生物仪器使用课件

加样器

加样器加样器的校准校准环境和用具要求：室温：20~25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时，为保证天平内的湿度（相对湿度60-90%），天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。小烧杯：5~10ml体积。测定液体：温度为20~25℃的去气双蒸水。选定校准体积：拟校准体积；加样器标定体积的中间体积；最小可调体积（不小于拟校准体积的10%）。如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。校准步骤：将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头；调节好天平；来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头垂直握住加样器，将吸头浸入液面2~3mm处，缓慢（1~3秒）一致地吸取蒸馏水；将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；将加样器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一档，等待1~3秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；记录称量值；擦干吸头外面；按上述步骤称量10次；取10次测定值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附表所列蒸馏水Z因子计算体积。按校准结果调节加样器。

根据所需取液量选择相应的移液器及吸头，基因扩增实验要求使用带滤芯的吸头，防止交叉污染。吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到移液器头上；打出液体后拇指不应松开按钮，将吸液嘴压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。连续可调式移液器不可在无吸头时使用，吸头有液体时不可平放或倒置。注意事项

注意事项

操作时要慢和稳，吸嘴浸入液体深度要合适，吸液过程尽量保持不变；改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸嘴；发现吸嘴内有残液时必须更换；新吸嘴使用前应先预测。为防止液体进入移液器套筒内，注意以下几点：压放按钮时保持平稳；移液器不得倒转；吸嘴中有液体时不可将移液器平放；P5000及P10ML移液器一定要加过滤芯。切勿用油脂等润滑活塞或密封圈。使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后，最好拆下套筒，用蒸馏水清洗活塞及密封圈。注意事项

连续可调式移液器在取样加样过程中应注意移液嘴不能触及其他物品，以免被污染；移液嘴盒（架子）、废液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理，以方便操作过程、避免污染为原则。连续可调式移液器在使用完毕后应置于以液器架上，远离潮湿及腐蚀性物质。在取液之前，所取液体应在室温（15-25C）平衡；液体温度与室温有异时，将吸嘴预洗多次再用；移液温度不得超过70℃。不可把容量计数调超其适用范围。蒸馏水超纯水使用方法离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先平衡好的样品放置于转头样品架上（离心筒须与样品同时平衡），关闭机盖。按功能选择键，设置各项要求：温度、速度、时间、加速度及减速度，带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。待离心机完全停止转动时打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。注意事项机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。开机前应检查转头按装是否牢固，机腔有无异物掉入。样品应预先平衡。离心机运行时，离心机周围30cm范围内不能有人和危险物品。挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成事故。注意事项易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能离心。在没有相应的防护措施时，不能离心有毒的、放射性的物质或病原微生物。离心机运行时不可人为地打开盖子。如果转头和盖子有可见的腐蚀或磨损的痕迹，则应立即停止使用。使用的玻璃或塑料离心管应能承受相应的离心力并大小合适。非金属转头不可用紫外照射。如果被离心的物品密度大于说明书的规定范围，应根据RCF计算公式，减小离心体积。维护和保养转头应定期清洗和消毒。擦拭离心机腔时动作要轻，以免损坏机腔内温度感应器。使用消毒液处理时，温度不可超过25℃，时间不可超过规定时间。可以用高压消毒的转头，应在清洗后，121℃消毒20分钟，转头务必平放，并不受挤压，以免变形。每次操作完毕；应作好使用情况记录，并定期对机器各项性能进行检修。离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。超速离心过程中应注意的事项在医学领域中离心机主要用于分离细胞和细菌；纯化和收集病毒、RNA、DNA、质粒和蛋白质等生物大分子。一.离心机的组成离心机主要有驱动电机、制冷系统、真空系统（超离有）、显示系统、自动保护系统和控制系统组成。必要的配件为离心转头和离心管。二.离心转头的选用在离心中最常使用的转头是角度头和水平头。角度头常用于差速离心来分离s（沉降系数）值相差较大（1：10）的样品。2.水平头常用于密度梯度或等密度离心。另有一种垂直转头使用较少，此转头主要用于等密度离心，以缩短离心时间。三.离心管的选用1.玻璃离心管绝对不能在高、超速离心机上使用。2.PA(聚酰胺)管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。3.PP(聚丙烯)管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。4.PC(聚碳酸酯)管：透明度好，硬度大，能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂。主要用于5万(转/分)以上离心。5.CN(硝酸纤维素)管：质地较软，透明，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂，不能高压消毒。适合于蔗糖、甘油等密度梯度离心。应透明，利于收集。高、超速离心过程中应注意的事项注意事项1.对称平衡：当离心转速达1－5万（转/分）时，如对称管相差1克，转头半径5厘米，则离心力公式F=m×RCF查表得：1万（转/分）RCF=6000代入公式F=1×6000=6(公斤)5万（转/分）RCF=150000代入公式F=1×150000=150(公斤)此时引起两边不平衡可达6－150(公斤)，这对离心机的损伤是很大的，至少将缩短离心机的使用寿命。2.如离心管盖子密封性差液体就不能加满（针对高速离心且使用角度头），以防外溢。失去平衡外溢后果污染转头和离心腔影响感应器正常工作3.超速离心时，液体一定要加满离心管，应超离时需抽真空，只有加满才能避免离心管变形。4.使用角度头时别忘盖转头盖，如未盖，离心腔内会产生很大的涡流阻力和摩擦升温，这等于给离心机的电机和制冷机增加了额外负担，影响离心机的使用寿命。摇床脉冲场凝胶电泳双向电泳向电泳服务项目价格/点工作日MALDI-TOF-MS鉴定肽质量指纹谱技术300元1日谱图解析150元1日检索及结果分析(internet)：50元1日检索及结果分析100元1日分子量测定分子量小于10000Da200元5日分子量大于10000Da：250元5日分子量大于30000Da：300元5日混合物：400元5日聚合物：400元5日聚合物且为混合物500元5日其它难分析样品协商PCR扩增仪的使用与保养PCR仪应放在临床基因扩增实验室的第三区。仪器应放置水平台上，电源电压须与仪器要求电压相一致，并连接可靠的地线。仪器远离水源、明火及腐蚀性物质。工作室温要求：15-25℃，通风保证散热。接稳压电源。尤其是半导体升温降温的设备。每次实验时，最好能将扩增仪内的孔位全部放置样品管，若样品管少时可用空管代替，以保证实验的一致性和重复性。PCR扩增仪的使用与保养实验结束后应及时擦干孔位内存在的水分，盖上机盖。应定期使用电子测温仪校准温度。水浴式扩增仪应及时补充水，以免水量过少，影响温度稳定性。定期清洁热盖和反应孔。应用1、比较经过不处理样本之间特定基因的表达差异，及特定基因在不同时相的表达差异2、比较正常组织与病理组织中各种mRNA表达量差异

3、验证基因芯片实验结果4、验证RNA干扰实验结果

DNA测序仪1．菌种

新鲜的菌液或平板，4℃保存，时间不超过3天；沉淀菌体体积大于30µl。引物2．PCR产物

提供特异性扩增的产物和特异测序引物，产物浓度不低于30ng/µl，体积大于10µl；引物浓度不小于5pmol/µl，每个反应提供20pmol。3．纯化质粒

标明质粒纯化方法，浓度不低于100ng/µl,体积大于15µl,每个样品所用的载体，引物名称，单向或双向测序，插入片段大小。DNA合成仪ACGTACGT核酸、蛋白定量毛细管电泳1.药物分析

手性药物分析及体内的代谢过程

中药成份的分析2核酸分析

寡核苷酸纯度分析

DNA片段的分离分析及定量3.蛋白质研究

PCR产物的分析及定量