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第六章植物的器官培养第六章植物的器官培养1【学习目的要求】1.一般掌握离体根培养的取材部位和培养基的选择。2.掌握茎尖培养的种类和操作步骤。3.掌握茎段培养中材料的选择、处理及培养基的调整4.掌握离体叶片的培养步骤。5.一般掌握胚胎培养的类型与各自的注意事项。6.掌握如何防止培养过程中外植体的褐化和玻璃化。7.掌握植物器官组织培养常见问题的原因及对策【学习目的要求】2【主要内容】第一节营养器官培养、离体根培养二、茎尖培养三、茎段培养四、离体叶培养第二节生殖器官培养一、花器官和种子培养二、胚胎培三、胚珠培养第三节植物器官组织培养常见问题及对策【主要内容】3第一节营养器官培养一、离体根培养()离体根培养特点:因为根系生长快,代谢强,变异小,加上无菌,不受微生物干扰,可根据研究需要,改变培养的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化。应用:研究根系生理和代谢变化;也可由根细胞再生成植株,不仅证明根细胞的全能性,也产生了无性繁殖系,用于生产实践第一节营养器官培养4一、离体根培养闫三培养方法某开用。用无离任浓度使的培养White培养基配方为:硝酸钾80,硫酸镁720硫酸锰7,硫酸铜0.03,碘化钾0.75,pp0.5,WB60.1,VB10.1,甘氨酸3(mg/L一、离体根培养5-、离体根培养无性系的建立和培养、应用1)将种子进行表面消毒,在无菌条件下用湿布培养萌发,至根伸长1.0cm以上。2)从根尖一端切取长1.2cm的尖端,接种于培养基中。3)培养物生长甚怏,几天后发育出侧根。待侧根生长约一周后,即切取侧根的根尖进行接种培养,如此反复,得到离体根的无性系。4)这种根可用来进行根系生理生化和代谢方面的实验研究。如营养选择吸收、根尖伸长生长、生长素对伸长的影响等5)培养条件为暗光、25~27℃。3.植株再生培养第一步诱导形成愈伤组织。第二步在再分化培养基上诱导芽的分化、三再分化成小植株-、离体根培养6二、茎尖培养()概念:是切取茎尖部分或茎尖分生组织部分,进行培养的过程。这是组织培养中用得较多的外植体。因为茎尖分生区是三个分区的主要部分。Q茎尖培养可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。1.微茎尖:指带有1-2个叶原基的生长锥,其长度不超过0.5mm2.普通茎尖:指取几m到几十m长的顶芽尖及侧芽尖。这里主要介绍后者白特点:技术简单,操作方便,易成活和分化,成苗时间短。二、茎尖培养7四步骤如下:1.取材:挑选洁净、无污染,生长不久的茎,从植物的茎、藤或匍匐枝上切取2cm以上的顶梢。木本植物可事先对茎尖喷几次灭菌药剂。用三于普通茎尖培养。2.消毒将采到的茎尖切成0.5~1.0cm长,并将大叶除去,休眠芽预先剥除鳞片。将茎尖置于流水冲洗干净,再在95%的酒精中处理30秒,然后在稀释20倍的次氯酸钠中浸5~8分钟,最后用无菌水冲洗数次,沥干后准备接种3.接种为了减少污染,在接种前再剥掉一些幼叶,使茎尖为0.5cm大小左右。用作快速繁殖。注意:一要防褐化。接种时,不用锈刀,动作敏捷,随切随接,用1~5%c液漫泡处理。二要防干燥四步骤如下:84.培养(1)培养基:采用Ms培养基或略加修改,或补加其它物质。也可用其它培养基如Whte,Heller等。培养基中生长素是必须的,如2,4-D,AA,NA等,但是浓度不能太高,一般用0.1mg/左右,若高易产生畸形芽或形成愈伤组织。4.培养9(2)培养问题处理:茎尖在培养过程中会出现生长太慢、生长太快和生长正常等三种类型生长太慢:接种后茎尖不增大,只是茎尖逐渐变绿,出现绿色小点,细胞逐渐老化而进入休眠状态,或者逐渐变褐死亡。引起原因的是生长素浓度太低,或是温度过低或过高。(2)培养问题处理:10植物的器官培养_讲义课件11植物的器官培养_讲义课件12植物的器官培养_讲义课件13植物的器官培养_讲义课件14植物的器官培养_讲义课件15植物的器官培养_讲义课件16植物的器官培养_讲义课件17植物的器官培养_讲义课件18植物的器官培养_讲义课件19植物的器官培养_讲义课件20植物的器官培养_讲义课件21植物的器官培养_讲义课件22植物的器官培养_讲义课件23植物的器官培养_讲义课件24植物的器官培养_讲义课件25植物的器官培养_讲义课件26植物的器官培养_讲义课件27植物的器官培养_讲义课件28植物的器官培养_讲义课件29植物的器官培养_讲义课件30植物的器官培养_讲义课件31植物的器官培养_讲义课件32植物的器官培养_讲义课件33植物的器官培养_讲义课件34植物的器官培养_讲义课件35植物的器官培养_讲义课件36植物的器官培养_讲义课件37植物的器官培养_讲义课件38植物的器官培养_讲义课件39植物的器官培养_讲义课件40植物的器官培养_讲义课件41植物的器官培养_讲义课件42植物的器官培养_讲义课件43植物的器官培养_讲义课件44植物的器官培养_讲义课件45植物的器官培养_讲义课件46植物的器官培养_讲义课件47植物的器官培养_讲义课件48植物的器官培养_讲义课件49植物的器官培养_讲义课件50植物的器官培养_讲义课件51植物的器官培养_讲义课件52植物的器官培养_讲义课件53植物的器官培养_讲义课件54植物的器官培养_讲义课件55植物的器官培养_讲义课件56植物的器官培养_讲义课件57植物的器官培养_讲义课件58植物的器官培养_讲义课件59植物的器官培养_讲义课件60植物的器官培养_讲义课件61植物的器官培养_讲义课件62植物的器官培养_讲义课件63植物的器官培养_讲义课件64植物的器官培养_讲义课件65植物的器官培养_讲义课件66植物的器官培养_讲义课件67植物的器官培养_讲义课件68植物的器官培养_讲义课件69植物的器官培养_讲义课件70植物的器官培养_讲义课件71第六章植物的器官培养第六章植物的器官培养72【学习目的要求】1.一般掌握离体根培养的取材部位和培养基的选择。2.掌握茎尖培养的种类和操作步骤。3.掌握茎段培养中材料的选择、处理及培养基的调整4.掌握离体叶片的培养步骤。5.一般掌握胚胎培养的类型与各自的注意事项。6.掌握如何防止培养过程中外植体的褐化和玻璃化。7.掌握植物器官组织培养常见问题的原因及对策【学习目的要求】73【主要内容】第一节营养器官培养、离体根培养二、茎尖培养三、茎段培养四、离体叶培养第二节生殖器官培养一、花器官和种子培养二、胚胎培三、胚珠培养第三节植物器官组织培养常见问题及对策【主要内容】74第一节营养器官培养一、离体根培养()离体根培养特点:因为根系生长快,代谢强,变异小,加上无菌,不受微生物干扰,可根据研究需要,改变培养的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化。应用:研究根系生理和代谢变化;也可由根细胞再生成植株,不仅证明根细胞的全能性,也产生了无性繁殖系,用于生产实践第一节营养器官培养75一、离体根培养闫三培养方法某开用。用无离任浓度使的培养White培养基配方为:硝酸钾80,硫酸镁720硫酸锰7,硫酸铜0.03,碘化钾0.75,pp0.5,WB60.1,VB10.1,甘氨酸3(mg/L一、离体根培养76-、离体根培养无性系的建立和培养、应用1)将种子进行表面消毒,在无菌条件下用湿布培养萌发,至根伸长1.0cm以上。2)从根尖一端切取长1.2cm的尖端,接种于培养基中。3)培养物生长甚怏,几天后发育出侧根。待侧根生长约一周后,即切取侧根的根尖进行接种培养,如此反复,得到离体根的无性系。4)这种根可用来进行根系生理生化和代谢方面的实验研究。如营养选择吸收、根尖伸长生长、生长素对伸长的影响等5)培养条件为暗光、25~27℃。3.植株再生培养第一步诱导形成愈伤组织。第二步在再分化培养基上诱导芽的分化、三再分化成小植株-、离体根培养77二、茎尖培养()概念:是切取茎尖部分或茎尖分生组织部分,进行培养的过程。这是组织培养中用得较多的外植体。因为茎尖分生区是三个分区的主要部分。Q茎尖培养可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。1.微茎尖:指带有1-2个叶原基的生长锥,其长度不超过0.5mm2.普通茎尖:指取几m到几十m长的顶芽尖及侧芽尖。这里主要介绍后者白特点:技术简单,操作方便,易成活和分化,成苗时间短。二、茎尖培养78四步骤如下:1.取材:挑选洁净、无污染,生长不久的茎,从植物的茎、藤或匍匐枝上切取2cm以上的顶梢。木本植物可事先对茎尖喷几次灭菌药剂。用三于普通茎尖培养。2.消毒将采到的茎尖切成0.5~1.0cm长,并将大叶除去,休眠芽预先剥除鳞片。将茎尖置于流水冲洗干净,再在95%的酒精中处理30秒,然后在稀释20倍的次氯酸钠中浸5~8分钟,最后用无菌水冲洗数次,沥干后准备接种3.接种为了减少污染,在接种前再剥掉一些幼叶,使茎尖为0.5cm大小左右。用作快速繁殖。注意:一要防褐化。接种时,不用锈刀,动作敏捷,随切随接,用1~5%c液漫泡处理。二要防干燥四步骤如下:794.培养(1)培养基:采用Ms培养基或略加修改,或补加其它物质。也可用其它培养基如Whte,Heller等。培养基中生长素是必须的,如2,4-D,AA,NA等,但是浓度不能太高,一般用0.1mg/左右,若高易产生畸形芽或形成愈伤组织。4.培养80(2)培养问题处理:茎尖在培养过程中会出现生长太慢、生长太快和生长正常等三种类型生长太慢:接种后茎尖不增大,只是茎尖逐渐变绿,出现绿色小点,细胞逐渐老化而进入休眠状态,或者逐渐变褐死亡。引起原因的是生长素浓度太低,或是温度过低或过高。(2)培养问题处理:81植物的器官培养_讲义课件82植物的器官培养_讲义课件83植物的器官培养_讲义课件84植物的器官培养_讲义课件85植物的器官培养_讲义课件86植物的器官培养_讲义课件87植物的器官培养_讲义课件88植物的器官培养_讲义课件89植物的器官培养_讲义课件90植物的器官培养_讲义课件91植物的器官培养_讲义课件92植物的器官培养_讲义课件93植物的器官培养_讲义课件94植物的器官培养_讲义课件95植物的器官培养_讲义课件96植物的器官培养_讲义课件97植物的器官培养_讲义课件98植物的器官培养_讲义课件99植物的器官培养_讲义课件100植物的器官培养_讲义课件101植物的器官培养_讲义课件102植物的器官培养_讲义课件103植物的器官培养_讲义课件104植物的器官培养_讲义课件105植物的器官培养_讲义课件106植物的器官培养_讲义课件107植物的器官培养_讲义课件108植物的器官培养_讲义课件109植物的器官培养_讲义课件110植物的器官培养_讲义课件111植物的器官培养_讲义课件112植物的器官培养_讲义课件113植物的器官培养_讲义课件114植物的器官培养_讲义课件115植物的器官培养_讲义课件116植物的器官培养_讲义课件117植物的器官培养_讲义课件118植物的器官培养_讲义课件119植物的器官培养_讲义课件120植物的器官培养_讲义课件121植物的器官培养_讲义课件122植物的器官培养_讲义课件123植物的器官培养_讲义课件124植物的器官培养_讲义课件125植物的器官培养_讲义课件126植物的器官培养_讲
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