最新高中生物选修一知识清单

高中生物《选修一》知识清单整理果酒和果醋的制作一、基础知识1、果酒制作的原理（1）所需微生物是 _，从异化作用看属于 _微生物。有氧时进行有氧呼吸，反应式；无氧时进行国呼吸，反应式。（2）温度：20oC最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般在18—250C。时间：控制在10—最天。（3）酵母菌的来源是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。（4）红葡萄皮色素进入发酵液葡萄酒呈现深红色,。缺氧、酸性的发酵液，其他绝大多数微生物受到抑制。2、果醋制作的原理（1）所需微生物是醋酸菌，只能在氧气充足时进行旺盛的生理活动。变酸的酒的表面观察到的菌膜是_ _。该微生物对氧气非常敏感，即使入氧气也会引起醋酸菌死亡。（2）果醋产生的途径：氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；糖源不充足时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应式是。（3）醋酸菌的最适生长温度为— 。发酵时间为7——8天。（4）醋酸菌的来源是_空气中醋酸菌孢子落入.二、实验操作过程1、选择新鲜葡萄冲洗并除去枝梗：将榨汁机清洗干净并晾干，发酵瓶用70%的酒精消毒：榨汁后将葡萄汁装入发酵瓶，要留1Z3的空间，并封闭充气口，以提供无氧环境。酒精发酵产生CO2，要经常放气。用酸性条件下重铭酸钾与酒精反应呈灰绿色来检杳是否有酒精产生。5、果酒制作成功后，打开充气口，提供氧气，继续制作果醋。腐乳的制作一、基础知识1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉2、毛霉是丝状真菌，分布广泛，常见于土壤、蔬菜、谷物上。生长迅速，具有发达的白色菌丝3、腐乳发酵过程中：蛋白酶将蛋白质分解成肽和氨基酸;脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸二、实验设计1、长毛霉：豆腐块放在笼屉内，温度控制在15—18。（，并保持一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长,3d之后_菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。2、腌制：逐层加盐，逐渐增多；析出水份，抑制杂菌；盐的浓度过低，则豆腐腐败变质，盐的浓度过高，则影响口味。时间8天左右。3、配制卤汤，加卤汤装瓶：卤汤由酒和各种辛香料配制而成的。酒种类有料酒、黄酒、米酒等，含量一般控制在12%，抑制微生物的生长。酒精含量过高，则成熟时间延长，酒精含量过低，则导致腐败。香辛料：如胡椒、花椒、八解、桂皮等，可以调制风味，也有防腐杀菌作用。腐乳生产过程中能够抑制微生物生长的物质有。4、密封腌制：防止杂菌污染（器皿洗净消毒、瓶口过火焰、密封）制作泡菜并检测亚硝酸盐含量一、基础知识1、微生物是乳酸菌，在空气、土壤、植物体表、人和动物肠道内都有分布。是厌氧细菌，在无氧条件下发生反应是。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌，后者常用于生产酸奶。2、亚硝酸盐为白色粉末、易溶于水。用作食品添加剂。蔬菜中亚硝酸盐含量平均在4mg/kg，咸菜中平均7mg/kg，豆粉中达10mg/kg。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3-0.5g会引起中毒，达到3g会引起死亡。我国卫生标准规定，亚硝酸盐的残留量在肉制品中不得超过30mg/kg，酱腌菜中不超过20mg/kg而婴儿奶粉中不得超过2mg/kg。亚硝酸盐在特定条件下（适宜西、温度和一定微生物作用）转变成致癌的亚硝胺，对动物也有致畸和致突变作用。3.亚硝酸盐含量测定的原理：将显色后样品与标准液进行比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。盐酸+对氨基苯磺酸+亚硝酸盐-f重氮反应后+N-1-萘基乙二胺盐酸盐-f玫瑰红色染料1、选择泡菜坛：主要检杳坛子的气密性1、选择泡菜坛：主要检杳坛子的气密性2、按照流程图制作泡菜（画出流程图）廊t二T瑾谈,酒席葩陶邙P:一如百在节•用Er 一成品艰小不坐L缓割」3、测定亚硝酸盐含量的操作（1）配制溶液：盐酸+对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、提取剂、氢氧化铝乳液、NaOH溶液（2）制备标准显色液：（3）制备样品处理液：思考提取剂、NaOH溶液、氢氧化铝乳液的作用（4）比色：测量时间是_ __。实验四 微生物的实验室培养一、基础知识（一）培养基1、分类：按物理形态分固体培养基、半固体培养基和液体培养基种：按功能分诜择培养基、鉴别培养基2、成分：一般含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐，还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求、例如培养乳酸杆及时需添加维生素：培养霉菌时需将PH调至酸性：培养细菌时需将PH调至中性或微碱性：培养厌氧微生物时需要提供无氧条件。（二）无菌技术1、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。2、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，常用煮沸法、酒精擦、氯气消毒等：灭菌是指使用较为强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽胞和徇子。常用灼烧、干热、高压蒸汽灭菌等。主要包括4个方面：（1）对实验操作的空间、操作者的手、衣着进行清洁和消毒:（2）培养的器皿、接种用具和培养基进行灭菌；（3）实验操作应在酒精灯火焰附近进行;（4）避免已灭菌处理的材料用具与周用的物品接触。二、培养大肠杆菌的实验操作1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算一称量一溶化一灭菌一倒平板（培养其他微生物时往往在三、四步之间加一步;第四步需要的条件是培养基高压锅内压力100血2、温度1210〃培养皿干热灭菌箱160——1700c下灭菌2小时。第五步条件培养基冷却至50<^左右，在酒精灯火焰旁，（具体操作步骤见P17图）2、纯化大肠杆菌：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。涂布平板（常用来统计样品中活菌的数目）3、培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入3!£恒温箱中，定期观察并记录结果。*思考：频繁使用的菌种采用临时保藏，将菌种接种到固体斜面培养基上在合适的温度下待菌落长成后放入40C冰箱保藏，。需要长期保存的菌种采用甘油管藏方法，在3ml的瓶中装入1ml甘油并灭菌然后将1ml菌液转移到瓶中与甘油充分混合放在-200C冷冻箱保存。土壤中分解尿素的细菌的分离与记数一、基础知识1、筛选菌株：利用选择培养基。配制以尿素作为唯一氮源的培养基可以筛选出分解尿素的细菌2、统计菌落数目（1）要统计样品中活菌的数目，常用的方法是稀释涂布平板法。另外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。（2）统计平板上的菌落数，一般选择菌落数在30—300个的平板进行计数。多选几个平板，计算平均值。（3）平板计数统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是多个菌落在一起时观察到的只是一个菌落因此统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。3、设置对照：P23小字题目二、实验设计1、土壤取样：（防止杂菌污染的措施：取样用的物品都要灭菌）一般取距地表3—5cm的土壤层。2、稀释土壤样品：（防止杂菌污染的措施：每一步都要在酒精灯火焰旁操作）稀释的原则：保证样品培养后能获得菌落数在30——300个之间的适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105、106的稀释液进行平板培养；（放线菌菌的数量，一般选用、103、104、105的稀释液进行平板培养；真菌的数量，一般选用102、103、104的稀释液进行平板培养）3、微生物的培养与观察：（标记培养皿应注明培养基种类、培养日期、稀释度等；已经成为稀释操作过的试管按稀释梯度依次放置于试管架另一行。）细菌一般在30—37℃下培养1—2天。（放线菌一般在25—287℃下培养5—7天；霉菌一般在25—287℃下培养3—4天。）可以每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。上述实验方法只是对分解尿素的细菌进行了初步的筛选，要进一步鉴定，还需要借助生物化学的方法。由于在细菌分解尿素的化学反应（写出反应式）中，产生了氨，使培养基

的pH升高，因此可以在培养基中加入酚红指示剂，若变红，则说明该种细菌的确能分解尿素。分解纤维素的微生物的分离一、基础知识1、纤维素与纤维素酶（1）纤维素酶是一种复合酶，至少三种组分，即肌酶、Cx酶、葡萄糖昔酶.前两种酶将纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖（2）写出反应式 （3）反应的pH为4.8。2、筛选:①刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。②纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。③筛选步骤：土壤取样一选择培养一梯度稀释一将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上一挑选产生诱明圈的菌落。选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，3、纤维素分解菌的鉴定：利用鉴别培养基，其中的鉴定物质是刚果红二、实验设计：土壤取样一选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）一梯度稀释一将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上一挑选单菌落一发酵培养1、土壤取样：采集土样的环境是富含纤维素，还可以将富含纤维素的物质埋在土壤里30天后从中筛选纤维素分解菌。2、选择培养：应采用液体培养基（从物理形态看），理由是未添加琼脂3、梯度稀释:思考：应稀释多少，理由是什么？4、染色培养:可以先培养微生物，再加入刚果红：也可以在倒平板时就加入刚果红5、挑选产生透明圈的菌落菊花的组织培养.基础知识1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的潜能，即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖：培育脱毒作物：制作人工种子：培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。细胞分化是一种持久性的变化，使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。1.4愈伤组织是通过细胞分裂形成，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。组织类型细胞来源细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生组织受精卵正方形无液泡紧密分化成多种细胞组织愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体相同植物组犍断的过程可眸单表示为殖离体细胞、组织、器官_ ^愈伤^ 一睬为求,比…新（ ） （ ）胚胚状体（生长）1.6底叫：外植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择未开化植物的莘上部新萌生的侧枝作材料。一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。1.7营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、、、、a、g,微量元素是回Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、小，有机物有甘氨酸.、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。1.8激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素，后生长素细胞无分裂也分化同时使用分化频率提高生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化，抑芽形成比值低时促与分化，抑根形成比值适中促进愈伤组织生长1.9环境条件：PH、温度、光等环境条件。菊花组培所需PH为5.8，温度为18-22℃,光照条件为每日用日光灯照射12小时。2.实验设计配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的浓缩倍数，计算用量，并加蒸馏水稀释。配制培养基：应加入物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸馏水定容到1000毫升。在菊花组织培养中，可以不添加植物激素，原因是菊花茎段组织培养比较容易。3灭菌：采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。MS培养基中，大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主，MS培养基则需提供大量无机营养。“外植体消毒”流程图：嫩枝一（流水）一刷分钟黑一（无菌吸水纸）一（70%的酒精）［（无菌水）清洗彳—（氯化汞）溶液<―（无菌吸水纸）V—（无菌水）清洗W—对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力“接种、培养、移栽和栽培”：前期准备：用70%的酒精消毒工作台，点燃酒精灯。注意所有接种工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。接种操作：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种7^8个外植体。外植体接种与细菌接种相似之处是操作步骤相同，而且都要求无菌操作。3.3培养过程应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照。3.4移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。外植体在培养过程中可能会被污染，造成污染的原因可能外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底：接种中被杂菌污染:锥形瓶密封性差等。月季的花药培养.被子植物花粉发育过程.被子植物的花粉是在雄蕊中由花粉母细胞经过减数分裂形成的。所以，花粉是单倍体的生殖细胞。.填图：被子植物的花粉的发育要经历小孢子四分体小孢子四分体时期单核期和双核期等阶段。在正常情况下，一个小抱子母细胞可以产生2个精子；在一枚花药中可以产生许多个花粉。.产生花粉植株的两条途径.产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过胚状体J阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段诱导分化成植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度一的配比。.填写培育花粉植株的途径图解：.胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为分化，而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。.植物体细胞发育而来的胚状体又叫体细胞胚，花粉发育而来的胚状体叫花粉胚，可发育为单倍体植物，要使其成为纯合的正常植株，可用秋水仙素处理发育中的幼苗。.影响花药培养的因素.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。.材料的选择：①从花药来看，应当选择初花期的花药；②从花粉来看，应当选择单核靠边期的花粉，因为单核期以前的花药幼嫩易破碎，选择单核期以后的花药接种，花瓣松动难消毒：③从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾。除此之外，植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等，也有影响。.实验设计.材料的选择选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是醋酸洋红法和焙花青一铭钒法，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。.材料的消毒.接种和培养.剥取花药：消毒后的花蕾，要在无菌条件下除去花萼、花瓣。剥离花药，尽量不损伤花药，否则易从受伤处产生愈伤组织还要彻底除去花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成.接种花药：剥取的花药要立刻接种到MS培养基上。每个培养瓶接种7—10花药。.培养：pH为5.8,25℃,幼苗形成之前不需要光照。.培养20—30d后，花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。前者还要转移到新培养基进行分化培养成再生植株；后者要尽快分开小植株并转移到新的培养基上。.通过愈伤组织形成的植株，常常会出现染色体倍性的变化，因而需要鉴定和筛选。植物组织培养技术与花药培养技术相同之处：培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。不同之处：花药培养的选材非常重要，需事先找时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花北培养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药的培养难度加大。果胶酶在果汁生产中的作用.基础知识1果胶是植物细胞壁和胞间层的主要组成成分之一。2在果汁加工中，果胶的存在易导致果汁出汁率低，果汁浑浊。3果胶酶分解果胶的作用是：①瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更容易，②把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变得澄清，因此可以解决果汁加工中出现的问题。4果胶酶是一类酶的总称，包括：,多聚半乳糖醛酸一酶、果胶分解酶和果胶酯一酶。在植物细胞工程中果胶酶的作用是与纤维素酶一起除去植物细胞的细胞壁。5酶的活性是指：酶催化一定化学反应的能力。1.6酶的活性高低可用一定条件下的酶促反应速度_来表示，即单位时间、单位体积内反应物消耗量—或产物生成量来表示。1.7影响酶活性的因素有： 温度、PH、激活剂和抑制剂等。食品工业生产中最常用的果胶酶是通过霉菌发酵_产生。根据影响酶活性的因素，在实际生产中通过确定果胶酶的最适温度3适TH等条件获得果胶酶的最高活性。2.实验设计2.1实验目的： 定量测定温度或pH对果胶酶活性的影响该实验与必修I中探究“影响酶活性的条件”实验有何不同？

前者属于是定量分析实验，后者属于定性分析实验。2实验原理：果胶酶瓦解细胞壁和胞间层增大果汁产量；果胶酶催化分解果胶增大果汁澄清度3变量设计与控制：①你确定的温度梯度（或pH梯度）为10℃或5℃（或0.5、1.0）_。②实验的自变量是温度（或pH），控制自变量的方法是利用恒温水浴锅（或滴加酸碱等）_。③实验的因变量是酶的活性_,检测因变量的方法是测定果汁的产出量或澄清度_。果汁与果胶酶在混合之前，分装在不同试管中用同一恒温处理的目的是保证果汁与果胶酶混合前后的温度相同，避免因混合导致温度变化而影响果胶酶活性。该实验中不同的温度设置之间相互对照。控制PH和其他因素相同，保证只有温度一个变量对果胶酶的活性产生影响。3.操作提示制备果泥：用榨汁机榨制果泥。在榨制橙子汁时不必去橙皮2在探究不同PH对果胶酶活性的影响时，可以用0.1%的NaOH溶液和盐酸调节pH。3在果胶酶处理果泥时，为了果胶酶能充分地催化反应，用玻璃棒不时搅拌。结果分析与评价将以下某同学实验数据转换成曲线图。将实验数据转换成曲线图的方法①以自变量为横坐标、以因变量为纵坐标建立直角坐标系。②注明坐标轴名的名称、单位、坐标原点以及曲线名称。③每个坐标轴上的取值单位要相等。④将实验数据标在坐标系中，并用各种线型连接起来。温度℃101520253035404550果汁量/ml124654321探讨加酶洗衣粉的洗涤效果一、基础知识1.加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。同样道理，其他酶也是将大分子物质分解为小分子物质，从而使洗衣粉具有更好的去污能力。2、使用加酶洗衣粉时，影响酶活性的因素有温度、酸碱度、表面活性剂等，为此，科学家通过基因工程生产出了特殊的酶，并制成酶制剂，解决了这个问题。3、加酶洗衣粉可以降低表面活性剂和三聚磷酸钠的用量，使洗涤剂朝低磷无磷的方向发展，减少对环境的污染。二、实验设计实例1.探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果实验原理：加酶洗衣粉中含有一种或多种酶，可以将相应的大分子物质分解为小分子物质，从而使污迹容易从衣物上脱落，这是普通洗衣粉难以做到的。实验思路：自变量：加酶洗衣粉、普通洗衣粉：应变量:相同时间污迹残留量或洗去污迹所需的时间。除自变量不同外，其它因素要完全相同。实例2.探讨温度对加酶洗衣粉洗涤的影响实验原理：酶的活性受温度影响，在最适温度时，酶的活性最高，高于或低于最适温度时，酶的活性下降。实验思路：自变量：不同温度：应变量:相同时间污迹残留量或洗去污迹所需的时间。除自变量不同外，其它因素要完全相同。实例3.不同种类的加酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果实验原理：不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同，而酶具有特异性，所以对不同污渍的洗涤效果不同。设计不同类型洗衣粉对不同污渍的洗涤效果记录表格（自己在草稿纸上列表）。酵母细胞的固定化一、基础知识（一）固定化酶的应用实例1、高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆，能将葡萄糖转化为果糖的酶是葡萄糖异构酶2、使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。（二）固定化细胞技术1、固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。2、一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞体积比酶分子的体积大：体积大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出3、包埋法法固定化细胞，即将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的载体中。常用的载体有明胶、琼脂精、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。二、实验操作（一）制备固定化酵母细胞：.酵母细胞的活化：休眠状态恢复正常生活状态。.配制物质的量的浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液.配制海藻酸钠溶液：操作中最重要的一环。加热溶化海藻酸钠时要注意小火间断加热，重复几次，并・・・不断搅拌，直到海藻酸钠融化为止。如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合：将海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的海藻酸钠溶液，进行充分搅拌，使其混合均匀，在转移至注射器中。.固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢地将注射器中溶液滴加到刚配制好CaC2溶液中，浸泡30min左右。（二）用固定化酵母细胞发酵：酵母细胞凝胶珠蒸馏水冲洗f25℃下发酵24h三、结果分析与评价（一）制作凝胶珠过浅、呈白色，说明海藻酸钠浓度浓度偏低，包埋的酵母细胞数目少，影响实验效果；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠浓度浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。（二）固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多的，同时会闻到酒味工业生产中，细胞的固定化技术是在严格无菌的条件下进行的。直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点如下表所示。类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等。对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量。固定化酶酶既能与反应物接触,又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。固定化细胞成本低，操作更容易。固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降等。实验十二多聚酶链式反应扩增DNA片段一、基础知识PCR技术扩增DNA的过程与细胞内的DNA复制过程类似。细胞内DNA复制条件分析条件参与的组分在DNA分子复制中的作用模板DNA的两条单链提供复制的模板原料四种脱氧核苷酸酶解旋酶打开DNA双螺旋合成RNA引物DNA聚合酶催化合成DNA子链；切除引物能量引物2.细胞内DNA的复制DNA的结构：脱氧核甘酸分子通过3,5—磷酸二酯键连接形成核昔酸长链，两条脱氧核甘酸长链反向平行排列并螺旋化，形成DNA双螺旋结构。DNA的复制：首先，在解旋酶的作用下，由ATP供能，DNA发生解旋形成两条DNA单链。其次，在DNA单链的3T端，在RNA聚合酶在作用下，合成RNA引物。再次，在DNA聚合酶的作用下，从引物的上端开始合成DNA子链。最后，DNA聚合酶将引物切去,并合成空缺处DNA单链，再由DJNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来。TOC\o"1-5"\h\z3.DNA分子复制的人工控制 .（1）复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核昔|变产 |一"复性 |一U ”酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。 f |（2）缓冲液相当细胞内的核液。PCR反应过程是：在升温至90℃以上时DNA解旋；在降温至50℃左右时引物与DNA单链结合在升温至72℃左右时合成0^4子链。（4）避免外源DNA污染，所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。将缓冲液和酶分装成小份，—20℃低温保存。每添加一种反应成分,更换一个移液器枪头。混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。 （5）DNA含量计算：DNA含量卬g）=50x光吸收值x稀释倍数血红蛋白的提取和分离一、基础知识（一）凝胶色谱法1、凝胶色谱法也称做分配色谱法，是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。2、凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。3、在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。（二）缓冲溶液1、缓冲溶液的作用是能够抵制外界酸或碱对溶液PH的影响，维持PH基本不变2、缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成的。3、生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，为了能够在实验条件下准确模拟生物体内的过程，必须保持体外的pH与体内的基本一致（三）电泳1、电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程2、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。3、两种常用的电泳方法是琼脂精凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，在凝胶中加入SDS，电泳速率完全取决于分子大小，因此，在测定蛋白质分子量时通常使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。二、实验操作蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定（一）样品处理1、红细胞的洗涤：洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用低速短时间离心（500所m），然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水（质量分数为09%），缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。2、血红蛋白的释放：在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破