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文档简介

2.2.用去离子水溶解并稀释至 1L。2.2.用去离子水溶解并稀释至 1L。储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃,相对湿度不超过 80%。包装必须密封,切勿受潮。应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。0.5MEDTA(PH8.0)组分浓度:0.5mol/LEDTA(MW:372.24)配制量:500ml配制方法:1.称取93gNa2EDTA-2H2O置于500ml蓝盖瓶中。2.加入 400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。3.用NaOHH节调节pH值至8.0(约需加入20g固体NaOH,当pH接近8.0时,EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。4.高温高压灭菌后,室温保存半年。5MNaCl组份浓度:5mol/LNaCl(MW:58.5)配制量:1L配制方法:1.准确称取氯化钠292.5g,置于1L的蓝盖瓶中。0.5MEDTA0.5MEDTA(pH8.0) 20mL3.高温高压灭菌后,常温保存。2.5MCaCl2组份浓度:2.5mol/LCaCl2(MW:110.98)配制量:50ml配制方法:1.准确称取氯化钙 g于50ml的conicaltube中。.用去离子水溶解并稀释至 500ml,用0.22医m滤膜过滤除菌滤膜过 滤除菌到进口的conicaltube。.贮存于 4℃。50%甘油组分浓度:50%(V/V)glycerol配制量:100ml配制方法:量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中:100%glycerol50ml加入 50ml去离子水,充分搅拌溶解。高温高压灭菌,4℃保存。使用时,到超净台分装。Amp氯苇青霉素(钠盐)放置:置于4。C冰箱配方及配法:配成200mg/ml的1000*溶液储存 (40g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于 -20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(200ug/ml)加入培养基。养基。Kan-卡那霉素(硫酸根)放置:置于试剂柜配方及配法:配成20mg/ml的1000*溶液储存 (4g溶于200ml蒸馏水中),溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装,置于 -20°C冰箱第二层,以1*的终浓度(20ug/ml)加入培养基。DTT(二硫苏糖醇)放置:置于-20。C冰箱顶层配方及配法:1MDTT的配制:溶解7.7gIPTG于50mL水中, 溶解后分装成1。5ml管,置于-20°C冰箱第二层使用浓度为1-10MmPMSF(苯甲基磺酰氟)放置:试剂柜0.1MPMSF的配制:分子量174.19保存 室温保存,配成PMSF容液后需-20C保存。配制溶解0.87g的PMSFF足量的异丙醇中,定容到50ml。分成小份贮存于一20c工作浓度1mM注意:有毒,对呼吸道粘膜、眼睛和皮肤有很强的危害性,配制时请在通风橱进行,并穿实验服及戴一次性手套。10XTEBuffer(pH8.0)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配置方法量取下列溶液,置于1L蓝盖瓶中。1.0MTris-HClBuffer(pH8.0)100mL.向蓝盖瓶中加入约800mL的去离子水,均匀混合。.将溶液定容至1L,高温高压灭菌。.室温保存半年。注意:此为贮存液,使用时稀释100倍,用于PCR电化和质粒提取后产物保存0.5MPIPES(PH6.7)配制量:10ml(MW:302.4)配制方法:.称取1.5g,加入到15ml塑料离心管内。.加8ml的水,搅拌溶解。.用5MKOH调PH至6.74.0.22um滤膜过滤,-20C保存。.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度 :1.5mol/LTris-HCl配制量:1L配制方法 :称取181.7g的Tris-base(MW:121.14)置于1L蓝盖瓶中。加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。用浓盐酸调pH值至8.80将溶液定容至1L。高温高压灭菌后,室温保存半年。1.0MTris-HCl(pH8.0)组分浓度:1.0mol/LTris-HCL配制量:1L配制方法:2.2.加入0.8mL的去离子水溶解。2.2.加入0.8mL的去离子水溶解。.称取121g的Tris-base(MW121.14)于1L蓝盖瓶中,.加入900ml的去离子水,充分搅拌均匀,.用浓盐酸调pH值至8.0,每升约需40-50ml浓盐酸,用水调整终体积至1L。如需其他PH的Tris,根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸。.高温高压灭菌后,室温保存半年。注意:测PH时需使用温度补偿电极,因为温度变化对 Tris的PH有很大影响。浓盐酸的体积(ml)8.6142128.53846566671.376pH 9.08.88.68.48.28.07.87.67.47.210%SDS组份浓度:10%( W/V)SDS配制量:500mL配置方法1.称量50g高纯度的SDS置于500mL蓝盖瓶中,加入约400mL的去离子水,68c加热溶解。 2.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。3.将溶液定容至500mL后,室温保存。注意:SDS为固体粉末状,吸入会对肺造成损害,应在通风橱中称取 SDS。溶解时,SD喝产生气泡,不要剧烈搅拌。30%APS(过硫酸铵)组份浓度: 30%( W/V)APS配制量: 1mL配制方法:1.准确称取0.3gAPS。贮存于4℃。注意: 30%的过硫酸胺溶液在 4℃保存时间可使用 2周左右,超过期限会失去 催化作用。10XSDSRunningBuffer配制量:1L配制方法:.称量下列试剂,置于1L蓝盖瓶中。 Tris20g;Glycine144g;10%SDS100ml2.加入约 700ml的去离子水搅拌溶解。3.定容至1L,混匀,室温保存。50XTAEBuffer(pH8.5)组分浓度:2MTris-base,100mMEDTA,1MK乙酸配制量:1L配制方法:1、称取下列试剂,置于1L蓝盖瓶中:Tris-base242.2g;0.5MEDTA(PH8.0)200ml2.加入约 600ml的去离子水,充分搅拌溶解,再加入 57.1ml的冰乙酸,混合均匀。3、加去离子水将溶液定容至 1L。4、高温高压灭菌后,室温保存半年。6XDNALoadingBuffer(Agarose)组分浓度:0.09%(W/V)漠酚蓝0.09%(W/V)xylenecyanolFF,60%glycerol,60mMEDTA己制量:50ml配制方法:称取下列试剂,置于50ml离心管中:溴酚兰0.125g向离心管中30ml去离子水,加热充分溶解。加入15ml甘油,最终用去离子水定容至50ml,混匀,室温保存。使用时,分装1ml一管,加入,4℃保存。5Xloadingbuffer(蛋白)1.称量下列试剂置于 10ml塑料离心

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