血液实验课件

实验一影响血液凝固的因素实验二出血时间和凝血时间的测定实验三ABO血型的鉴定背景知识见《生理学》教材第三章P58-74页血小板生理生理性止血的基本过程血液凝固血型与红细胞凝集红细胞血型输血原则目的原理动物药品器材方法与步骤注意事项结果与分析目的原理动物药品一、血液凝固（bloodcoagulation）血液由流体状态变为不能流动的胶冻状凝块的过程称为血液凝固，简称血凝。可溶性纤维蛋白原不可溶性纤维蛋白多聚体本质：[相关知识]2、凝血酶形成二、血液凝固过程1、凝血酶原酶复合物形成3、纤维蛋白形成纤维蛋白形成纤维蛋白原纤维蛋白单体纤维蛋白多聚体ⅩⅢⅩⅢaCa2+Ca2+凝血酶形成ⅡaⅡⅩ外源性凝血组织损伤释放ⅢCa2+ⅢⅦa凝血酶原酶复合物形成Ⅹ

ⅩaⅤaⅨⅨaⅫⅫa内源性凝血激肽释放酶前激肽释放酶ⅪⅪaPL

ⅧaCa2+PLCa2+接触异物接触异物Ca2+Ca2+通过与FII、FVII、FIX、FX结合并使其发生变构，暴露出与磷脂结合的部位来参与凝血。因此Ca2+在血凝过程中具有很重要的作用。三、Ca2+在血液凝固中的作用肝素在体内和体外都有抗凝作用，主要通过增加抗凝血酶的活性而发挥间接抗凝作用，使血液不凝。五、肝素在凝血过程中的作用[动物]家兔，2～3kg，雌雄均可[药品]

肝素、草酸钾、2%氯化钙溶液、肺组织浸液、富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水、石蜡油[器材]小烧杯、带橡皮刷的玻璃棒或竹签、清洁小试管10支、水浴装置一套、冰块、棉花、移液器（1ml、0.2ml）表7-2内源性凝血与外源性凝血的观察1号试管2号试管3号试管富血小板血浆(ml)0.2------------少血小板血浆(ml)------0.20.2生理盐水(ml)0.20.2------肺组织浸液(ml)------------0.2CaCl2(ml)0.20.20.2血液凝固时间(s)*比较血液凝固的时间(1与2比，2与3比)，分析产生差别原因取小试管7支，编号并按表7-4准备后，取家兔颈动脉血，每管1ml,在加3滴2%

CaCl2溶液时立即计时，每15″倾斜试管一次，以观察血液是否凝固，至血液呈凝胶状不再流动时记录血凝时间。2.观察影响血液凝固的理化因素实验条件加抗凝血加CaCl2凝血时间粗糙面⑴试管内加棉花1ml3滴⑵试管内涂石蜡油1ml3滴温度⑶试管置37℃水浴1ml3滴⑷试管置冰浴1ml3滴⑸加肝素0.2ml1ml3滴⑹加草酸钾0.2ml1ml3滴⑺对照管1ml3滴表7-4影响血凝的理化因素3.示教：观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用取血10ml，注入两个小烧杯中，一杯静置，另一杯用试管刷轻轻搅拌，几分钟后试管刷上结成红色血团，用水冲洗，观察纤维蛋白的形状，比较两杯的血凝情况。1．每试管口径大小及取血量应基本一致，判断试管倾斜角度（45º）、间隔时间（15s/次）、标准（血液不见流动）都应一致。2．采血有先有后，计时不应统一要求，各组和个人应分别单独计时。3．棉花不要压试管太紧，要松软。4．用石蜡油将试管表面全部润滑后，将石蜡油倒入水池中。5．取血前先准备好冰块，取完血后立即把第3号试管放入水浴锅，4号试管放入装有冰块的烧杯中。[注意事项]出血时间是指从针刺使毛细血管破损，血液自行流出到自行停止的时间。纸片法正常值：1~3分钟

生理性止血的过程

包括血管收缩、血小板血栓形成和纤维蛋白凝块的形成和纤维组织增生，长入血凝块达到永久止血。

[对象]人[药品]75%酒精棉球[器材]采血针、载玻片、滤纸条、秒表1．出血时间的测定(1)以75%酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧，待酒精自然挥发后，用消毒采血针刺入上述部位2～3mm深，让血液自然流出，切勿挤压，从血流流出算起计算时间。(2)每隔半分钟用滤纸吸干流出的血流一次，直到吸不到血液为止。(3)记录开始出血到止血的时间，或以滤纸上的血点数×0.5分钟来计算，其结果即为出血时间（分）。[方法与步骤]1.出血时间的测定2.凝血时间的测定[结果]受试者姓名出血时间解释受试者姓名凝血时间解释[注意事项]1．各种用具严格消毒。2．针刺手指或耳垂不宜过浅，深度2～3mm使血可自然流出为宜。如针刺部位深度不够，流血量太少不能用力挤压局部，应重新针刺。3．用滤纸吸血时，注意不要用滤纸触及皮肤伤口，以免影响结果的准确性。4．测定凝血时，应严格每隔半分钟用大头针挑血一次，不可太频繁，同时每次挑动血液要按一定方向和顺序进行，以免破坏纤维蛋白的网状结构而造成不凝的假象。实验三ABO血型的鉴定[目的]

学习ABO血型鉴定的实验方法，加深对ABO血型划分的理解。[原理]用已知的血清凝集素(抗A凝集素、抗B凝集素)来确定未知的红细胞膜上的凝集原（A凝集原和B凝集原）的种类，从而鉴定ABO血型。血型红细胞膜上的抗原血清中的抗体A型血A抗原抗BB型血B抗原抗AAB型血AB抗原——O型血——抗A和抗B各种血型的抗原和抗体分布情况血型的鉴定原理含B抗原的红细胞+抗B抗体红细胞凝集反应抗BRh血型的临床意义输血溶血新生儿溶血输血原则1、血型鉴定是安全输血的前提.2、输血前必须进行交叉配血试验(cross-matchtest）凝集凝集不凝集不凝集交叉配血试验交叉配血的主侧:供血者红细胞+受血者血清交叉配血的次侧:供血者血清+受血者红细胞

配血不合,不能输血配血相合,可以输血紧急情况少量缓慢输血,密切观察,如有输血反应,立即停止不凝集[对象]人[药品]抗A抗体和抗B抗体，生理盐水[器材]采血针、凹玻片、75%酒精棉球显微镜1．取双凹片一块，用蜡笔在两端分别写上A、B字样，在两侧凹内分别滴一滴抗A抗体和抗B抗体。2．用镊子夹取75%酒精棉球，消毒指端或耳垂及采血针，用采血针采一滴血，用玻片一角刮取少许血液在抗A抗体中摇匀，在再用玻片另一角刮取少许在抗B抗体中摇匀。3．将玻片轻轻转动数次，使血液血清充分混合，放置10～15min后肉眼观察有无凝集现象，若肉眼不能判断是否凝集，应放在显微镜下观察，鉴定结果。[方法与步骤]血液实验结果分析表7-2内源性凝血与外源性凝血的观察1号试管2号试管3号试管富血小板血浆(ml)0.2------------少血小板血浆(ml)------0.20.2生理盐水(ml)0.20.2------肺组织浸液(ml)------------0.2CaCl2(ml)0.20.20.2血液凝固时间(s)*比较血液凝固的时间(1与2比，2与3比)，分析产生差别原因1号试管与2号试管凝血时间对比现象：（）号试管快于（）号试管原因：结论：血小板（）血液凝固

2号试管与3号试管凝血时间对比现象：（）号试管快于（）号试管原因：结论：外源性凝血（）内源性凝血

实验条件加抗凝血加CaCl2凝血时间粗糙面⑴试管内加棉花1ml3滴⑵试管内涂石蜡油1ml3滴温度⑶试管置37℃水浴1ml3滴⑷试管置冰浴1ml3滴⑸加肝素0.2ml1ml3滴⑹加草酸钾0.2ml1ml3滴⑺对照管1ml3滴表7-4影响血凝的理化因素1号试管与2号试管凝血时间对比现象：（）号试管快于（）号试管原因：结论：接触面越（）血液凝固越（）

3号试管与4号试管凝血时间对比现象：（）号试管快于（）号试管原因：结论：酶的（）温度，能（）血液凝固

5号试管凝血时间现象：原因：结论：肝素具有（）作用6号试管凝血时间现象：原因：结论：草酸钾具有（）作用示教静止烧杯：搅拌的烧杯：