红细胞计数检验课件

第二章/第一节红细胞检查1整理ppt第二章/第一节红细胞检查1整理ppt2整理ppt2整理ppt3整理ppt3整理ppt4整理ppt4整理ppt正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。血液中红细胞数量可通过红细胞计数获得5整理ppt正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保红细胞计数（redbloodcellcount,RBC）测定单位体积血液中红细胞的数量诊断贫血及红细胞增多的指标之一红细胞计数的方法显微镜计数法血液分析仪法6整理ppt红细胞计数（redbloodcellcount,RB显微镜计数法（重点）用等渗液稀释血液后，滴入血细胞计数板，计数一定范围内的红细胞，经换算得每升血液中的红细胞数。检测原理

RBC未排除白细胞数量影响7整理ppt显微镜计数法（重点）检测原理RBC未排除7整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血加入2ml等渗液中，混匀混悬液充入改良牛鲍计数板高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个中方格内的红细胞总数A。换算？操作RBC/L=（A/5)×25×10×106×200=(A/100)×10128整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血操作RBC/L=（A/5)Neubauer计数盘9整理pptNeubauer计数盘9整理ppt血液分析仪法采用电阻抗法或激光检测法10整理ppt血液分析仪法采用电阻抗法或激光检测法10整理ppt方法学评价方法优点缺点适用范围显微镜计数法传统方法，设备简单，廉价费时费力，精密度低参考方法；分析仪异常结果复核血液分析仪法操作便捷，易于标准化，精密度高价贵；环境要求较高健康人群普查；大批量标本筛检11整理ppt方法学评价方法优点缺点适用范围显微镜计数法传统方法质量保证（显微镜法）技术误差仪器误差分布误差显微镜法红细胞计数误差来源有三个12整理ppt质量保证（显微镜法）技术误差显微镜法红细胞计数误差来源有三个稀释倍数不当2血液凝固4采血部位不当31充液不当33技术误差13整理ppt稀释倍数不当2血液凝固4采血部位不当31充液不当33技术误差参考值成年男性：（4.09～5.74）×1012/L成年女性：（3.68～5.13）×1012/L新生儿：（5.2～6.4）×1012/L婴儿：（4.0～4.3）×1012/L儿童：（4.0～4.5）×1012/LRBC存在年龄与性别的差异14整理ppt参考值成年男性：（4.09～5.74）×1012/LRBC存临床意义RBC＞参考值上限，RBC增多RBC＜参考值下限，即贫血生理性变化病理性变化15整理ppt临床意义RBC＞参考值上限，RBC增多生理性变化病理性变化1生理性增多

生理性缺氧引起16整理ppt生理性增多生理性缺氧引起16整理ppt6个月-2岁婴儿17整理ppt6个月-2岁婴儿17整理ppt相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞增多即消失。绝对性增多：①继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。②原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。病理性增多18整理ppt相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。通过补液，血19整理ppt19整理ppt20整理ppt20整理ppt病理性减少（贫血）313233生成减少

破坏过多

血管丢失

贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限。病因学分类21整理ppt病理性减少（贫血）313233生成减少破坏过多血红细胞生成减少骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。22整理ppt红细胞生成减少骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。细胞内在缺陷（遗传性缺陷）膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。细胞外在异常（获得性因素）免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等。红细胞破坏过多23整理ppt细胞内在缺陷（遗传性缺陷）红细胞破坏过多23整理ppt血液丢失：急、慢性失血性贫血24整理ppt血液丢失：急、慢性失血性贫血24整理ppt外伤引发的出血25整理ppt外伤引发的出血25整理ppt血红蛋白（hemoglobin，Hb）

在有核红及网织红内合成是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状合成速度受促红细胞生成素（EPO）与雄激素调节26整理ppt血红蛋白（hemoglobin，Hb）在有核红及网织红Hb（四聚体）珠蛋白血红素2条α链2条非α链原卟啉铁原子血红蛋白组成27整理pptHb珠蛋白血红素2条α链2条非α链原卟啉铁原子28整理ppt28整理ppt29整理ppt29整理ppt血液中血红蛋白的存在形式存在形式所占比例还原血红蛋白（Fe2+）正常成人>99%氧合血红蛋白碳氧血红蛋白硫化血红蛋白高铁血红蛋白（Fe3+）

1%Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。

30整理ppt血液中血红蛋白的存在形式存在形式血液的物理特性：比重法，折射仪法Hb的分子组成：全血铁法Hb与O2可逆性结合：血气分析法Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等检测原理31整理ppt血液的物理特性：比重法，折射仪法检测原理31整理pptHiCN法检测原理红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白（Hi），后者与试剂中的CN-结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在540nm处测定HiCN的吸光度，直接换算Hb浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。32整理pptHiCN法检测原理红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血20ul血液加入5ml转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零，测定标本（HiCN）在540nm的吸光度A。计算操作直接计算（符合WHO标准的分光光度计）Hb＝A×64458÷44000×251＝A×367.7以HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度A在标准曲线上查出Hb浓度33整理ppt20ul血液加入5ml转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零方法学评价缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂混浊、HbCO转化慢、不能测SHb。HiCN测定法（参考方法）

优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。34整理ppt方法学评价缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂混浊、HbCO方法学评价优点：操作简单，试剂无毒，结果准确，重复性好。缺点：SDS质量差异大；消光系数未定，不能直接计算Hb浓度；不能测定SHb；SDS破坏白细胞。

SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）

35整理ppt方法学评价优点：操作简单，试剂无毒，结果准确，重复性好。方法学评价优点：试剂简易无毒、呈色稳定、准确性与精密性较高。缺点：575nm波长比色，血液分析仪上应用受限，不能转化HbF。AHD575测定法36整理ppt方法学评价优点：试剂简易无毒、呈色稳定、准确性与精密性较高。方法学评价优点：准确度、精密度较高。缺点：试剂有毒、HbCO转化慢。HiN3测定法37整理ppt方法学评价优点：准确度、精密度较高。缺点：试剂有毒、Hb方法学评价优点：溶血强，不破坏白细胞，适用于血液分析仪。缺点：精密度、准确度低。CATB测定法38整理ppt方法学评价优点：溶血强，不破坏白细胞，适用于血液分析仪。缺点质量保证（比色法）

标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。技术操作：控制技术误差。废弃物：妥善处理废液。39整理ppt质量保证（比色法）标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性参考值成年男性：131～172g/L成年女性：113～151g/L新生儿：180～190g/L婴儿：110～120g/L儿童：120～140g/L老年（＞70岁）：男性94～122g/L女性87～112g/LHb存在年龄与性别的差异40整理ppt参考值成年男性：131～172g/LHb存在年龄40整理p临床意义（同红细胞计数）判断贫血程度优于红细胞计数临床应用注意事项Hb和RBC不一定正确反应全身红细胞总容量的变化。某些贫血，Hb和RBC减少程度可不一致，同时测定Hb和RBC，对诊断更有意义。41整理ppt临床意义（同红细胞计数）判断贫血程度优于红细胞计数41整理p贫血程度的判定分度Hb含量症状轻度：91g/L~正常值下限症状轻微中度：61g/L~90g/L活动后心悸、气促重度：31g/L~60g/L休息时也有心悸、气促极重度：<30g/L常合并贫血性心脏病42整理ppt贫血程度的判定分度Hb含量小结Hb测定方法学评价RBC显微镜计数法原理RBC计数的临床意义HiCN测定法原理43整理ppt小结Hb测定方法学评价RBC显微镜计数法原理RBC计数的临床谢谢44整理ppt谢谢44整理ppt第二章/第一节红细胞检查45整理ppt第二章/第一节红细胞检查1整理ppt46整理ppt2整理ppt47整理ppt3整理ppt48整理ppt4整理ppt正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。血液中红细胞数量可通过红细胞计数获得49整理ppt正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞数量保红细胞计数（redbloodcellcount,RBC）测定单位体积血液中红细胞的数量诊断贫血及红细胞增多的指标之一红细胞计数的方法显微镜计数法血液分析仪法50整理ppt红细胞计数（redbloodcellcount,RB显微镜计数法（重点）用等渗液稀释血液后，滴入血细胞计数板，计数一定范围内的红细胞，经换算得每升血液中的红细胞数。检测原理

RBC未排除白细胞数量影响51整理ppt显微镜计数法（重点）检测原理RBC未排除7整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血加入2ml等渗液中，混匀混悬液充入改良牛鲍计数板高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个中方格内的红细胞总数A。换算？操作RBC/L=（A/5)×25×10×106×200=(A/100)×101252整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血操作RBC/L=（A/5)Neubauer计数盘53整理pptNeubauer计数盘9整理ppt血液分析仪法采用电阻抗法或激光检测法54整理ppt血液分析仪法采用电阻抗法或激光检测法10整理ppt方法学评价方法优点缺点适用范围显微镜计数法传统方法，设备简单，廉价费时费力，精密度低参考方法；分析仪异常结果复核血液分析仪法操作便捷，易于标准化，精密度高价贵；环境要求较高健康人群普查；大批量标本筛检55整理ppt方法学评价方法优点缺点适用范围显微镜计数法传统方法质量保证（显微镜法）技术误差仪器误差分布误差显微镜法红细胞计数误差来源有三个56整理ppt质量保证（显微镜法）技术误差显微镜法红细胞计数误差来源有三个稀释倍数不当2血液凝固4采血部位不当31充液不当33技术误差57整理ppt稀释倍数不当2血液凝固4采血部位不当31充液不当33技术误差参考值成年男性：（4.09～5.74）×1012/L成年女性：（3.68～5.13）×1012/L新生儿：（5.2～6.4）×1012/L婴儿：（4.0～4.3）×1012/L儿童：（4.0～4.5）×1012/LRBC存在年龄与性别的差异58整理ppt参考值成年男性：（4.09～5.74）×1012/LRBC存临床意义RBC＞参考值上限，RBC增多RBC＜参考值下限，即贫血生理性变化病理性变化59整理ppt临床意义RBC＞参考值上限，RBC增多生理性变化病理性变化1生理性增多

生理性缺氧引起60整理ppt生理性增多生理性缺氧引起16整理ppt6个月-2岁婴儿61整理ppt6个月-2岁婴儿17整理ppt相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞增多即消失。绝对性增多：①继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。②原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。病理性增多62整理ppt相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。通过补液，血63整理ppt19整理ppt64整理ppt20整理ppt病理性减少（贫血）313233生成减少

破坏过多

血管丢失

贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限。病因学分类65整理ppt病理性减少（贫血）313233生成减少破坏过多血红细胞生成减少骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。66整理ppt红细胞生成减少骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。细胞内在缺陷（遗传性缺陷）膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。细胞外在异常（获得性因素）免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等。红细胞破坏过多67整理ppt细胞内在缺陷（遗传性缺陷）红细胞破坏过多23整理ppt血液丢失：急、慢性失血性贫血68整理ppt血液丢失：急、慢性失血性贫血24整理ppt外伤引发的出血69整理ppt外伤引发的出血25整理ppt血红蛋白（hemoglobin，Hb）

在有核红及网织红内合成是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状合成速度受促红细胞生成素（EPO）与雄激素调节70整理ppt血红蛋白（hemoglobin，Hb）在有核红及网织红Hb（四聚体）珠蛋白血红素2条α链2条非α链原卟啉铁原子血红蛋白组成71整理pptHb珠蛋白血红素2条α链2条非α链原卟啉铁原子72整理ppt28整理ppt73整理ppt29整理ppt血液中血红蛋白的存在形式存在形式所占比例还原血红蛋白（Fe2+）正常成人>99%氧合血红蛋白碳氧血红蛋白硫化血红蛋白高铁血红蛋白（Fe3+）

1%Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。

74整理ppt血液中血红蛋白的存在形式存在形式血液的物理特性：比重法，折射仪法Hb的分子组成：全血铁法Hb与O2可逆性结合：血气分析法Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等检测原理75整理ppt血液的物理特性：比重法，折射仪法检测原理31整理pptHiCN法检测原理红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白（Hi），后者与试剂中的CN-结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在540nm处测定HiCN的吸光度，直接换算Hb浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。76整理pptHiCN法检测原理红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血20ul血液加入5ml转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零，测定标本（HiCN）在540nm的吸光度A。计算操作直接计算（符合WHO标准的分光光度计）Hb＝A×64458÷44000×251＝A×367.7以HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度A在标准曲线上查出Hb浓度77整理ppt20ul血液加入5ml转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零方法学评价缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂混浊、HbCO转化慢、不能测SHb。HiCN测定法（参考方法）

优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。78整理ppt方法学评价缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂混浊、HbCO方法学评价优点：操作简单，试剂无毒，结果准确，重复性好。缺点：SDS质量差异大；消光系数未定，不能直接计算Hb浓度；不能测定SHb；SDS破坏白细胞。

SDS-Hb测定法（HiCN替代方法）

79整理ppt方法学评价优点：操作简单，试剂无毒，结果准确，重复性好。方法学评价优点：试剂简易无毒、呈色稳定、准确性与精密性较高。缺点：575nm波长比色，血液分析仪上应用受限，不能转化HbF。AHD575测定法80整理ppt方法学评价优点：试剂简易无毒、呈色稳定、准确性与精密性较高。方法学评价优点：准确度、精密度较高。缺点：试剂有毒、HbCO转化慢。HiN3测定法81整理ppt方法学评价优点：准确度、精密度较高。缺点：试剂有毒、Hb方法学评价优点：溶血强，不破坏白细胞，适用于血液分析仪。缺点：精密度、准确度低。CATB测定法82整理ppt方法学