病理切片技术-学术报告课件

病理切片技术病理切片技术1目录一、取材二、固定三、脱水四、透明五、浸蜡六、包埋七、切片八、染色目录一、取材2一、取材取材是制作切片程序中的首要步骤，取材不当，将直接影响病理诊断和科研工作的效果。组织标本的选用非常重要，不能随意的切取组织来制作组织切片，否则病理检验的结果是不会令人满意的。一、取材取材是制作切片程序中的首要步骤，取材不当，将直接影响3取材工具：取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦，以免损害组织造成人为组织变化，给诊断带来困难或导致错诊，漏诊。取材工具：取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦，以免损4标本的选取：应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常组织交界处。组织宜小不宜大，以不超过24x24mm2为佳，厚度以3—5mm为度，过大过厚会影响对标本的固定，另方面也影响切片的制作。特殊目的者应属例外。标本的选取：应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常5二、固定在组织病理学中，不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的保存，都必须进行及时的适当的和有效的固定。组织只有经过固定，才能完成随后的一系列的制作，直至切片的最后完成。二、固定在组织病理学中，不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的61.固定的作用固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是：保持细胞、组织的固有形态和结构，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构。从免疫组化技术的角度，使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；保持组织的固有形态和结构；保持组织或细胞的抗原性。1.固定的作用固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是：保持72.固定的目的

能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。保存细胞固有的物质，能凝固或沉淀细胞内或组织液，糖原等，使细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样。使组织硬化，便于切块。对某些具有传染性的标本，能防止疾病的扩散。保存好大体标本。可增强染色的作用。2.固定的目的能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。83.固定的注意事项

组织固定越新鲜越好组织固定，组织块不宜过大对不同类型的组织应适当合理地选择固定液组织固定，时间不宜太短，也不宜太长固定液的量要充分特殊病例或特殊物质应选择特殊的固定液组织的第二次固定或后固定3.固定的注意事项组织固定越新鲜越好94.固定液的使用

根据Bencroft的分类法，可分为四种类型：醛类：甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。氧化剂类：四氧化锇，高锰酸钾，重铬酸钾等。蛋白变性类：甲醇，乙醇，醋酸等。其他：氯化汞，苦味酸等。上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。4.固定液的使用根据Bencroft的分类法，可分为四种类10冲洗组织经过固定后，脱水之前应进行冲洗，将组织内的固定液洗干净，否则残留组织内的固定液有碍制片和染色，而有些固定液则可在组织中继续起到脆化组织的作用，以至于损坏组织，给制片工作带来不利。在冲洗时，冲洗剂的选择应依固定液的种类和性质而有所不同。冲洗11冲洗时应注意以下事项：水溶性的固定剂：需用流水冲洗。酒精溶剂的固定剂：应用同浓度的酒精浸洗。含苦味酸的固定剂：（苦味酸与甲醛混合液除外），须用70％酒精浸洗。含有升汞固定剂：水或酒精中加碘以洗去组织内汞的沉淀。含有铬酸的固定剂：冲洗时置于暗处，以免产生沉淀或使组织硬化而影响制片。冲洗时应注意以下事项：12三、脱水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分，为下一步透明及浸蜡创造条件。此外，脱水还可以使组织再次发生一定的硬化，脱水剂必须是与水在任何比例下均能混合的液体。三、脱水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分，为下一步透明及131.常用的脱水剂酒精（常用）丙酮(Acetone)正丁醇(γ-Butyalcohol)二氧乙环(Dioxan)1.常用的脱水剂酒精（常用）142.组织的摇震为加快脱水进程可将标本放入各级酒精内借助机器或手工震摇，还可以加温促进脱水。即将标本装在塞紧的玻璃瓶置于包埋箱或温箱内，因液体受热产生的正压可增加溶液的对流。但热酒精会使组织过硬，并有爆裂危险，除急诊外，最好不用此方法。2.组织的摇震为加快脱水进程可将标本放入各级酒精内借助机器15四、透明目的是使石蜡渗透到组织中去，达到包埋的支持作用。将组织投入可以同酒精又能同石蜡相混合的媒剂中，组织中的酒精就被该媒剂取代，待酒精完全被该媒剂完全取代后，组织即成透明状态透明后就可以将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡四、透明目的是使石蜡渗透到组织中去，达到包埋的支持作用。16透明剂二甲苯：能与酒精，丙酮相混合，又是石蜡的溶剂。对组织的收缩性强，作用迅速，组织在二甲苯中时间不宜过长。(常用)氯仿：作用缓和，不易呈现透明现象香柏油：处理细柔组织的最佳透明剂。透明剂17五、浸蜡组织经媒剂的透明作用之后，移入熔化的石蜡内浸渍，石蜡逐渐浸入组织间隙，取代透明剂，这一程序就叫浸蜡。石蜡的质量和熔度与切片质量密切相关。为了增加石蜡的韧性，可在石蜡中加入一些混合剂，常用蜂蜡，硬脂酸，松香等。五、浸蜡组织经媒剂的透明作用之后，移入熔化的石蜡内浸渍，石蜡18六、包埋包埋，就是将已经经过固定，脱水，透明，浸蜡的组织块从最后的蜡浴取出置入充满熔融石蜡的包埋框内，包埋成块，使组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却，这个程序称为包埋。包埋剂凝固后，进一步加强了组织的硬度和韧度而便于进行切片。六、包埋包埋，就是将已经经过固定，脱水，透明，浸蜡的组织块从191.石蜡包埋法包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。手工包埋法：1.组织浸入石蜡后，包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。从恒温箱取出置于三角架上，其下点燃酒精灯，以保持石蜡的溶解状态。2.准备好包埋框，将包埋用的镊子在酒精灯上加温（防止镊子粘蜡）后，左手持蜡杯，右手把加温的镊子放在蜡口（直立状）倒蜡时让石蜡沿镊子注入包埋框内。1.石蜡包埋法包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。203.迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内，切面朝下放正置入框底并轻轻压平，以保证不再有气泡。4.待石蜡表面凝固前将标签贴于其上，需注意勿使标签与标本混淆，当蜡块冷至蜡面有一层透明蜡膜时，浸入冷水中迅速使其冷却，否则蜡内常形成结晶。5.蜡块完全硬固后除去铜框，以保证蜡彻底凝固，立即修切，准备制成切片或储藏备用。3.迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内，切面朝下放正置入框底并轻212.石蜡包埋流程组织取材，固定于福尔马林数小时后再换以新鲜福尔马林固定数小时。组织流水冲洗6－12小时。70％酒精2－4小时。85％酒精2－4小时。95％酒精（Ⅰ）2－4小时。（可过夜）95％酒精（Ⅱ）2－4小时。（可过夜）2.石蜡包埋流程组织取材，固定于福尔马林数小时后再换以新鲜福22100％酒精（Ⅰ）2－4小时。100％酒精（Ⅱ）2小时。二甲苯（Ⅰ）0.5－1小时。二甲苯（Ⅱ）0.5小时。浸蜡（Ⅰ）2小时。浸蜡（Ⅱ）2小时。组织包埋。（上述只供参考）100％酒精（Ⅰ）2－4小时。23七、切片一般的切片厚度要求在4—6微米。石蜡切片不但可以达到这个要求，甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。还便于制作大批的或是连续的切片。以石蜡包埋的组织块便于长期保存。所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中最普通常用的一种方法。七、切片一般的切片厚度要求在4—6微米。石蜡切片不但可以达到241.切片前的准备恒温水浴锅首先预热至35℃—40℃。蜡块整修，将蜡块组织面的石蜡用刀修去，使组织全部暴露出切面并修平，以减少切片刀的磨损。载玻片应事先洗涤干净，无油腻和不透明现象。将锋利的刀片装入切片刀夹钳内，调整角度和位置后随即紧固。备用小型毛笔、小型无钩镊子、铅笔。1.切片前的准备恒温水浴锅首先预热至35℃—40℃。252.切片的步骤将蜡块固定于切片机头上的夹座内，调整到稍离开切片能够切到的位置上，注意蜡块组织切面与切片刀口要垂直平行。再调整蜡块组织切面恰好与刀口接触，旋紧刀架，固定好机头。根据需要调整切片厚度。2.切片的步骤将蜡块固定于切片机头上的夹座内，调整到稍离开切26摇动切片机手轮先进行修整切片，直到切出完整的最大组织切面后，再进行切制。实践中可用右手转动切片机手轮，左手用毛笔托起蜡片，协调地进行切片操作。切下的切片带，一端用镊子轻轻拉起，应尽可能将切片带拉直展开，用毛笔将切片带从刀口向上挑起，拉下切片带，然后轻拖铺于恒温水面上。摇动切片机手轮先进行修整切片，直到切出完整的最大组织切面后，273.注意事项切片质量的好坏，除与技术熟练程度和切片机的好坏有关外，切片刀是决定的因素切片机的各个零件和螺丝应旋紧，否则将会产生震动在摇动切片机时，用力要求均匀一致在夏秋季节进行切片时，应使用冰块加强冷却3.注意事项切片质量的好坏，除与技术熟练程度和切片机的好坏有284.贴片将单张或数张切片，用镊子夹住蜡片的一边并提起，铺于恒温水中，（光亮的一面朝下）立即用毛笔轻轻拉展以切片无皱褶为最好。如有皱褶时用镊子细心地逐个轻轻拨开，注意不可拨破组织。然后分开每张切片，选取其中最完整的，没有皱褶的切片。4.贴片将单张或数张切片，用镊子夹住蜡片的一边并提起，铺于恒29待切片在恒温水内充分摊开展平后，将载玻片垂直插入水中轻靠切片，并用毛笔将切片一边拨于玻片上，随即将玻片直立提起，趁玻片上仍有少量水份时用毛笔，拨正切片位置。如组织较小，可在玻片上多贴几片或几排，但排列应密集、整齐。用铅笔在玻片一端的毛玻璃上写上标本编号将附贴好的切片置于恒温箱内干燥（温度一般高于石蜡熔点2-4℃）待切片在恒温水内充分摊开展平后，将载玻片垂直插入水中轻靠切片30八、染色染色就是利用染料在组织切片上给与颜色，使其与组织或细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。染色剂与组织细胞相结合而使组织细胞着色的过程与物理和化学作用两者都有关系。八、染色染色就是利用染料在组织切片上给与颜色，使其与组织或细311.染色过程苏木素浸染4-10分钟自来水洗片刻1％盐酸乙醇分化3-5秒钟自来水冲洗片刻-数小时饱和碳酸锂溶液1分钟自来水冲洗15分钟0.5％伊红酒精浸染1-2分钟1.染色过程苏木素浸染3295％乙醇11-2分钟95％乙醇21-2分钟100％乙醇11-2分钟100％乙醇21-2分钟二甲苯11-2分钟二甲苯21-2分钟树胶封片95％乙醇11-2分钟33常规苏木素-伊红染色HE染液配制1.Harris苏木素染液配制2.0.5%伊红酒精染液配制0.5克伊红溶于100毫升80%酒精中3.1%盐酸酒精配制1毫升盐酸溶于99毫升70%酒精中常规苏木素-伊红染色HE染液配制341克苏木素溶于10毫升无水酒精中；另将20克钾明矾加热溶于200毫升蒸馏水。二者混合煮沸，玻棒搅拌加0.5克氧化汞，流水冷却，隔夜过滤。1克苏木素溶于10毫升无水酒精中；另将20克钾明矾加热溶于235脱蜡二甲苯12分钟二甲苯22分钟95％乙醇1分钟95％乙醇1分钟自来水洗片刻脱蜡36染色：苏木素浸染4-10分钟自来水洗片刻1％盐酸乙醇分化3-5秒钟自来水冲洗片刻-数小时饱和碳酸锂溶液1分钟自来水冲洗15分钟0.5％伊红酒精浸染1-2分钟染色：37脱水，透明，封固95％乙醇11-2分钟95％乙醇21-2分钟100％乙醇11-2分钟100％乙醇21-2分钟二甲苯11-2分钟二甲苯21-2分钟树胶封片。结果：胞核呈蓝色，胞浆呈红色，红细胞呈桔红色，其它成分呈深浅不同红色。脱水，透明，封固38弹性、胶原纤维的双重组合染色法染液配制1.维多利亚蓝染色液的配制2.丽春红S染色液0.5%丽春红15毫升加苦味酸饱和水溶液85毫升弹性、胶原纤维的双重组合染色法染液配制39将维多利亚蓝2克，糊精0.5克，间苯二酚4克，蒸馏水200毫升混合加热煮沸，约5分钟后，加入煮沸的30%三氯化铁溶液25毫升，加热搅拌呈胶体状，去火冷却，将滤渣连同滤纸一起在60℃恒温箱烤干，残渣呈深蓝色颗粒状粉末，将其溶于400毫升70%酒精中，加盐酸4毫升和5克苯酚，放置一周后成熟。将维多利亚蓝2克，糊精0.5克，间苯二酚4克，蒸馏水200毫40染色方法组织切片脱蜡（同常规苏木素-伊红染色HE）切片入70%酒精冲洗2分钟切片入维多利亚蓝溶液30分钟95%酒精分色1-2分钟水洗2分钟丽春红染色2分钟无水酒精冲洗2次稍干燥后，二甲苯透明，中性树胶封片染色方法41结果显示弹性纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色，肌肉等背景色呈淡黄色。胶原纤维呈红色，平滑肌呈黄色。10X血管弹力纤维呈紫色。20X结果显示42请老师同学批评指正，谢谢！请老师同学批评指正，谢谢！43病理切片技术病理切片技术44目录一、取材二、固定三、脱水四、透明五、浸蜡六、包埋七、切片八、染色目录一、取材45一、取材取材是制作切片程序中的首要步骤，取材不当，将直接影响病理诊断和科研工作的效果。组织标本的选用非常重要，不能随意的切取组织来制作组织切片，否则病理检验的结果是不会令人满意的。一、取材取材是制作切片程序中的首要步骤，取材不当，将直接影响46取材工具：取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦，以免损害组织造成人为组织变化，给诊断带来困难或导致错诊，漏诊。取材工具：取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦，以免损47标本的选取：应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常组织交界处。组织宜小不宜大，以不超过24x24mm2为佳，厚度以3—5mm为度，过大过厚会影响对标本的固定，另方面也影响切片的制作。特殊目的者应属例外。标本的选取：应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常48二、固定在组织病理学中，不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的保存，都必须进行及时的适当的和有效的固定。组织只有经过固定，才能完成随后的一系列的制作，直至切片的最后完成。二、固定在组织病理学中，不管是组织切片乃至电镜还是大体标本的491.固定的作用固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是：保持细胞、组织的固有形态和结构，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构。从免疫组化技术的角度，使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；保持组织的固有形态和结构；保持组织或细胞的抗原性。1.固定的作用固定的作用，从组织学的角度其简单的定义是：保持502.固定的目的

能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。保存细胞固有的物质，能凝固或沉淀细胞内或组织液，糖原等，使细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样。使组织硬化，便于切块。对某些具有传染性的标本，能防止疾病的扩散。保存好大体标本。可增强染色的作用。2.固定的目的能防止细菌的腐蚀和组织的自溶。513.固定的注意事项

组织固定越新鲜越好组织固定，组织块不宜过大对不同类型的组织应适当合理地选择固定液组织固定，时间不宜太短，也不宜太长固定液的量要充分特殊病例或特殊物质应选择特殊的固定液组织的第二次固定或后固定3.固定的注意事项组织固定越新鲜越好524.固定液的使用

根据Bencroft的分类法，可分为四种类型：醛类：甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。氧化剂类：四氧化锇，高锰酸钾，重铬酸钾等。蛋白变性类：甲醇，乙醇，醋酸等。其他：氯化汞，苦味酸等。上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。4.固定液的使用根据Bencroft的分类法，可分为四种类53冲洗组织经过固定后，脱水之前应进行冲洗，将组织内的固定液洗干净，否则残留组织内的固定液有碍制片和染色，而有些固定液则可在组织中继续起到脆化组织的作用，以至于损坏组织，给制片工作带来不利。在冲洗时，冲洗剂的选择应依固定液的种类和性质而有所不同。冲洗54冲洗时应注意以下事项：水溶性的固定剂：需用流水冲洗。酒精溶剂的固定剂：应用同浓度的酒精浸洗。含苦味酸的固定剂：（苦味酸与甲醛混合液除外），须用70％酒精浸洗。含有升汞固定剂：水或酒精中加碘以洗去组织内汞的沉淀。含有铬酸的固定剂：冲洗时置于暗处，以免产生沉淀或使组织硬化而影响制片。冲洗时应注意以下事项：55三、脱水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分，为下一步透明及浸蜡创造条件。此外，脱水还可以使组织再次发生一定的硬化，脱水剂必须是与水在任何比例下均能混合的液体。三、脱水脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分，为下一步透明及561.常用的脱水剂酒精（常用）丙酮(Acetone)正丁醇(γ-Butyalcohol)二氧乙环(Dioxan)1.常用的脱水剂酒精（常用）572.组织的摇震为加快脱水进程可将标本放入各级酒精内借助机器或手工震摇，还可以加温促进脱水。即将标本装在塞紧的玻璃瓶置于包埋箱或温箱内，因液体受热产生的正压可增加溶液的对流。但热酒精会使组织过硬，并有爆裂危险，除急诊外，最好不用此方法。2.组织的摇震为加快脱水进程可将标本放入各级酒精内借助机器58四、透明目的是使石蜡渗透到组织中去，达到包埋的支持作用。将组织投入可以同酒精又能同石蜡相混合的媒剂中，组织中的酒精就被该媒剂取代，待酒精完全被该媒剂完全取代后，组织即成透明状态透明后就可以将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡四、透明目的是使石蜡渗透到组织中去，达到包埋的支持作用。59透明剂二甲苯：能与酒精，丙酮相混合，又是石蜡的溶剂。对组织的收缩性强，作用迅速，组织在二甲苯中时间不宜过长。(常用)氯仿：作用缓和，不易呈现透明现象香柏油：处理细柔组织的最佳透明剂。透明剂60五、浸蜡组织经媒剂的透明作用之后，移入熔化的石蜡内浸渍，石蜡逐渐浸入组织间隙，取代透明剂，这一程序就叫浸蜡。石蜡的质量和熔度与切片质量密切相关。为了增加石蜡的韧性，可在石蜡中加入一些混合剂，常用蜂蜡，硬脂酸，松香等。五、浸蜡组织经媒剂的透明作用之后，移入熔化的石蜡内浸渍，石蜡61六、包埋包埋，就是将已经经过固定，脱水，透明，浸蜡的组织块从最后的蜡浴取出置入充满熔融石蜡的包埋框内，包埋成块，使组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却，这个程序称为包埋。包埋剂凝固后，进一步加强了组织的硬度和韧度而便于进行切片。六、包埋包埋，就是将已经经过固定，脱水，透明，浸蜡的组织块从621.石蜡包埋法包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。手工包埋法：1.组织浸入石蜡后，包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。从恒温箱取出置于三角架上，其下点燃酒精灯，以保持石蜡的溶解状态。2.准备好包埋框，将包埋用的镊子在酒精灯上加温（防止镊子粘蜡）后，左手持蜡杯，右手把加温的镊子放在蜡口（直立状）倒蜡时让石蜡沿镊子注入包埋框内。1.石蜡包埋法包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。633.迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内，切面朝下放正置入框底并轻轻压平，以保证不再有气泡。4.待石蜡表面凝固前将标签贴于其上，需注意勿使标签与标本混淆，当蜡块冷至蜡面有一层透明蜡膜时，浸入冷水中迅速使其冷却，否则蜡内常形成结晶。5.蜡块完全硬固后除去铜框，以保证蜡彻底凝固，立即修切，准备制成切片或储藏备用。3.迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内，切面朝下放正置入框底并轻642.石蜡包埋流程组织取材，固定于福尔马林数小时后再换以新鲜福尔马林固定数小时。组织流水冲洗6－12小时。70％酒精2－4小时。85％酒精2－4小时。95％酒精（Ⅰ）2－4小时。（可过夜）95％酒精（Ⅱ）2－4小时。（可过夜）2.石蜡包埋流程组织取材，固定于福尔马林数小时后再换以新鲜福65100％酒精（Ⅰ）2－4小时。100％酒精（Ⅱ）2小时。二甲苯（Ⅰ）0.5－1小时。二甲苯（Ⅱ）0.5小时。浸蜡（Ⅰ）2小时。浸蜡（Ⅱ）2小时。组织包埋。（上述只供参考）100％酒精（Ⅰ）2－4小时。66七、切片一般的切片厚度要求在4—6微米。石蜡切片不但可以达到这个要求，甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。还便于制作大批的或是连续的切片。以石蜡包埋的组织块便于长期保存。所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中最普通常用的一种方法。七、切片一般的切片厚度要求在4—6微米。石蜡切片不但可以达到671.切片前的准备恒温水浴锅首先预热至35℃—40℃。蜡块整修，将蜡块组织面的石蜡用刀修去，使组织全部暴露出切面并修平，以减少切片刀的磨损。载玻片应事先洗涤干净，无油腻和不透明现象。将锋利的刀片装入切片刀夹钳内，调整角度和位置后随即紧固。备用小型毛笔、小型无钩镊子、铅笔。1.切片前的准备恒温水浴锅首先预热至35℃—40℃。682.切片的步骤将蜡块固定于切片机头上的夹座内，调整到稍离开切片能够切到的位置上，注意蜡块组织切面与切片刀口要垂直平行。再调整蜡块组织切面恰好与刀口接触，旋紧刀架，固定好机头。根据需要调整切片厚度。2.切片的步骤将蜡块固定于切片机头上的夹座内，调整到稍离开切69摇动切片机手轮先进行修整切片，直到切出完整的最大组织切面后，再进行切制。实践中可用右手转动切片机手轮，左手用毛笔托起蜡片，协调地进行切片操作。切下的切片带，一端用镊子轻轻拉起，应尽可能将切片带拉直展开，用毛笔将切片带从刀口向上挑起，拉下切片带，然后轻拖铺于恒温水面上。摇动切片机手轮先进行修整切片，直到切出完整的最大组织切面后，703.注意事项切片质量的好坏，除与技术熟练程度和切片机的好坏有关外，切片刀是决定的因素切片机的各个零件和螺丝应旋紧，否则将会产生震动在摇动切片机时，用力要求均匀一致在夏秋季节进行切片时，应使用冰块加强冷却3.注意事项切片质量的好坏，除与技术熟练程度和切片机的好坏有714.贴片将单张或数张切片，用镊子夹住蜡片的一边并提起，铺于恒温水中，（光亮的一面朝下）立即用毛笔轻轻拉展以切片无皱褶为最好。如有皱褶时用镊子细心地逐个轻轻拨开，注意不可拨破组织。然后分开每张切片，选取其中最完整的，没有皱褶的切片。4.贴片将单张或数张切片，用镊子夹住蜡片的一边并提起，铺于恒72待切片在恒温水内充分摊开展平后，将载玻片垂直插入水中轻靠切片，并用毛笔将切片一边拨于玻片上，随即将玻片直立提起，趁玻片上仍有少量水份时用毛笔，拨正切片位置。如组织较小，可在玻片上多贴几片或几排，但排列应密集、整齐。用铅笔在玻片一端的毛玻璃上写上标本编号将附贴好的切片置于恒温箱内干燥（温度一般高于石蜡熔点2-4℃）待切片在恒温水内充分摊开展平后，将载玻片垂直插入水中轻靠切片73八、染色染色就是利用染料在组织切片上给与颜色，使其与组织或细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。染色剂与组织细胞相结合而使组织细胞着色的过程与物理和化学作用两者都有关系。八、染色染色就是利用染料在组织切片上给与颜色，使其与组织或细741.染色过程苏木素浸染4-10分钟自来水洗片刻1％盐酸乙醇分化3-5秒钟自来水冲洗片刻-数小时饱和碳酸锂溶液1分钟自来水冲洗15分钟0.5％伊红酒精浸染1-2分钟1.染色过程苏木素浸染7595％乙醇11-2分钟95％乙醇21-2分钟100％乙醇11-2分钟100％乙醇21-2分钟二甲苯11-2分钟二甲苯21-2分钟树胶封片95％乙醇11-2分钟76常规苏木素-伊红染色HE染液配制1.Har