宫内感染的病原学诊断课件

CMV宫内感染的研究现状CMV宫内感染的研究现状1先天性感染新生儿感染也称为先天性感染（congenitalinfection)，主要包括宫内感染、产程感染和产后感染，其中宫内感染预后严重。其病原体主要包括：细菌，如李氏杆菌、军团菌、结核菌；寄生虫，如弓形虫（Toxoplasma,TOX）；病毒：风疹(Rubellavirus,RUV),巨细胞病毒(Cytomegilicvirus,CMV),单纯疱疹病毒(Herpessimplexvirus,HSV)乙型肝炎（HBV）爱滋病（HIV-1）其他病原体，如衣原体、支原体、梅毒；等所致的感染在新生儿期均有共同特点，故国外简称TORCH综合症。先天性感染新生儿感染也称为先天性感染（congenital2“T”代表弓形虫（Toxoplasma）“O”代表其他柯萨其病毒，衣原体等（Other）“R”代表风疹病毒（RubellaViruS）“C”代表巨细胞病毒（CytomegaloViruS）“H”代表单纯疱疹病毒（HerpesStmplexVirus），ToRCH综合症一组优生优育筛选常用检测对象TORCH综合症：是指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体，它是一组病原微生物的英文名称缩写：“T”代表弓形虫（Toxoplasma）ToRCH综合症3宫内感染的途径宫内感染有以下几种途径：病原体由母体血运经胎盘而进入胎儿血循环中，或因胎盘炎症进入羊水中。病原体经阴道、宫颈上行性感染。胎膜已破者病原体可直接进入羊水；若未破，则可经胎膜或蜕膜而污染羊水。病原体经输卵管下行性感染，由于绒毛膜、羊膜炎或蜕膜炎进入羊水。胎儿感染可由胎儿吞咽羊水至胃肠道内或吸入呼吸道内而感染。宫内感染的途径宫内感染有以下几种途径：4宫内感染的发病机制1.受孕前感染：病原体在孕前即进入卵细胞或精子，受精时产生‘先天转录’其病原体转入受精卵，使胚胎发育受阻。2.着床前感染：病原体依赖于生殖细胞进行增殖，导致胚胎畸变，残疾或流产。3.着床后感染：感染发生于妊娠1-3个月，导致重要器官系统发育缺陷。宫内感染的发病机制1.受孕前感染：病原体在孕前即进入卵细胞5宫内感染严重性的影响因素1.病原体的数量与毒力2.母体的免疫状态：初感时宿主免疫低下，感染后长期潜伏于体内，当宿主免疫力再度下降

病原体激活增殖再染受感染器官系统损害加重。3.胎儿成熟度。宫内感染严重性的影响因素1.病原体的数量与毒力6巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)7巨细胞病毒结构模拟图巨细胞病毒结构模拟图8CMV感染的基本特征CMVinfectsnotonlythefibroblasts,butalsothemajorityofbodycells.Theimmuneresponseisfocusedontwohuman-CMVproteins,theenvelopeglycoproteingBandthephosphoproteinpp65.Theviruslackstheenzymethymidinekinase,thereforeitisresistanttoantiviralagentsthatusethisenzymefortheiraction.Receptor:GEF-ReceptorandalphaVintegrin;CMV感染的基本特征CMVinfectsnotonly9CMVinfects60%ofwomenofchildbearingageindevelopedcountriesand90%indevelopingcountries(Griffiths,P.D.2002).CMVInfectionleavesthepatientswithoutsymptomsandCMVestablisheslatency,exceptforcaseswherethehost’simmunesystemiscompromised(AIDS,transplantpatientsandfetuses).congenitalCMVinfectioncanleadtosensorineuralhearingloss,mentalretardation,andneurologicdeficits.CMV感染的流行病学CMVinfects60%ofwomenofch10CMV感染对胎婴儿生长发育的影响（一）近期影响：流产、死胎、新生儿死亡，死亡率50%~80%；（二）远期：5%出现发育异常CMV感染对胎婴儿生长发育的影响（一）近期影响：流产、死胎、11宫内感染的病原学诊断课件12表1PCR检测27例畸形及死亡新生儿CMV感染的脏器分布脏器受检数阳性数阳性率（%）胸腺11654.6脑13753.9肝261350.0肺26623.1脾15320.0肾25728.0心2528.0淋巴腺100唾液腺111/1合计1414531.91表1PCR检测27例畸形及死亡新生儿CMV感染的脏器分13CMV的传播途径血行传播：①输注血液或血制品 ②母-婴间（垂直传播） ③脏器或组织移植唾液腺传播：（人-人，水平传播）乳汁传播：（哺乳期传播）精液传播：（性接触传播）CMV的传播途径血行传播：①输注血液或血制品14Mother-to-childtransmissionismainlytheresultofprimarymaternalCMVinfectionwhichcarriesariskoftransmissionvaryingfrom24%to75%(meanvalue40%);CasesofCMVtransmissionduetonon-primaryinfectionhavebeenreportedin1–2.2%ofcases,i.e.atamuchlowerratethanthoseresultingfromprimaryinfection;([Fowleretal.,1992]

CMV的母-婴传播途径Mother-to-childtransmissioni15孕妇CMV感染的诊断；胎儿CMV宫内感染的诊断；

CMV宫内感染的诊断孕妇CMV感染的诊断；CMV宫内感染的诊断16 1、病原学诊断：目前从血、分泌物、体液等标本中分离培养出病毒仍是诊断HCMV感染的金标准。 ①PCR法； ②病毒培养法;2、孕妇血清抗体水平的检测； 血清CMV特异性抗体的亚类鉴定；IgG与IgM 血清抗体的亲和力测定；孕妇CMV感染的诊断 1、病原学诊断：目前从血、分泌物、体液等标本中分离培养出病17CMV特异性细胞免疫功能测定CMV特异性细胞免疫功能测定18胎儿超声学检查：胎儿CMV感染后可有超声学异常表现,如胎儿生长受限、脑室肿大、腹水、颅内钙化和羊水量异常(通常为羊水过少)等；羊膜腔穿刺：CMV宫内感染时,病毒常可累及胎儿肾脏并在其中复制,含有CMV的脱落细胞可随胎儿尿液进入羊水中,故羊水中检出CMV或其基因片段；脐静脉穿刺：孕20周后可在超声引导下行脐静脉穿刺，所得胎血除可做病原体分离、基因扩增、特异性IgM抗体检测外,还可进行病毒定量和其它非特异指标的分析,包括血红蛋白、血小板、嗜酸性细胞数等血液学指标、转氨酶等生化指标；胎儿CMV宫内感染的诊断胎儿超声学检查：胎儿CMV感染后可有超声学异常表现,如胎儿19宫内感染的病原学诊断课件20宫内感染的病原学诊断课件21固相膜免疫检测固相膜免疫检测22CMV的防治现状---Vaccine;Vaccine;Activevaccineshaveincludedliveattenuatedvirus,killedvirusvaccine,andrecombinantvaccines；TherearecurrentlytwoCMVvaccinesinphaseIIstudies.OneistheCMVgB/MF59vaccinewhichisdisulfide-linkedglycoproteincomplex(gB)with130and55kDacomponents；TheothervaccineinhumantrialsistheTownestrain.Itisaliveattenuatedvaccineusedextensivelyinclinicaltrialsandissafe；CMV的防治现状---Vaccine;Vaccine;A23PassiveImmunizationduringPregnancyforCongenitalCytomegalovirusInfection;PassiveimmunizationwhichincludesbothhyperimmuneseraandseraraisedagainstthegBglycoproteinofgpCMVhasalsobeeneffectiveatreducingpupmortalityand/orpreventingcongenitalinfection；CMV的防治现状---被动免疫治疗;PassiveImmunizationduringPr24宫内感染的病原学诊断课件25TheendTheend26CMV引起的细胞病变CMV引起的细胞病变27HCMV感染的免疫学检测HCMV抗原血症（pp65、IE、p150）HCMV感染的免疫学检测HCMV抗原血症（pp65、IE、p28EkaterinaMaidji

JVirol.2007.

EkaterinaMaidjiJVirol.20029CMV的潜伏感染与再次激活 宿主状况(健康或正常)病毒潜伏(无临床症状) ------------------------------------------- 平衡状态 ↗(打破平衡) 生物的 物理的| 化学的| 等等 潜伏的病毒-------激活(复制)CMV的潜伏感染与再次激活 宿主状况(健康或正常)30A64yearoldwomanhadtakenoralcorticosteroidsfor2years,intreatmentofpolymyalgiarheumatica.Shenowpresentswithabdominalpainandrectalbleeding.Endoscopicexaminationofthecolonshowedcecalulcerations,andapartialbowelresectionwasultimatelyundertaken.

A64yearoldwomanhadtaken31HSV-1型所致唇疱疹HSV-1型所致唇疱疹32水痘-带状疱疹病毒感染所致的带状疱疹水痘-带状疱疹病毒感染所致的带状疱疹33结核病的病原体-结核分枝杆菌结核病的病原体-结核分枝杆菌34弓形体----虫卵囊弓形体----虫卵囊35传播途径的示意图传播途径的示意图36疱疹病毒(herpsvirus)疱疹病毒的电镜照片疱疹病毒(herpsvirus)疱疹病毒的电镜37宫内感染的病原学诊断课件38风疹病毒感染风疹病毒感染39梅毒(syphilis)苍白密螺旋体镜下形态（暗视野)一种性传播性疾病梅毒螺旋体梅毒亚种感染所致人是唯一宿主梅毒分先天/获得性梅毒诊治的参考指标:血清筛选试验血清学确诊试验梅毒(syphilis)苍白密螺旋体镜下形态（暗视野)一种性40胎盘粘住头部

内脏外翻畸形斜视、脑瘫胎盘粘住头部内脏外翻畸形斜视、脑瘫41孕妇CMV感染的诊断孕妇CMV感染的诊断42免疫球蛋白（抗体）的种类免疫球蛋白（抗体）的种类43宫内感染的病原学诊断课件44 用ELISA法检测外周血特异性抗体CMV-IgM、IgG，判断结果： IgM（+）IgG（﹣）活动性感染 IgM（+）IgG（+）再发感染 IgM（﹣）IgG（+）既往感染 IgM（﹣）IgG（﹣）易感者特异性抗体检测结果的分析 用ELISA法检测外周血特异性抗体CMV-IgM、I45通常情况下，抗体IgG阳性提示既往感染过此类病毒，但现在未处于活动期；抗体IgM阳性提示新近感染了病毒，或过去曾经感染过，现在复发了，处于活动期。因约40%的活动性感染容易引起胎儿的宫内感染，所以孕期检查主要检查孕妇血中的IgM抗体。但也有一些IgM抗体不高的孕妇，可能有潜在感染，也可能造成胎儿宫内感染。通常情况下，抗体IgG阳性提示既往感染过此类病毒，但现在未处46CMV宫内感染的研究现状CMV宫内感染的研究现状47先天性感染新生儿感染也称为先天性感染（congenitalinfection)，主要包括宫内感染、产程感染和产后感染，其中宫内感染预后严重。其病原体主要包括：细菌，如李氏杆菌、军团菌、结核菌；寄生虫，如弓形虫（Toxoplasma,TOX）；病毒：风疹(Rubellavirus,RUV),巨细胞病毒(Cytomegilicvirus,CMV),单纯疱疹病毒(Herpessimplexvirus,HSV)乙型肝炎（HBV）爱滋病（HIV-1）其他病原体，如衣原体、支原体、梅毒；等所致的感染在新生儿期均有共同特点，故国外简称TORCH综合症。先天性感染新生儿感染也称为先天性感染（congenital48“T”代表弓形虫（Toxoplasma）“O”代表其他柯萨其病毒，衣原体等（Other）“R”代表风疹病毒（RubellaViruS）“C”代表巨细胞病毒（CytomegaloViruS）“H”代表单纯疱疹病毒（HerpesStmplexVirus），ToRCH综合症一组优生优育筛选常用检测对象TORCH综合症：是指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体，它是一组病原微生物的英文名称缩写：“T”代表弓形虫（Toxoplasma）ToRCH综合症49宫内感染的途径宫内感染有以下几种途径：病原体由母体血运经胎盘而进入胎儿血循环中，或因胎盘炎症进入羊水中。病原体经阴道、宫颈上行性感染。胎膜已破者病原体可直接进入羊水；若未破，则可经胎膜或蜕膜而污染羊水。病原体经输卵管下行性感染，由于绒毛膜、羊膜炎或蜕膜炎进入羊水。胎儿感染可由胎儿吞咽羊水至胃肠道内或吸入呼吸道内而感染。宫内感染的途径宫内感染有以下几种途径：50宫内感染的发病机制1.受孕前感染：病原体在孕前即进入卵细胞或精子，受精时产生‘先天转录’其病原体转入受精卵，使胚胎发育受阻。2.着床前感染：病原体依赖于生殖细胞进行增殖，导致胚胎畸变，残疾或流产。3.着床后感染：感染发生于妊娠1-3个月，导致重要器官系统发育缺陷。宫内感染的发病机制1.受孕前感染：病原体在孕前即进入卵细胞51宫内感染严重性的影响因素1.病原体的数量与毒力2.母体的免疫状态：初感时宿主免疫低下，感染后长期潜伏于体内，当宿主免疫力再度下降

病原体激活增殖再染受感染器官系统损害加重。3.胎儿成熟度。宫内感染严重性的影响因素1.病原体的数量与毒力52巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)53巨细胞病毒结构模拟图巨细胞病毒结构模拟图54CMV感染的基本特征CMVinfectsnotonlythefibroblasts,butalsothemajorityofbodycells.Theimmuneresponseisfocusedontwohuman-CMVproteins,theenvelopeglycoproteingBandthephosphoproteinpp65.Theviruslackstheenzymethymidinekinase,thereforeitisresistanttoantiviralagentsthatusethisenzymefortheiraction.Receptor:GEF-ReceptorandalphaVintegrin;CMV感染的基本特征CMVinfectsnotonly55CMVinfects60%ofwomenofchildbearingageindevelopedcountriesand90%indevelopingcountries(Griffiths,P.D.2002).CMVInfectionleavesthepatientswithoutsymptomsandCMVestablisheslatency,exceptforcaseswherethehost’simmunesystemiscompromised(AIDS,transplantpatientsandfetuses).congenitalCMVinfectioncanleadtosensorineuralhearingloss,mentalretardation,andneurologicdeficits.CMV感染的流行病学CMVinfects60%ofwomenofch56CMV感染对胎婴儿生长发育的影响（一）近期影响：流产、死胎、新生儿死亡，死亡率50%~80%；（二）远期：5%出现发育异常CMV感染对胎婴儿生长发育的影响（一）近期影响：流产、死胎、57宫内感染的病原学诊断课件58表1PCR检测27例畸形及死亡新生儿CMV感染的脏器分布脏器受检数阳性数阳性率（%）胸腺11654.6脑13753.9肝261350.0肺26623.1脾15320.0肾25728.0心2528.0淋巴腺100唾液腺111/1合计1414531.91表1PCR检测27例畸形及死亡新生儿CMV感染的脏器分59CMV的传播途径血行传播：①输注血液或血制品 ②母-婴间（垂直传播） ③脏器或组织移植唾液腺传播：（人-人，水平传播）乳汁传播：（哺乳期传播）精液传播：（性接触传播）CMV的传播途径血行传播：①输注血液或血制品60Mother-to-childtransmissionismainlytheresultofprimarymaternalCMVinfectionwhichcarriesariskoftransmissionvaryingfrom24%to75%(meanvalue40%);CasesofCMVtransmissionduetonon-primaryinfectionhavebeenreportedin1–2.2%ofcases,i.e.atamuchlowerratethanthoseresultingfromprimaryinfection;([Fowleretal.,1992]

CMV的母-婴传播途径Mother-to-childtransmissioni61孕妇CMV感染的诊断；胎儿CMV宫内感染的诊断；

CMV宫内感染的诊断孕妇CMV感染的诊断；CMV宫内感染的诊断62 1、病原学诊断：目前从血、分泌物、体液等标本中分离培养出病毒仍是诊断HCMV感染的金标准。 ①PCR法； ②病毒培养法;2、孕妇血清抗体水平的检测； 血清CMV特异性抗体的亚类鉴定；IgG与IgM 血清抗体的亲和力测定；孕妇CMV感染的诊断 1、病原学诊断：目前从血、分泌物、体液等标本中分离培养出病63CMV特异性细胞免疫功能测定CMV特异性细胞免疫功能测定64胎儿超声学检查：胎儿CMV感染后可有超声学异常表现,如胎儿生长受限、脑室肿大、腹水、颅内钙化和羊水量异常(通常为羊水过少)等；羊膜腔穿刺：CMV宫内感染时,病毒常可累及胎儿肾脏并在其中复制,含有CMV的脱落细胞可随胎儿尿液进入羊水中,故羊水中检出CMV或其基因片段；脐静脉穿刺：孕20周后可在超声引导下行脐静脉穿刺，所得胎血除可做病原体分离、基因扩增、特异性IgM抗体检测外,还可进行病毒定量和其它非特异指标的分析,包括血红蛋白、血小板、嗜酸性细胞数等血液学指标、转氨酶等生化指标；胎儿CMV宫内感染的诊断胎儿超声学检查：胎儿CMV感染后可有超声学异常表现,如胎儿65宫内感染的病原学诊断课件66宫内感染的病原学诊断课件67固相膜免疫检测固相膜免疫检测68CMV的防治现状---Vaccine;Vaccine;Activevaccineshaveincludedliveattenuatedvirus,killedvirusvaccine,andrecombinantvaccines；TherearecurrentlytwoCMVvaccinesinphaseIIstudies.OneistheCMVgB/MF59vaccinewhichisdisulfide-linkedglycoproteincomplex(gB)with130and55kDacomponents；TheothervaccineinhumantrialsistheTownestrain.Itisaliveattenuatedvaccineusedextensivelyinclinicaltrialsandissafe；CMV的防治现状---Vaccine;Vaccine;A69PassiveImmunizationduringPregnancyforCongenitalCytomegalovirusInfection;PassiveimmunizationwhichincludesbothhyperimmuneseraandseraraisedagainstthegBglycoproteinofgpCMVhasalsobeeneffectiveatreducingpupmortalityand/orpreventingcongenitalinfection；CMV的防治现状---被动免疫治疗;PassiveImmunizationduringPr70宫内感染的病原学诊断课件71TheendTheend72CMV引起的细胞病变CMV引起的细胞病变73HCMV感染的免疫学检测HCMV抗原血症（pp65、IE、p150）HCMV感染的免疫学检测HCMV抗原血症（pp65、IE、p74EkaterinaMaidji

JVirol.2007.

EkaterinaMaidjiJVirol.20075CMV的潜伏感染与再次激活 宿主状况(健康或正常)病毒潜伏(无临床症状) ------------------------------------------- 平衡状态 ↗(打破平衡) 生物的