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文档简介
院系:生化环院任课老师:吴雨龙任课班级:09食品、行09食品食品专业食品毒理学实验
将外源化合物经口染毒求出LD50是毒理学研究中重要的基本技术和基础工作之一。通过试验,学习外源化合物急性毒性试验设计原则,掌握大、小鼠经口灌胃技术和求算LD50的方法。急性毒性试验的原理是动物一次或24h内多次接触外源化合物后,观察急性毒性反应及其程度,中毒死亡的原因及特征,了解受试动物毒性反应的剂量-反应关系,求出LD50。
实验三经口急性毒性实验实验目的1.1.实验动物:实验材料2.体重18-22g小鼠。实验器材:灌胃针、注射器5套、容量瓶、小烧杯、移液管、饲养笼等。实验试剂:HgCl2粉末、苦味酸酒精饱和液和中性红染色液。3.实验步骤2.灌胃液浓度和容量:相同剂量的受试化学物,若给以不同浓度可能会产生不同的死亡情况,已如前述。灌服体积大小亦可影响试验结果,体积太小、太浓,可能产生局部刺激或其他损伤;体积太大,可能引起胃部机械性损伤,影响正常生理功能。经口急性毒性试验中,常常是固定受试化学物体积,根据试验设计的剂量用1:K系列稀释法将受试化学物配制成不同浓度的液体剂型灌胃。其灌胃体积以体重的1%-2%计算,最多不超过3%,即小鼠每10g体重灌胃0.1-0.2ml,最多不超过0.3ml。3.灌胃方法:以左手固定小鼠后,使其腹部朝上,颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器,自口角插入口腔,在用灌胃器压向后方使动物口腔和食管成直线的同时,使灌胃器沿上颚滑入食道。如方法正确,应无明显障碍。若遇较大阻力或动物剧烈挣扎,必须退出重插,不得用蛮力强行插入灌胃器。否则会刺破食道或气管,造成动物立即死亡。立即死亡的,要另补充动物。灌胃针插入深度,一般小鼠3-4cm,大鼠、豚鼠4-6cm。3.实验步骤3.实验步骤4.中毒症状:染毒后认真观察中毒发生、发展过程,中毒特点和毒作用靶器官。观察期间每3d,称重一次,对死亡动物和实验结束时的存活动物全部称重,作大体病理学检查,取病变组织做病理组织学检查,为亚慢性、慢性和其他毒性试验剂量和观察指标选择提供参考依据,并按表3-1做好记录。表3-1急性毒性试验观察记录表组别动物编号性别体重
(g)染毒剂量
(mg/kg)染毒时间症状及出现时间死亡时间体重记录
4.实验结果根据实验动物的中毒症状、死亡时间、LD50及急性毒性实验作用特点,按
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