说，顾客是企业生存的基础，是企业利润的源泉，是企业的衣食父母和发展的动力。因此，不要把与顾客的关系当成买卖关系，而要把顾客看作企业的事业伙伴。企业应该敞开心胸，广泛接纳客户的建议，把服务做得更好。16.1投标人提供的货物与服务以人民币报价（如标书中另有规定，则从其规定）。6．基础建设3、遵守企业的规章制度，组织观念强，能严格要求自己，无违纪处分；（9）投标货物不是自已制造的，未提供实际制造厂授权书的；（5）明显不符合招标文件的技术规格、技术标准的；25.迟交的投标文件中国有句古诗“宝剑锋从磨砺出，梅花香自苦寒来”。因此，企业利用海豚理论来对员工进行恰当的激励，用象征性的方式鼓励员工向上发展。发展并不是口头的表达，而需要好好研究，下苦功夫学习。服务也是一样，只有不断地演练与学习，才能更成熟、更精致。请您阅读以下案例，并回答相关问题。8、考核要求14电渗流速计算公式ζ是zeta电势，ε是介电常数，Φ是外电场，μ是流体粘度电渗流速计算公式ζ是zeta电势，ε是介电常数，Φ是外15电渗驱动的特点：流速大小可由外电场线性调节外加电场电极可以集成在芯片上，从而缩小了芯片流体驱动系统体积各种芯片材料都可以诱导电渗流流体前沿为扁平状电渗驱动的特点：流速大小可由外电场线性调节16三、芯片材料和芯片制作技术三、芯片材料和芯片制作技术171、制作材料常用的芯片材料有单晶硅片、石英、玻璃和有机聚合物如PMMA、PDMS、PC以及水凝胶，他们具有良好的生化相容性、光学性能，其表面具有良好的可修饰性。下表为常见芯片制作材料的基本性能。1、制作材料常用的芯片材料有单晶硅片、石英、玻璃和有机聚合物18图解微流控芯片实验室培训课件192、芯片的制作玻璃等芯片制作的主要步骤包括：涂胶、曝光、显影、腐蚀和去胶。高分子聚合物芯片的制作技术主要包括热压法、模塑法、注塑法、激光烧蚀法、LIGA法和软刻蚀法等。2、芯片的制作玻璃等芯片制作的主要步骤包括：涂胶、曝光、显影20四、表面改性技术四、表面改性技术211、为什么要表面改性微流控芯片中比表面积大，表面效应显著，表面重要性被强化。微流控芯片材质多样，增加了芯片表面的复杂性。微流控芯片中的芯片分离、反应和细胞培养等单元技术对表面性质的需求不同。1、为什么要表面改性微流控芯片中比表面积大，表面效应显著，表222、改性目的减小表面非特异性作用增强表面特异性作用提高表面稳定性2、改性目的减小表面非特异性作用233、表面改性的方法分类3、表面改性的方法分类244、不同材质芯片的改性方法分类

1）玻璃、石英动态改性静电引力静态改性硅烷化反应聚丙烯酰胺聚乙烯醇常用于核酸、蛋白质电泳常用于小分子快速分析4、不同材质芯片的改性方法分类1）玻璃、石英动态改性静电引254.1.1国家有关安全生产的方针、政策、法律和法规及有关行业的规章、该菜单主要的功能是提供各类业务报表，帮助您轻松地建立满足企业管理需要的各类统计报表。4.5.2本单位主要危险危害因素，安全技术操作规程和安全生产规章制度；④所选择诊所必须有充足的场所，以备我们宣传、之用；第十三条本办法自印发之日起实行。5．自助无人员服务7.5配合站长严格执行消防安全制度、巡回检查制度、交接班制度的执行情况，每周一次检查，组织每月一次安全总结会。①划分营销区域，应选择一个较大的富裕的乡镇做为中心；规划 相应的方法每次会议要确定主题，此主题一定是影响销售的阶段性主要矛盾，（比如管理问题、监控问题、战术问题具体战术细节等），围绕主题展开，并做好详细记录，找出解决问题的办法，在下一阶段的会议中落实、解决。每次会议要确定主题，此主题一定是影响销售的阶段性主要矛盾，（比如管理问题、监控问题、战术问题具体战术细节等），围绕主题展开，并做好详细记录，找出解决问题的办法，在下一阶段的会议中落实、解决。4.3气瓶要专瓶专用。不要擅自改装它类气体，瓶内气体不得用尽，必须留有余压。2）PDMSa、本体掺杂：在预聚体中引入特殊性质分子b、共价偶联：利用等离子体、紫外、臭氧等物理方法完成如下反应4.1.1国家有关安全生产的方针、政策、法律和法规及有关行业26c、聚合诱导接：d、吸附-交联：c、聚合诱导接：d、吸附-交联：275、表面改性的表征技术表面红外漫反射吸收光谱（可以快速测量表面化学组

成变化）原子力显微镜（直接观察表面分子，考察表面欧联的聚合物分子层状况）荧光照片（可测试表面连接聚合物涂层对表面蛋白的吸附情况）电渗流测定（可反映表面的电荷情况）5、表面改性的表征技术表面红外漫反射吸收光谱（可以快速测量表28五、微流体驱动与控制技术五、微流体驱动与控制技术291、常见流体驱动技术分类1、常见流体驱动技术分类30机械驱动包括：离心力驱动，气动微泵驱动，压电微泵驱动。PDMS气动微泵驱动常规状态下，阀门敞开施加动力鼓入空气，薄膜在气体压力下发生形变，堵塞通道。撤销压力，恢复原状。三个阀依次如图顺序开启闭合便可驱动流体流动。机械驱动包括：离心力驱动，气动微泵驱动，压电微泵驱动。PDM31压电微泵驱动

向压电双晶片施加方波信号时,压电双晶片在电场的作用下发生周期性弯曲变形,进而驱动PDMS泵膜改变腔体的容积。当压电双晶片带动泵膜向上移动时,泵腔体积增大,腔内流体的压强减小,使入口阀打开,同时出口阀关闭,流体在压差的作用下流入泵腔。

压电微泵驱动向压电双晶片施加方波信号时,压电双晶片在32非机械驱动包括：电渗驱动、热气微泵驱动、光学捕获微泵电渗驱动：电渗驱动是当前微流控芯片中应用最广泛的一种流体驱动技术。优势：构架简单、操作方便、流行扁平、无脉动等。劣势：易受外加电场强度、通道表面、微流体性质及传热效率等因素影响，稳定性相对较差。非机械驱动包括：电渗驱动、热气微泵驱动、光学捕获微泵332、微流体控制微流体控制是微流控芯片实验室的操作核心，在微流控芯片实验室所涉及的进样、混合、反应、分离、检测等过程都是在可控流体的运动中完成的。微流体控制主要包括电渗控制和微阀控制。2、微流体控制微流体控制是微流控芯片实验室的操作核心，34微阀控制特征：低泄露、低功耗、速度快、线性范围广、适应面广。举例：双晶片单向阀

原理图微阀控制特征：低泄露、低功耗、速度快、线性范围广、适应面广。35六、进样和样品预处理技术六、进样和样品预处理技术361、芯片实验室各种进样方式一览1、芯片实验室各种进样方式一览37图解微流控芯片实验室培训课件38(四)组织考察，确认资格。企业党委组织部，人力资源部，上级团委，报名人所在单位党组织组成考察小组，采取多种形式，广泛征求干部员工的意见，了解掌握报名人员的工作业绩、日常表现、作风品德等情况，然后对照《团干部竞争上岗考察评分表》(以下简称《评分表》)，对竞岗人员进行评分。考察成绩满分为100分占竞争上岗总成绩的20%。得分60分以上者方可作为竞岗人员。领导小组办公室将竞岗人员名单、《报名表》、《评分表》一并报领导小组审核，竞岗人员数至少应比拟选拔团干部数多2名。9．服务南京和宁波的襄阳渔港餐厅，虽然拥有一千个座位，依然常常座无虚席。这个餐厅是从宁波开始发展的，餐厅非常大。由于客户非常多，点菜需要等很久。因此，餐厅的一楼不设餐桌，让顾客自己去看所有的海产和料理，自己点菜。服务人员站在顾客旁边，配有遥控器。产品有编号，顾客要什么，服务员输入编号，通过电子传信通知厨房。厨房就开始工作了。这种传统餐饮业的资讯化管理大大提高了效率。5.2技术人员、（设备）维修人员、各加气站负责人的安全考核：4、设备与构筑物检查、保养记录；(2) 在缺陷责任期结束之前，根据有关承包合同，负责督促承包方履行合同义务。所谓和气生财，服务人员在迎接客人的时候要始终面带恰到好处的微笑，表现出礼貌、亲切、含蓄、妥帖等等。但是，笑脸也不能过头，切忌不合时宜的大笑，否则会让客人感到莫名其妙，从而产生排斥感。5、不得占用公共走道，原占用的必须打通。5.2.8主管部门负责每月进行一次统计分析，每季度召开一次统计会议，不断更新统计技术或方法。A、简单进样(四)组织考察，确认资格。企业党委组织部，人力资源部，上39B、悬浮进样B、悬浮进样40C、压缩进样C、压缩进样41D、门进样D、门进样422、样品预处理2、样品预处理43七、微混合和微反应技术七、微混合和微反应技术441、微混合

由于一般微流控装置流体状态以层流为主，因此微流控的微混合主要依靠扩散1、微混合45提高层流条件下混合效率的主要原则为：拉伸或折叠流体以增大流体的接触面积；利用分散混合设计，通过管路几何交叉设计将大的液流拆分并重新组合，从而减小液流厚度，实现更有效混合。提高层流条件下混合效率的主要原则为：拉伸或折叠流体以增大流体46微混合器的分类汇总微混合器的分类汇总472、微反应和微反应器微反应技术是一种将微结构内在的优势应用到反应过程的技术，体现这种技术的设备或器件被称为微反应器。微反应器是一种单元反应界面尺度为微米量级的微型反应器。2、微反应和微反应器微反应技术是一种将微结构48微反应器分类微反应器分类49微型生物反应器主要的应用对象有：聚合酶链反应（PCR）、免疫反应、各类酶反应及DNA杂交反应等微型生物反应器主要的应用对象有：聚合酶链反应（PCR）50八、微分离技术八、微分离技术51早期的微流控芯片，在某种意义上说就是一种微分离器件，电泳是芯片微分离中采用最普遍的一种形式早期的微流控芯片，在某种意义上说就是一种52自由溶液区带芯片电泳自由溶液区带电泳是在开关通道中直接利用物质的质荷比差异实现分离的一种电泳模式，它也是各种电泳分离中最基本的一种，影响因素相对较少，容易在芯片上实现。自由溶液区带芯片电泳自由溶液区带电泳是在开关通53介质筛分芯片电泳

筛分电泳是利用生物大分子和筛分介质(高分子溶胶或凝胶)之间的动态交缠作用，把被分离物质按照分子质量大小分开的一种技术，它是传统的平板电泳和毛细管电泳中研究最多，应用最广的一种电泳分离模式介质筛分芯片电泳筛分电泳是利用生物大分子和筛分介54电色谱

基于被分离物荷质比差异的自由溶液区带电泳分离，对一些强疏水物质不是很有效。这就需要在电泳过程中引入色谱分配的概念，利用不同组分分配系数的差异强化分离。芯片电动色谱就是芯片电泳和液相色谱在某种程度的结合，充分利用了MEMS技术的高精确度、设计灵活等优势，突破了某些传统电色谱加工模式的束缚，以电渗驱动代替压力驱动。芯片电色谱有几种基本模式:开管电色谱,填充电色谱和整体电色谱。电色谱基于被分离物荷质比差异的自由溶液区带电泳分离，对一些55胶束电动芯片色谱在含有胶束的缓冲溶液中，实际上存在着类似于色谱的两相，一是流动的水相，另一相是起到固定作用的胶束相，溶质在两相之间分配，由其在胶束中不同的保留能力而产生不同的保留值。胶束电动芯片色谱在含有胶束的缓冲溶液中，实际上56芯片自由流电泳自由流电泳是指在样品随缓冲液连续流动的正交方向加一直流电场，使被分离物质在流动的同时顺电场方向作电迁移，按电泳倘度大小分离，并在流体末端被接取的一种技术(图7-22)。其分离度取决于流体向下流动的速度和电场的大小。芯片自由流电泳自由流电泳是指在样品随缓冲液连续流动的正57介电电泳电中性颗粒被放置于非均匀电场下时，会产生诱导极化并与电场相互作用而产生介电泳动现象介电电泳电中性颗粒被放置于非均匀电场下时58九、液滴技术九、液滴技术591、液滴的形成水溶液和油同时从不同的微通道中流出，当通道疏水时，油浸润通道，包裹水溶液形成油包水（W/O）型液滴；若通道亲水，过程相反，形成水包油（O/W）型液滴。1、液滴的形成水溶液和油同时从不同的微通602、液滴的优点1）体积小

所需样品微量，适合高通量筛选反应和某些样品来源有限的反应2）样品无扩散

2、液滴的优点1）体积小613）反应条件稳定

除了消除样品分子的扩散之外，水分子的蒸发也因油相的包围而受到抑制，液滴内的反应条件几乎不受外界影响4）样品间的交叉污染得以避免

3）反应条件稳定625）混合迅速液滴在通道中运动时，在液滴内部将以运动方向为轴，形成两个循环回流。5）混合迅速液滴在通道中运动时，在液滴内部将以运动方向为633、液滴的操控技术1）反应物的引入A、直接进样

当反应比较简单时，可用注射泵直接将反应物包入液滴。3、液滴的操控技术1）反应物的引入64B、毛细管进样高通量筛选需不断改变液滴的组成和浓度，为实现此目标，可将不同的待测样品预先吸入毛细管中，形成一系列体积较大的液滴，然后将该毛细管与微流控芯片连接在注射泵的推动下与反应物形成小液滴并开始反应。B、毛细管进样652）液滴的融合和分裂A、液滴融合两种液滴融合的思路：现在芯片的不同位置平行的形成不同的液滴，控制好各液滴生成的速度，在芯片特定的位置汇合，在表面张力或静电力的作用下，两液滴融合。2）液滴的融合和分裂A、液滴融合66B、液滴的分裂液滴分裂主要依靠通道结构实现B、液滴的分裂675、液滴的应用随着液滴技术的发展成熟，对液滴的研究逐步转向应用，比较成功的例子包括：蛋白质结晶研究、酶分析、细胞分析、材料制备和复杂过程模拟等。5、液滴的应用随着液滴技术的发展成熟，对液68十、检测技术十、检测技术691、微流控芯片对检测器的特殊要求灵敏度高响应速度快体积小1、微流控芯片对检测器的特殊要求灵敏度高702、激光诱导荧光检测基本原理2、激光诱导荧光检测基本原理71优点：是最灵敏的检测方法之一，其检测限可达到10-9~10-13mol/L，对于某些高荧光产率的物质甚至可以达到单分子检测。缺点：分析物需要具有荧光或含有可通过衍生反应得到荧光信号的官能团；荧光标记有可能会造成分析物质生化学活性的改变，影响结果的可信度优点：是最灵敏的检测方法之一，其检测限可达到10-9~10-723、质谱检测优势：能够提供试样组分中生物大分子的基本结构和定量信息。在涉及蛋白质组学研究中有难以替代的作用。劣势：现行仪器体积庞大，价格昂贵，不符合芯片微型化的特点，只能用于芯片外检侧;芯片同质潜的接口仍然是发展的重点与难点3、质谱检测优势：能够提供试样组分中生物大分子的基本结构和定734、电化学检测电化学检测是通过电极将溶液中的待测物的化学信号转变为电信号以实现对待测组分检测的分析方法。微流控芯片电化学检测可分为安培法、电导法和电势法。4、电化学检测电化学检测是通过电极将溶液中的待74优势：灵敏度高，选择性好，装置简单，成本低，可以与微加工技术兼容，具有微型化和集成化的前景。劣势：被检测物质需要有电化学活性(安培检测)，重现性较差。优势：灵敏度高，选择性好，装置简单，成本低，可以与微加工技术75十一、微流控芯片的应用十一、微流控芯片的应用761、在核酸研究中的应用核酸研究的技术如DNA萃取/纯化、PCR扩增、分子杂交、电泳分离和检测等都可以在微流控芯片上实现。

如今已有的应用包括：基因突变检测、基因分型和DNA测序，就对象而言，病原体的基因检测应用尤为广泛。1、在核酸研究中的应用核酸研究的技术如DNA萃取/纯化772、在蛋白质研究中的应用

2、在蛋白质研究中的应用781）微流控芯片上的蛋白质样品与处理技术

样品预处理蛋白质纯化微渗析液-液萃取蛋白蛋白质富集等速电泳富集固相萃取富集多孔膜富集纳米通道富集蛋白质衍生在线衍生柱后衍生蛋白质酶解固定化酶反应器芯片内壁固定化胰蛋白酶微珠固定化胰蛋白酶原位聚合整体柱溶胶凝固固定化胰蛋白酶膜固定化胰蛋白酶1）微流控芯片上的蛋白质样品与处理技术样品预处理蛋白质纯化79蛋白质分离芯片电泳芯片色谱芯片二维分离芯片区带电泳分离芯片筛分电泳分离2）蛋白质分离蛋白质分离芯片电泳芯片色谱芯片二维分离芯片区带电泳分离芯片筛803、在离子和小分子研究中的应用

1）离子分离微流控芯片离子分离分析现阶段多以芯片电泳为分离手段，以电化学检测作为主要检测方式。

离子分离模式包括：区带电泳、等速电泳、等速电泳-区带电泳、离子色谱。

3、在离子和小分子研究中的应用1）离子分离812）手性分子A、手性拆分目前在微流控芯片上有所尝试的拆分方法有：酶法拆分、色谱拆分、电泳法拆分，其中电泳法是采用最多的一种方法，就拆分方式而言，以直接法居多。

2）手性分子A、手性拆分82B、手性合成微流控芯片进行手性合成的研究处于研究阶段，报道较少但前景光明。C、手性合成-手性拆分集成手性合成与手性拆分集成使反应和评估系统处于同一量级，具有发展高通量的潜力，目前已报道的集成模式有游离酶水相反应与区带电泳手性拆分的集成。B、手性合成834、代谢物

代谢物分析能够帮助人们更好的理解病变过程及机体内物质的代谢途径，在药物开发，疾病诊断与预防等有重要的指导意义。

4、代谢物84

微流控芯片在疾病标志物分析方面的应用举例：葡萄糖研究者新近建立的自动血糖测定和胰岛素注射集成微流控芯片系统（GSII）能准确检测血糖的水平。肾病标志物

研究人员在微流控芯片上建立了一种同时检测尿液中肾病标志物的方法，该方法集成了系列肾病标志物分析所需的酶反应。微流控芯片在疾病标志物分析方面的应用举例：葡萄糖854、在细胞研究中的应用4、在细胞研究中的应用86细胞捕获电场力捕获细胞细胞捕获电场力捕获细胞87介电力捕获细胞介电力捕获细胞88流体动力学陷阱捕获细胞流体动力学陷阱捕获细胞89图解微流控芯片实验室图解微流控芯片实验室90内容提要绪论芯片材料与制作技术表面改性技术微流体驱动与控制技术进样与预处理微混合与微反应微分离技术液滴技术检测技术应用核心技术内容提要绪论核心技术91一、认识微流控芯片实验室一、认识微流控芯片实验室921、什么是微流控芯片实验室？？？微流控芯片实验室又叫微流控芯片或芯片实验室。它将生物和化学领域所涉及的基本操作单元集成在一块几平方厘米的芯片上。操作单元尺寸在微米量级。1、什么是微流控芯片实验室？？？微流控芯片实验室又叫微流控芯93如图所示，微流控芯片的基本构成是各种储液池及联接他们构成体系的微通道网络。如图所示，微流控芯片的基本构成是各种储液池及联接他942、微流控芯片实验室的优势：将多种单元技术在整体可控的微小平台上灵活组合、规模集成。大幅缩短样品处理时间。显著提高分辨率/灵敏度。大幅降低消耗和成本。2、微流控芯片实验室的优势：将多种单元技术在整体可控的微小平953、微流控芯片实验室的最终目标：

使实验设备小型化，家庭化，最终实现检测等仪器的普及化，从根本上改善人类生存质量。3、微流控芯片实验室的最终目标：

使实验设备小96二、微尺度下的流体

二、微尺度下的流体

971、微尺度下流体的特征：微尺度下流体的最主要特征是层流和电渗1、微尺度下流体的特征：微尺度下流体的最主要特征是层流和电渗982、层流判断流体流动是层流还是湍流要看雷诺系数Re

Re小于2000是层流，大于4000是湍流，在微流体流动过程中，惯性力影响很小，黏性力起主导，Re大约在10-6~10，远小于2000，所以是典型的层流。2、层流判断流体流动是层流还是湍流要看雷诺系数ReRe小于299层流提供了在微小空间内控制样品浓度、宽度、温度等指标的可能性，是微流控芯片得以实现强大功能并且具有宽广应用面的重要原因层流提供了在微小空间内控制样品浓度、宽度、温度1003、传质由于流体在微通道中以层流形式运动，层与层之间的质量传递主要依靠扩散，扩散传质的公式为：2t=l2/Dt为达到稳态的时间，l为传质距离，D为扩散系数3、传质由于流体在微通道中以层流形式运动，层与层之间的质量传1014、电渗电渗是一种流体相对于带点管壁移动的现象，电渗的产生和偶电层有关。在pH>3的条件下，微通道内壁通常带负电（表面电离或吸附），于是表面附近的液体中形成了一个带正电的偶电层（stem层和扩散层），在平行于内壁的外电场作用下，偶电层中的溶剂化阳离子或质子引起微通道内流体朝着负极方向运动4、电渗电渗是一种流体相对于带点管壁移动的现象，电渗的产生1028、考核要求区隔服务的应用案例4.2承包方可在需要时向业主申请领用日常维护所需的材料和备品配件。从企业的角度来说，顾客是企业生存的基础，是企业利润的源泉，是企业的衣食父母和发展的动力。因此，不要把与顾客的关系当成买卖关系，而要把顾客看作企业的事业伙伴。企业应该敞开心胸，广泛接纳客户的建议，把服务做得更好。16.1投标人提供的货物与服务以人民币报价（如标书中另有规定，则从其规定）。6．基础建设3、遵守企业的规章制度，组织观念强，能严格要求自己，无违纪处分；（9）投标货物不是自已制造的，未提供实际制造厂授权书的；（5）明显不符合招标文件的技术规格、技术标准的；25.迟交的投标文件中国有句古诗“宝剑锋从磨砺出，梅花香自苦寒来”。因此，企业利用海豚理论来对员工进行恰当的激励，用象征性的方式鼓励员工向上发展。发展并不是口头的表达，而需要好好研究，下苦功夫学习。服务也是一样，只有不断地演练与学习，才能更成熟、更精致。请您阅读以下案例，并回答相关问题。8、考核要求103电渗流速计算公式ζ是zeta电势，ε是介电常数，Φ是外电场，μ是流体粘度电渗流速计算公式ζ是zeta电势，ε是介电常数，Φ是外104电渗驱动的特点：流速大小可由外电场线性调节外加电场电极可以集成在芯片上，从而缩小了芯片流体驱动系统体积各种芯片材料都可以诱导电渗流流体前沿为扁平状电渗驱动的特点：流速大小可由外电场线性调节105三、芯片材料和芯片制作技术三、芯片材料和芯片制作技术1061、制作材料常用的芯片材料有单晶硅片、石英、玻璃和有机聚合物如PMMA、PDMS、PC以及水凝胶，他们具有良好的生化相容性、光学性能，其表面具有良好的可修饰性。下表为常见芯片制作材料的基本性能。1、制作材料常用的芯片材料有单晶硅片、石英、玻璃和有机聚合物107图解微流控芯片实验室培训课件1082、芯片的制作玻璃等芯片制作的主要步骤包括：涂胶、曝光、显影、腐蚀和去胶。高分子聚合物芯片的制作技术主要包括热压法、模塑法、注塑法、激光烧蚀法、LIGA法和软刻蚀法等。2、芯片的制作玻璃等芯片制作的主要步骤包括：涂胶、曝光、显影109四、表面改性技术四、表面改性技术1101、为什么要表面改性微流控芯片中比表面积大，表面效应显著，表面重要性被强化。微流控芯片材质多样，增加了芯片表面的复杂性。微流控芯片中的芯片分离、反应和细胞培养等单元技术对表面性质的需求不同。1、为什么要表面改性微流控芯片中比表面积大，表面效应显著，表1112、改性目的减小表面非特异性作用增强表面特异性作用提高表面稳定性2、改性目的减小表面非特异性作用1123、表面改性的方法分类3、表面改性的方法分类1134、不同材质芯片的改性方法分类

1）玻璃、石英动态改性静电引力静态改性硅烷化反应聚丙烯酰胺聚乙烯醇常用于核酸、蛋白质电泳常用于小分子快速分析4、不同材质芯片的改性方法分类1）玻璃、石英动态改性静电引1144.1.1国家有关安全生产的方针、政策、法律和法规及有关行业的规章、该菜单主要的功能是提供各类业务报表，帮助您轻松地建立满足企业管理需要的各类统计报表。4.5.2本单位主要危险危害因素，安全技术操作规程和安全生产规章制度；④所选择诊所必须有充足的场所，以备我们宣传、之用；第十三条本办法自印发之日起实行。5．自助无人员服务7.5配合站长严格执行消防安全制度、巡回检查制度、交接班制度的执行情况，每周一次检查，组织每月一次安全总结会。①划分营销区域，应选择一个较大的富裕的乡镇做为中心；规划 相应的方法每次会议要确定主题，此主题一定是影响销售的阶段性主要矛盾，（比如管理问题、监控问题、战术问题具体战术细节等），围绕主题展开，并做好详细记录，找出解决问题的办法，在下一阶段的会议中落实、解决。每次会议要确定主题，此主题一定是影响销售的阶段性主要矛盾，（比如管理问题、监控问题、战术问题具体战术细节等），围绕主题展开，并做好详细记录，找出解决问题的办法，在下一阶段的会议中落实、解决。4.3气瓶要专瓶专用。不要擅自改装它类气体，瓶内气体不得用尽，必须留有余压。2）PDMSa、本体掺杂：在预聚体中引入特殊性质分子b、共价偶联：利用等离子体、紫外、臭氧等物理方法完成如下反应4.1.1国家有关安全生产的方针、政策、法律和法规及有关行业115c、聚合诱导接：d、吸附-交联：c、聚合诱导接：d、吸附-交联：1165、表面改性的表征技术表面红外漫反射吸收光谱（可以快速测量表面化学组

成变化）原子力显微镜（直接观察表面分子，考察表面欧联的聚合物分子层状况）荧光照片（可测试表面连接聚合物涂层对表面蛋白的吸附情况）电渗流测定（可反映表面的电荷情况）5、表面改性的表征技术表面红外漫反射吸收光谱（可以快速测量表117五、微流体驱动与控制技术五、微流体驱动与控制技术1181、常见流体驱动技术分类1、常见流体驱动技术分类119机械驱动包括：离心力驱动，气动微泵驱动，压电微泵驱动。PDMS气动微泵驱动常规状态下，阀门敞开施加动力鼓入空气，薄膜在气体压力下发生形变，堵塞通道。撤销压力，恢复原状。三个阀依次如图顺序开启闭合便可驱动流体流动。机械驱动包括：离心力驱动，气动微泵驱动，压电微泵驱动。PDM120压电微泵驱动

向压电双晶片施加方波信号时,压电双晶片在电场的作用下发生周期性弯曲变形,进而驱动PDMS泵膜改变腔体的容积。当压电双晶片带动泵膜向上移动时,泵腔体积增大,腔内流体的压强减小,使入口阀打开,同时出口阀关闭,流体在压差的作用下流入泵腔。

压电微泵驱动向压电双晶片施加方波信号时,压电双晶片在121非机械驱动包括：电渗驱动、热气微泵驱动、光学捕获微泵电渗驱动：电渗驱动是当前微流控芯片中应用最广泛的一种流体驱动技术。优势：构架简单、操作方便、流行扁平、无脉动等。劣势：易受外加电场强度、通道表面、微流体性质及传热效率等因素影响，稳定性相对较差。非机械驱动包括：电渗驱动、热气微泵驱动、光学捕获微泵1222、微流体控制微流体控制是微流控芯片实验室的操作核心，在微流控芯片实验室所涉及的进样、混合、反应、分离、检测等过程都是在可控流体的运动中完成的。微流体控制主要包括电渗控制和微阀控制。2、微流体控制微流体控制是微流控芯片实验室的操作核心，123微阀控制特征：低泄露、低功耗、速度快、线性范围广、适应面广。举例：双晶片单向阀

原理图微阀控制特征：低泄露、低功耗、速度快、线性范围广、适应面广。124六、进样和样品预处理技术六、进样和样品预处理技术1251、芯片实验室各种进样方式一览1、芯片实验室各种进样方式一览126图解微流控芯片实验室培训课件127(四)组织考察，确认资格。企业党委组织部，人力资源部，上级团委，报名人所在单位党组织组成考察小组，采取多种形式，广泛征求干部员工的意见，了解掌握报名人员的工作业绩、日常表现、作风品德等情况，然后对照《团干部竞争上岗考察评分表》(以下简称《评分表》)，对竞岗人员进行评分。考察成绩满分为100分占竞争上岗总成绩的20%。得分60分以上者方可作为竞岗人员。领导小组办公室将竞岗人员名单、《报名表》、《评分表》一并报领导小组审核，竞岗人员数至少应比拟选拔团干部数多2名。9．服务南京和宁波的襄阳渔港餐厅，虽然拥有一千个座位，依然常常座无虚席。这个餐厅是从宁波开始发展的，餐厅非常大。由于客户非常多，点菜需要等很久。因此，餐厅的一楼不设餐桌，让顾客自己去看所有的海产和料理，自己点菜。服务人员站在顾客旁边，配有遥控器。产品有编号，顾客要什么，服务员输入编号，通过电子传信通知厨房。厨房就开始工作了。这种传统餐饮业的资讯化管理大大提高了效率。5.2技术人员、（设备）维修人员、各加气站负责人的安全考核：4、设备与构筑物检查、保养记录；(2) 在缺陷责任期结束之前，根据有关承包合同，负责督促承包方履行合同义务。所谓和气生财，服务人员在迎接客人的时候要始终面带恰到好处的微笑，表现出礼貌、亲切、含蓄、妥帖等等。但是，笑脸也不能过头，切忌不合时宜的大笑，否则会让客人感到莫名其妙，从而产生排斥感。5、不得占用公共走道，原占用的必须打通。5.2.8主管部门负责每月进行一次统计分析，每季度召开一次统计会议，不断更新统计技术或方法。A、简单进样(四)组织考察，确认资格。企业党委组织部，人力资源部，上128B、悬浮进样B、悬浮进样129C、压缩进样C、压缩进样130D、门进样D、门进样1312、样品预处理2、样品预处理132七、微混合和微反应技术七、微混合和微反应技术1331、微混合

由于一般微流控装置流体状态以层流为主，因此微流控的微混合主要依靠扩散1、微混合134提高层流条件下混合效率的主要原则为：拉伸或折叠流体以增大流体的接触面积；利用分散混合设计，通过管路几何交叉设计将大的液流拆分并重新组合，从而减小液流厚度，实现更有效混合。提高层流条件下混合效率的主要原则为：拉伸或折叠流体以增大流体135微混合器的分类汇总微混合器的分类汇总1362、微反应和微反应器微反应技术是一种将微结构内在的优势应用到反应过程的技术，体现这种技术的设备或器件被称为微反应器。微反应器是一种单元反应界面尺度为微米量级的微型反应器。2、微反应和微反应器微反应技术是一种将微结构137微反应器分类微反应器分类138微型生物反应器主要的应用对象有：聚合酶链反应（PCR）、免疫反应、各类酶反应及DNA杂交反应等微型生物反应器主要的应用对象有：聚合酶链反应（PCR）139八、微分离技术八、微分离技术140早期的微流控芯片，在某种意义上说就是一种微分离器件，电泳是芯片微分离中采用最普遍的一种形式早期的微流控芯片，在某种意义上说就是一种141自由溶液区带芯片电泳自由溶液区带电泳是在开关通道中直接利用物质的质荷比差异实现分离的一种电泳模式，它也是各种电泳分离中最基本的一种，影响因素相对较少，容易在芯片上实现。自由溶液区带芯片电泳自由溶液区带电泳是在开关通142介质筛分芯片电泳

筛分电泳是利用生物大分子和筛分介质(高分子溶胶或凝胶)之间的动态交缠作用，把被分离物质按照分子质量大小分开的一种技术，它是传统的平板电泳和毛细管电泳中研究最多，应用最广的一种电泳分离模式介质筛分芯片电泳筛分电泳是利用生物大分子和筛分介143电色谱

基于被分离物荷质比差异的自由溶液区带电泳分离，对一些强疏水物质不是很有效。这就需要在电泳过程中引入色谱分配的概念，利用不同组分分配系数的差异强化分离。芯片电动色谱就是芯片电泳和液相色谱在某种程度的结合，充分利用了MEMS技术的高精确度、设计灵活等优势，突破了某些传统电色谱加工模式的束缚，以电渗驱动代替压力驱动。芯片电色谱有几种基本模式:开管电色谱,填充电色谱和整体电色谱。电色谱基于被分离物荷质比差异的自由溶液区带电泳分离，对一些144胶束电动芯片色谱在含有胶束的缓冲溶液中，实际上存在着类似于色谱的两相，一是流动的水相，另一相是起到固定作用的胶束相，溶质在两相之间分配，由其在胶束中不同的保留能力而产生不同的保留值。胶束电动芯片色谱在含有胶束的缓冲溶液中，实际上145芯片自由流电泳自由流电泳是指在样品随缓冲液连续流动的正交方向加一直流电场，使被分离物质在流动的同时顺电场方向作电迁移，按电泳倘度大小分离，并在流体末端被接取的一种技术(图7-22)。其分离度取决于流体向下流动的速度和电场的大小。芯片自由流电泳自由流电泳是指在样品随缓冲液连续流动的正146介电电泳电中性颗粒被放置于非均匀电场下时，会产生诱导极化并与电场相互作用而产生介电泳动现象介电电泳电中性颗粒被放置于非均匀电场下时147九、液滴技术九、液滴技术1481、液滴的形成水溶液和油同时从不同的微通道中流出，当通道疏水时，油浸润通道，包裹水溶液形成油包水（W/O）型液滴；若通道亲水，过程相反，形成水包油（O/W）型液滴。1、液滴的形成水溶液和油同时从不同的微通1492、液滴的优点1）体积小

所需样品微量，适合高通量筛选反应和某些样品来源有限的反应2）样品无扩散

2、液滴的优点1）体积小1503）反应条件稳定

除了消除样品分子的扩散之外，水分子的蒸发也因油相的包围而受到抑制，液滴内的反应条件几乎不受外界影响4）样品间的交叉污染得以避免

3）反应条件稳定1515）混合迅速液滴在通道中运动时，在液滴内部将以运动方向为轴，形成两个循环回流。5）混合迅速液滴在通道中运动时，在液滴内部将以运动方向为1523、液滴的操控技术1）反应物的引入A、直接进样

当反应比较简单时，可用注射泵直接将反应物包入液滴。3、液滴的操控技术1）反应物的引入153B、毛细管进样高通量筛选需不断改变液滴的组成和浓度，为实现此目标，可将不同的待测样品预先吸入毛细管中，形成一系列体积较大的液滴，然后将该毛细管与微流控芯片连接在注射泵的推动下与反应物形成小液滴并开始反应。B、毛细管进样1542）液滴的融合和分裂A、液滴融合两种液滴融合的思路：现在芯片的不同位置平行的形成不同的液滴，控制好各液滴生成的速度，在芯片特定的位置汇合，在表面张力或静电力的作用下，两液滴融合。2）液滴的融合和分裂A、液滴融合155B、液滴的分裂液滴分裂主要依靠通道结构实现B、液滴的分裂1565、液滴的应用随着液滴技术的发展成熟，对液滴的研究逐步转向应用，比较成功的例子包括：蛋白质结晶研究、酶分析、细胞分析、材料制备和复杂过程模拟等。5、液滴的应用随着液滴技术的发展成熟，对液157十、检测技术十、检测技术1581、微流控芯片对检测器的特殊要求灵敏度高响应速度快体积小1、微流控芯片对检测器的特殊要求灵敏度高1592、激光诱导荧光检测基本原理2、激光诱导