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文档简介
艾滋病实验室检查演示文稿第一页,共十八页。优选艾滋病实验室检查第二页,共十八页。3实验室检查第三页,共十八页。4免疫学检测AIDS患者正常(×109/L)CD4<0.21(0.8~1.2)CD4/CD8<11.2~2.1淋巴细胞总数<12~3流式细胞仪测定第四页,共十八页。5血清学检测(1)HIV抗体的初筛试验——ELISA(酶联免疫试验)第五页,共十八页。6血清学检测(2)HIV抗体的确证试验——Westernblot(免疫印迹试验)第六页,共十八页。7血清学检测(3)HIV抗原检测——ELISA夹心法测定p24抗原敏感性很高(7~10pg/ml)特异性稍差(可有假阳性)第七页,共十八页。8分子生物学检测(1)HIVRNA检测—RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)PCR:高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃);经25~30个循环,成倍数扩增荧光定量PCR:比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针(带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子)应用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血浆中的病毒RNA第八页,共十八页。9分子生物学检测(2)淋巴细胞HIVRNA检测——Northern印迹杂交(Northernblot)
原理:RNA片段经电泳分离,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜,再用探针杂交第九页,共十八页。10分子生物学检测(3)HIV变异株检测——Sanger测序法
原理:核酸扩增时,核苷酸在某一固定点开始,随机在某一特定的碱基处终止,产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸,通过在尿素变性的PAGE胶上电泳,获得DNA序列第十页,共十八页。11病毒检测血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV操作复杂,主要用于科研第十一页,共十八页。12诊断第十二页,共十八页。13诊断原则流行病学史:有静脉注射毒品史;多个性伴和不洁性生活史;输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史;HIV抗体阳性所生的子女;其它(如职业暴露或医源性感染史)。临床表现:
高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现,颈、腋及枕部淋巴结肿大,肝脾肿大,可考虑急性HIV感染。无症状期、艾滋病期临床表现。
实验室检查:①HIV抗体阳性,并经确证试验确认。②CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIVRNA和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。第十三页,共十八页。14诊断标准急性期
★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性
★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性无症状期
★流行病学史、HIV抗体阳性
★仅实验室检查HIV抗体阳性
第十四页,共十八页。15诊断标准艾滋病期
★
流行病学史,HIV抗体阳性,临床表现有下列一项或以上:1.短期(6个月内)体重下降10%以上;2.咳嗽或腹泻超过4周;3.持续或间歇发热超过4周;4.全身淋巴结肿大;5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染;6.口咽念珠菌病;7.全身搔痒性皮炎;8.反复发生的败血症;9.深部真菌感染,马尔尼非青霉菌;10.肺孢子虫肺炎;11.活动性巨细胞病毒感染;12.弓形虫脑病。13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病;14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症;15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。ⅠⅠ第十五页,共十八页。16诊断标准
★HIV抗体阳性
CD4+T淋巴细胞数<200/mm3无上述表现或症状第十六页,共十八页。17鉴别诊断原发性CD4+淋巴细胞减少症
无HIV感染流行病学资料,HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。继发性
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