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文档简介
姓名导师俞琼,徐建刚,陈静,陈引淋病奈瑟菌的免疫胶体金检测及与传统方法的灵敏度比较目录123立题依据和国内外研究背景主要研究内容技术路线目录4567可行性分析创新性与特色分析进度安排预期成果1.2目前的淋病奈瑟菌检测技术1233.1涂片检查法培养检查法免疫学检测法酶联免疫吸附试验4567分子生物学检测技术淋病奈瑟菌基因芯片检测技术共凝试验快速检测淋病奈瑟菌泡沫快速试验3.2免疫胶体金技术1.3立题依据和国内外研究背景当前对于感染有淋病奈瑟菌的女性而言,早期绝大多数是无症状的状态。因此,我们猜测可以研制一种家庭快速检测淋病奈瑟菌的简易装置(类似于验孕棒,验孕棒的原理就是以怀孕女性尿液中升高的人绒毛膜促性腺激素——hcg作为抗原,利用免疫胶体金技术来检测是否怀孕,同理可用尿液中的淋病奈瑟菌的外膜蛋白作为抗原,利用免疫胶体金技术来检测是否感染)。为了确保该简易装置的可行性和提高检出率,本次实验将分离提纯淋病奈瑟菌的主要的外膜蛋白进行免疫胶体金试验,并对处于轻度症状的女性进行淋病奈瑟菌检测以估计免疫胶体金法的检出率。2主要研究内容123通过检测外膜蛋白PⅠ来检测淋病奈瑟菌的存在。分离提取淋病奈瑟菌的主要外膜蛋白,用免疫胶体金技术检出淋病奈瑟菌上。与传统的培养法进行灵敏度、检出率和阳性率的比较。3.1技术路线(前期)3.2技术路线(体外指标检测)线性关系灵敏度重复性、假阴性率123改变待测淋病奈瑟菌液的浓度,多次实验,计算不同浓度下检出率的变化,观察两种方法线性关系。尿液环境处理后,分别用免疫胶体金技术(采用多种标记单抗的混合物以提高灵敏度)和传统的培养法检测淋病奈瑟菌。假阳性率3设计一个浓度梯度检测两种方法检出的最低所需菌群浓度,最低浓度越低,灵敏度越高。确定一个浓度,在该浓度下进行多次重复检测实验,比较两种方法重复性的好坏和假阴性率。使用不含菌的培养液对两种方法进行多次检测,比较假阳性率高低。4可行性分析123淋球菌培养技术成熟胶体金特异性、敏感性高外膜蛋白PⅠ表达于所有淋病奈瑟菌菌株,高度保守,免疫原性强,易于培养和检测。6进度安排1-8周8-10周11-24周25-32周33-40周请输入您要的内容请输入您要的内容请输入您要的内容请输入您要的内容请输入您要的内容请输入您要的内容用TM培养基大量培养淋球菌标准菌株,同时进行实验动物培养。PⅠ蛋白的分离提取抗淋球菌单克隆抗体的制备;PⅠ蛋白与IgA1蛋白酶单克隆抗体的分离提纯免疫胶体金法检测PⅠ蛋白体外实验和临床实验指标测定,实用性分析7预期成果分离提取淋病奈瑟菌的主要外膜蛋白PⅠ,通过免疫
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