细菌的分离课件

Email:细菌的分离与鉴定脓汁中球菌的分离与鉴定

粪便中杆菌的分离与鉴定病原菌的检验程序增菌培养革兰染色分离培养接种琼脂斜面纯培养采集标本生化试验血清学试验动物试验分析鉴定革兰染色观察菌落特征目的1、从脓汁中分离球菌，从粪便中分离杆菌病原性球菌致病性肠道杆菌2、掌握生物学性状、常用培养基的特点及用途3、了解球菌和杆菌的一般鉴定程序2、方法（1）脓汁中病原性球菌的分离

将脓汁标本以分区划线法接种在血液琼脂培养基（血平板），放入37℃温箱中培养24小时。取出放4℃冰箱中保存备用（2）致病性肠道杆菌的分离

将粪便标本以分区划线法接种到SS培养基，放入37℃温箱中培养24小时。取出放4℃冰箱中保存备用二、常见病原性球菌和杆菌的生物学性状及培养特点1、常见病原性球菌

（1）葡萄球菌（2）链球菌（3）肺炎双球菌（4）脑膜炎双球菌葡萄球菌

生物学性状:G+圆形，椭圆形，呈葡萄串样菌落颜色溶血现象致病性金黄色葡萄球菌

金黄色β溶血强，为致病菌表皮葡萄球菌白色_弱，条件致病菌腐生葡萄球菌白色或柠檬色_不致病营养要求高，普通培养基上生长不良，需补充血液血清葡萄糖。菌落特点：菌落呈圆形，隆起，灰白色，细小，表面光滑，边缘整齐，直径0.5－0.75mm最适宜生长温度37℃，最适宜pH为7.4－7.6。培养特点甲链乙链丙链肺炎双球菌生物学性状G+双球菌，菌体呈矛头状，宽端相对，尖端向外.有荚膜.营养要求高，在含有血液或血清的培养基中才能生长最适温度为37℃，最适pH为7.4-7.8.在血琼脂平板上，菌落呈圆形稍扁，灰白色，细小，半透明，直径0.5-1.5mm.α溶血环，与甲型溶血性链球菌相似，孵育时间>48h，菌落中央呈脐状下陷.脑膜炎双球菌生物学性状G-肾形或豆形双球菌，两菌接触面平坦或稍向内陷。营养要求高，需在含有血清，血液的培养基中才能生长。最适温度37℃，最适pH7.4-7.6，在巧克力培养基上生长良好；专性需氧。菌落：圆形，凸起，无色，光滑，透明，露滴状（2）伤寒杆菌生物学特性:G-镜下为杆状营养要求不高，可在普通琼脂培养基上生长最适宜温度为37℃，最适宜pH为7.4大肠杆菌：

圆形，凸起，灰白色，表面光滑，湿润伤寒杆菌：圆形，无色，半透明菌落特点增菌培养革兰染色分离培养革兰染色采集标本革兰染色-革兰染色+G-双球菌球菌葡萄串状球菌链状排列奈瑟菌属血浆凝固酶试验+-金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌双球菌草绿色溶血草绿色溶血乙型溶血不溶血胆汁溶菌菊糖发酵奥泼吐根乙型链球菌丙型链球菌营养、耐温、生化反应、血清学鉴定脑膜炎双球菌淋球菌甲型链球菌肺炎双球菌2、致病性肠道杆菌的鉴定粪便生化反应SS琼脂平板(双糖含铁培养基)血清学鉴定增菌培养（必要时）（2）双糖铁培养基上各菌的生长特点含有乳糖和葡萄糖：产酸产气含有硫酸亚铁：如细菌分解含硫氨基酸生成硫化氢，可形成黑色沉淀酚红指示剂：

酸：黄碱：红

1)大肠杆菌发酵乳糖和葡萄糖产酸产气（糖发酵试验），是斜面及底层均呈黄色并有气泡。2)沙门菌和志贺菌只发酵葡萄糖，不发酵乳糖，分解葡萄糖产的酸使培养基pH下降，酚红指示剂变黄，但是培养基中的葡萄糖仅有0.1%，在斜面的酸性物质被氧化成挥发性酸，且细菌氧化氨基酸物质产生的氨的中和作用，使斜面变红，而底层则为黄色。双糖铁培养基上各菌的生长现象大肠杆菌黄色有气泡伤寒杆菌上红下黄中间有黑色沉淀福氏痢疾杆菌上红下黄金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特点；白色葡萄球菌在血平板上的菌落特点；大肠杆菌在SS平板上的菌落特点；伤寒杆菌在SS平板上的菌落特点；观察内容血液琼脂培养基（血平板）在普通琼脂培养基的基础上加入血液制备而成，是最常用的营养培养基，可供营养要求较高的细菌生长。常用于分离