临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件_第1页
临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件_第2页
临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件_第3页
临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件_第4页
临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件_第5页
已阅读5页,还剩233页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

红细胞检查红细胞检查1红细胞(redbloodcell,RBC;erythrocyte)血液中数量最多的有形成分主要成分:血红蛋白主要功能:呼吸载体直径:6.7~9.5um,平均7.2um形状:双凹圆盘状红细胞(redbloodcell,RBC;eryt2RBCRBC3临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件4临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件5临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件6红细胞的生成StemcellEpo原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞

成熟红细胞释放入血72h48h平均寿命120d红细胞的生成Stemcell72h48h平均寿命120d7红细胞计数

(redbloodcellcount,RBC)定义:单位体积(每升)血液内的红细胞数量原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池,于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数,并换算得每升血液中红细胞数(/L)红细胞计数

(redbloodcellcount,RB8红细胞稀释液稀释液:保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗凝,要求不含杂质红细胞稀释液:Hayem液,由氯化钠、结晶硫酸钠、氯化高汞组成作用:

氯化钠调节渗透压,结晶硫酸钠防止细胞粘连,氯化高汞防腐红细胞稀释液稀释液:保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗9计数方法

手工法:取样→稀释→计数→计算仪器法:电阻抗分析或激光分析计数方法手工法:取样→稀释→计数→计算10手工法10uL末梢血+2ml稀释液

混匀稀释充池计数计算手工法10uL末梢血+2ml稀释液11成年男性(4.0-5.5)×1012/L成年女性(3.5-5.0)×1012/L初生儿(6.0-7.0)×1012/L外周血红细胞参考值成年男性(4.0-5.5)×1012/L外周血红细胞参考12思考手工法VS仪器法?思考手工法VS仪器法?13血红蛋白测定(hemoglobin,Hb)血红蛋白测定(hemoglobin,Hb)14血红蛋白的组成珠蛋白(globin)(4条肽链)亚铁血红素(heme)(1个)血红蛋白血红蛋白的组成15珠蛋白具有种属特异性,含有两条α链和两条非α链

正常成人的Hb包括:

HbAα2β2(90%以上)

HbA2α2δ2(2~3%)

HbFα2γ2(2%以下;新生儿占70%)珠蛋白具有种属特异性,含有两条α链和两条非α链16

受激素调节

红细胞生成素:直接

雄激素:直接和间接自身调节

血红素过多氧化为高铁血红素负反馈血红蛋白的合成受激素调节负反馈血红蛋白的合成17血红蛋白的代谢珠蛋白

氨基酸血红素

胆色素(胆绿素、胆红素、胆素原及胆素)血红蛋白血红蛋白的代谢珠蛋白氨基酸血红蛋白18还原血红蛋白(reducedhemoglobin,Hbred)氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,HbO2)高铁血红蛋白(hemiglobin,Hi)碳氧血红蛋白(HbCO)硫化血红蛋白(SHb)血红蛋白的种类还原血红蛋白(reducedhemoglobin,Hbr19血红蛋白的测定定义指单位体积血液中所含血红蛋白的量参考值

成年男性:120-160g/L

成年女性:110-150g/L

初生儿:170-200g/L血红蛋白的测定定义20Hb测定方法分光光度计比色

氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)(国际标准参考方法)十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS-Hb)(次选方法)叠氮高铁血红蛋白测定法(HiN3)碱羟血红蛋白测定法(AHD575)目视比色

沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法仪器法Hb测定方法分光光度计比色21氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)为国际标准参考方法步骤:取样加转化液(溶血、转化)比色氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)为国际标准参考方法22原理:血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,再与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白,通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。原理:23方法:计算:有三种方法求得Hb浓度1.A×367.72.得A值后,在标准曲线上直接查找3.A×KK=ΣHb/ΣA转化液5ml+血20ul(5min),比色读吸光度(A)(540nm)方法:计算:有三种方法求得Hb浓度转化液5ml+血24标准曲线的绘制用一组已知浓度的HiCN参考液,在分光光度计上分别测定A值,以A为纵座标,血红蛋白参考值为横座标,绘制标准曲线。

例如:HiCN参考品

Hbg/L:50100150200A:0.140.270.410.54如果标本A为0.32,则标本Hb=0.32×370.37=118.52(g/L)K=ΣHb/ΣA=370.37标准曲线的绘制用一组已知浓度的HiCN参考液,在分光光度计上25优点操作简单呈色快且稳定除SHb外均可检测根据吸光度直接定值方法学评价缺点KCN有剧毒HbCO转化较慢高WBC和高球蛋白血症可致溶液浑浊优点方法学评价缺点26红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义27生理变化年龄与性别新生儿:RBC高,两周后下降,6-7岁最低男性:25-30岁高峰女性:13岁-15岁达高值,21岁-35岁低水平,以后渐渐增高

生理变化年龄与性别28精神因素肾上腺素RBC剧烈体力劳动或运动相对缺氧EpoRBC气压降低

缺氧代偿性RBC妊娠中后期

血液稀释RBC老年人

造血功能减退RBC精神因素29病理变化

红细胞和血红蛋白增多相对增多:血浆中水分丢失,血液浓缩所致,如呕吐、腹泻绝对增多:

原发性

—真性红细胞增多

继发性

—低氧血症Epo(如心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病)

—肾上腺皮质功能亢进病理变化红细胞和血红蛋白增多30红细胞生成素代偿性增加生理性:

新生儿高原居民病理性:严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病红细胞生成素非代偿性增加:某些肿瘤或肾脏疾患红细胞生成素代偿性增加生理性:31临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件32红细胞和血红蛋白量减少主要见于贫血:由于各种原因引起的全身血循环中红细胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少,低于该地区、该年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。贫血病因生成减少破坏过多失血过多红细胞和血红蛋白量减少主要见于贫血:由于各种原因引起的全身血331)骨髓造血功能减退药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移2)造血原料不足

缺铁(缺铁性贫血)、缺乏VitB12或叶酸(巨幼细胞性贫血)3)红细胞破坏增加

溶血性贫血(输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症)4)红细胞丢失过多各种原因的失血(如消化性溃疡、痔疮、钩虫病)1)骨髓造血功能减退34临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件35注意问题Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数在某些病理情况下,Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量,如:急性失血、水潴留、失水等发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时,RBC计数与Hb浓度不成比例注意问题Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数36红细胞形态检查红细胞形态检查37红细胞形态观察

大小及均匀程度红细胞形状血红蛋白含量细胞内结构红细胞形态观察大小及均匀程度38红细胞大小改变

直径例如小红细胞<6um缺铁性贫血大红细胞>10um巨幼细胞贫血巨红细胞>15um巨幼细胞贫血大小不均增生性贫血红细胞大小改变39ACBA:normalB:megalocyteC:anisocytosisACBA:normal40红细胞形状改变球形红细胞遗传性或获得性椭圆形红细胞遗传性靶形红细胞珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病口形红细胞遗传性镰形红细胞异常血红蛋白S(HbS)棘形红细胞遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症新月形红细胞阵发性睡眠性血红蛋白尿症泪滴形红细胞贫血、骨髓纤维化症缗钱状形成纤维蛋白原和球蛋白增高裂红细胞DIC、微血管病性溶血性贫血红细胞形态不整巨幼细胞性贫血红细胞形状改变球形红细胞遗传性41spherocytespherocyte42ElliptocyteElliptocyte43人为假椭圆红细胞人为假椭圆红细胞44TargetcellTargetcell45stomatocytestomatocyte46SicklecellSicklecell47镰形红细胞镰形红细胞48acanthocyteacanthocyte49临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件50meniscocytemeniscocyte51TeardropcellTeardropcell52RouleauxformationRouleauxformation53schistocyteschistocyte54poikilocytosispoikilocytosis55血红蛋白含量改变正常色素性

急性失血、再障、白血病低色素性

缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血高色素性

巨幼细胞性贫血嗜多色性

溶血性或急性失血性贫血细胞着色不一铁粒幼红细胞性贫血血红蛋白含量改变正常色素性急性失血、再障、56normochromichypochromichyperchromicpolychromaticnormochromichypochromichyperch57人为面包圈红细胞人为面包圈红细胞58铁粒幼红细胞性贫血铁粒幼红细胞性贫血59细胞内的异常结构●

嗜碱性点彩红细胞:RNA,铅中毒●

染色质小体(豪焦小体):核残余物,巨幼细胞贫血、脾切除后●

卡波环:脂蛋白变性,巨幼细胞贫血、铅中毒●

寄生虫:疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫●

有核红细胞:

溶血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后细胞内的异常结构●嗜碱性点彩红细胞:RNA,铅中毒60BasophilicstipplingcellBasophilicstipplingcell61HowellJolly’sbodyHowellJolly’sbody62CabotringCabotring63疟原虫(malarialparasite)疟原虫(malarialparasite)64有核红细胞有核红细胞65临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件66红细胞的各种改变红细胞的各种改变67红细胞比容测定

(Hematocrit,HCT)定义:抗凝血在一定条件下离心沉淀,求出单位体积血液中红细胞占的体积百分比(L/L)。

与红细胞数量以及红细胞大小有关红细胞比容测定

(Hematocrit,HCT)定义:68

温氏法(常量,中速离心)

微量法——首选常规方法放射性核素法——参考方法

折射计法、黏度法、比重法、电阻抗法(仪器)测定方法温氏法(常量,中速离心)测定方法69参考值

温氏法:男性0.4~0.54女性0.37~0.47

微量法:男性0.42~0.52女性0.37~0.48仪器法:男性0.40~0.52女性0.37~0.48参考值温氏法:男性0.4~0.54女性0.370离心法EDTA抗凝离心PlasmPLTWBCRBC-redRBC-O2离心法EDTA抗凝71诊断贫血并判断其严重程度,结合有关指数变化可推断贫血病因,并对贫血进行分类;评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度,有助于补液量的控制。

●增高:血液浓缩、原发性或继发性红细胞增多症

●降低:贫血、稀释血症(充血性心力衰竭、妊娠、输液过多)临床意义诊断贫血并判断其严重程度,结合有关指数变化可推断贫血病因,并72红细胞平均指数通过RBC计数、Hb测定、HCT测定可计算出红细胞平均指数红细胞平均指数通过RBC计数、Hb测定、73定义:每个红细胞的平均体积。以飞升(fL)为单位计算:MCV=HCT/RBC例如:RBC为3.50×1012/L,Hct为0.36,则:MCV=0.363.50×1012/L=103fL参考值:手工法80~92fL仪器法80~100fL红细胞平均容积(meancorpuscularvolume,MCV)定义:每个红细胞的平均体积。以飞升(fL)为单位红细胞平均容74红细胞平均血红蛋白量

(meancorpuscularhemoglobin,MCH)定义:每个红细胞内所含平均血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位计算:MCH=Hb/RBC例如:RBC为3.50×1012/L,Hb为120g/L,则:MCH=120g/L3.50×1012/L=34.20pg参考值:手工法27~31pg仪器法27~34pg红细胞平均血红蛋白量

(meancorpuscularh75红细胞平均血红蛋白浓度

(meancorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC)

定义:单位容积红细胞的平均血红蛋白浓度,以g/L为单位计算:MCHC=Hb/Hct例如:Hb为120g/L,Hct为0.36,则:MCHC=120g/L0.36=333g/L参考值:320~360g/L红细胞平均血红蛋白浓度

(meancorpuscular76临床意义MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理变化,有利于分析病人红细胞形态特征,进行贫血分类、诊断和鉴别诊断。临床意义MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理77贫血分类MCVMCHMCHC常见病因正常细胞性正常正常正常再障、急性失血、急性溶血、白血病大细胞性增高增高正常巨幼细胞性贫血单纯小细胞性减低减低正常慢性感染、尿毒症小细胞低色素性减低减低减低缺铁性贫血、地中海贫血、慢性失血贫血的红细胞形态学分类贫血分类MCVMCHMCHC常见病因正常细胞性正常正常正常再78红细胞体积分布宽度

(RBCVolumeDistributionWidth,RDW)定义

红细胞体积分布宽度是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出,反映周围血红细胞体积异质性的参数,是反映红细胞大小均一程度的客观指标,常用变异系数(CV)或标准差(S)表示。红细胞体积分布宽度

(RBCVolumeDistribu79临床意义与MCV结合进行贫血分类:这种分类法更能反映贫血的病理变化,对贫血的鉴别诊断有一定的价值。诊断缺铁性贫血:IDA的病人95%以上RDW增高,可与β-珠蛋白生成障碍性贫血(88%RDW正常)鉴别。临床意义与MCV结合进行贫血分类:这种分类法更能反映贫血的病80贫血类型常见疾病大细胞均一性部分再障大细胞不均一性巨幼细胞性贫血正细胞均一性急性失血正细胞不均一性再障、部分溶贫小细胞均一性地中海贫血小细胞不均一性缺铁性贫血贫血类型常见疾病81思考某女性病人,测得红细胞为2.8*1012/L,血红蛋白为65g/L,血细胞比积0.20。计算:MCV、MCH、MCHC该病人属于哪种类型的贫血下一步检测的方向思考某女性病人,测得红细胞为2.8*1012/L,血红蛋82网织红细胞计数

(reticulocyte,Ret)网织红细胞计数

(reticulocyte,Ret)83Ret是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞,其胞质中残存嗜碱性物质(核糖体和RNA),可被某些染料(如煌焦油蓝等)活体染色呈蓝色网状或颗粒状结构,故而得名。直径:8~9.5um骨髓中网织红细胞数比外周血高约3倍定义Ret是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成84根据Ret的形态特征和成熟程度分为五型:

0型(花冠型):有核网织红细胞Ⅰ型(丝球型):红细胞几乎被网织物充满Ⅱ型(网型):红细胞中央线团样结构开始松散Ⅲ型(破网型):网织结构稀小,呈不规则枝点状排列Ⅳ型(点粒型):呈分散的细颗粒、短丝状ICSH将网织红细胞分为I~IV型根据Ret的形态特征和成熟程度分为五型:85临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件86临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件87临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件88方法学选择手工法(manual)染料:

新亚甲蓝、煌焦油蓝等

新亚甲蓝对Ret染色力强且稳定,为WHO推荐染料。

煌焦油蓝应用历史长,但易产生沉淀。方法学选择手工法(manual)89原理:

RNA带负电荷,与带正电荷的染料形成复合物,呈深染的颗粒状或彼此连缀成网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞,即为Ret。原理:90玻片法10g/L煌焦油蓝乙醇溶液加染液→加血液→制备涂片→观察,计算

混合血液中水分易蒸发,染色时间短,染料沉渣干扰,计数结果不准确。玻片法10g/L煌焦油蓝乙醇溶液91试管法10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液

染液+血液(等量),混匀,置室温15~20分钟→制备涂片→观察、计算

重复性好,染色时间长。试管法10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液92Miller窥盘计数法将Miller窥盘置于接目镜内,选择红细胞散在且分布均匀的部位计数。ABMiller窥盘计数法将Miller窥盘置于接目镜内,选择红93计算1.

网织红细胞%=×1002.

绝对值计算:(×109/L)大格网织红细胞总数小格红细胞总数×9大格网织红细胞总数小格红细胞总数×994仪器法染料:荧光染料(吖啶橙等)原理:荧光染色,激光测量。方法:流式细胞仪网织红细胞计数仪仪器法染料:荧光染料(吖啶橙等)95可同时将Ret分为高荧光强度(HFR)、中荧光强度(MFR)、低荧光强度(LFR)测量细胞多,避免主观因素的影响,方法易于标准化如遇NRBC、Howell-Jolly小体、巨大血小板可呈假阳性可同时将Ret分为高荧光强度(HFR)、中荧光强度(MFR)96Referencevalue成人:0.008~0.0225~75×109/L新生儿:0.02~0.06Referencevalue成人:97临床意义正常外周血中网织红细胞多为Ⅲ型(0.2~0.3)和Ⅳ型(0.7~0.8)判断骨髓红细胞生成情况观察贫血疗效的重要指标骨髓移植后监测其造血功能放/化疗时骨髓功能监测临床意义正常外周血中网织红细胞多为Ⅲ型(0.2~0.3)和Ⅳ98网织红细胞其它参数

Reticulocytematurityindex(RMI)

RMI=(HFR+MFR)/LFR×100

增高:溶贫、ITP、CLL、AL、PV、AA、MM

降低:骨髓衰竭、无效造血,如巨幼贫网织红细胞其它参数Reticulocytematuri99Reticulocyteproductionindex(RPI)被测Hct正常人Hct表示网织红细胞的生成相当于正常人的多少倍Ret成熟天数1RPI=Ret%××Reticulocyteproductionindex(100LFR和HFR——作为鉴别诊断的初筛指标

溶贫:Ret、LFR和HFR升高

肾性贫血:HFR升高、LFR降低、Ret正常IRF(Immaturereticulocytefraction)——未成熟网织红细胞比率

IRF=MFR+HFR

估计骨髓移植后造血恢复的早期指标LFR和HFR——作为鉴别诊断的初筛指标101点彩红细胞计数

(Basiphilicstipplingcount)红细胞在发育过程中受到损害,胞质中残存的嗜碱性物质RNA变性沉淀,瑞氏染色时呈现粗细不等的蓝黑色颗粒。点彩红细胞计数

(Basiphilicstippling102临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件103临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件104参考值:<0.01%临床意义:重金属及硝基苯、苯胺中毒、贫血点彩红细胞(%)=50个视野内点彩红细胞数5个视野内红细胞总数×10参考值:<0.01%点彩红细胞(%)=50个视野内点彩红细胞105红细胞沉降率

(Erythrocytesedimentationrate,ESR)定义单位时间内红细胞在一定条件下沉降的速度,以mm/h表示红细胞沉降率

(Erythrocytesedimentat106红细胞与血浆的密度差离体抗凝血逐渐形成缗钱状红细胞,自然下沉,堆积于试管的底部原理红细胞与血浆的密度差原理1071期:缗钱状红细胞形成期,数分钟~10min2期:快速沉降期,约40min3期:红细胞堆积期血沉过程一般分为三期:1期:缗钱状红细胞形成期,数分钟~10min血沉过程一般分为108方法选择与评价手工法

魏氏法(Westergren):简便实用,为血沉测定的标准法

温氏法(Wintrobe)、潘氏法血沉仪法

动态记录整个血沉过程的变化,描绘出红细胞沉降的曲线方法选择与评价手工法109血沉动态曲线血沉动态曲线110魏氏法0.4ml抗凝剂+1.6ml静脉血将混匀全血吸入血沉管至“0”刻度,拭去管外余血,将血沉管直立于血沉架上1h后读取ESR魏氏法0.4ml抗凝剂+1.6ml静脉血111临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件112Referencevalue魏氏法成年男性:0~15mm/h成年女性:0~20mm/h潘氏法成年男性:0~10mm/h成年女性:0~12mm/hReferencevalue魏氏法113影响ESR的因素血浆

血浆逆阻力红细胞沉降力

血浆蛋白成分红细胞表面电荷、形状、数量、聚集程度血沉管与血沉架每倾斜3。,血沉加快30%白蛋白、卵磷脂→ESR↓纤维蛋白原、球蛋白、急性反应蛋白→ESR↑影响ESR的因素血浆白蛋白、卵磷脂→ESR↓纤维蛋白原、球114血标本脂肪血→ESR↑;抗凝剂浓度↑→ESR↓;抽血在30s内完成,血液凝固→ESR↓温度18~25℃,温度↑→ESR↑及时测定室温标本<2h;4℃标本<6h其它注射器、试管、血沉管干燥洁净,以避免溶血血标本115临床意义血沉增快

生理性:儿童,妊娠,老年人病理性:感染或炎症组织损伤及坏死恶性肿瘤贫血慢性肾炎、肝硬化高球蛋白血症、高胆固醇血症临床意义血沉增快116血沉减慢新生儿真性红细胞增多症镰状红细胞贫血等高粘滞性综合征肝病、肿瘤等严重疾病血沉减慢117血沉的测定缺乏特异性,可用于疾病的动态观察以及疗效判断血沉的测定缺乏特异性,可用于疾病的动态观察以及疗118总结总结119红细胞检查红细胞检查120红细胞(redbloodcell,RBC;erythrocyte)血液中数量最多的有形成分主要成分:血红蛋白主要功能:呼吸载体直径:6.7~9.5um,平均7.2um形状:双凹圆盘状红细胞(redbloodcell,RBC;eryt121RBCRBC122临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件123临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件124临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件125红细胞的生成StemcellEpo原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞

成熟红细胞释放入血72h48h平均寿命120d红细胞的生成Stemcell72h48h平均寿命120d126红细胞计数

(redbloodcellcount,RBC)定义:单位体积(每升)血液内的红细胞数量原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池,于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数,并换算得每升血液中红细胞数(/L)红细胞计数

(redbloodcellcount,RB127红细胞稀释液稀释液:保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗凝,要求不含杂质红细胞稀释液:Hayem液,由氯化钠、结晶硫酸钠、氯化高汞组成作用:

氯化钠调节渗透压,结晶硫酸钠防止细胞粘连,氯化高汞防腐红细胞稀释液稀释液:保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗128计数方法

手工法:取样→稀释→计数→计算仪器法:电阻抗分析或激光分析计数方法手工法:取样→稀释→计数→计算129手工法10uL末梢血+2ml稀释液

混匀稀释充池计数计算手工法10uL末梢血+2ml稀释液130成年男性(4.0-5.5)×1012/L成年女性(3.5-5.0)×1012/L初生儿(6.0-7.0)×1012/L外周血红细胞参考值成年男性(4.0-5.5)×1012/L外周血红细胞参考131思考手工法VS仪器法?思考手工法VS仪器法?132血红蛋白测定(hemoglobin,Hb)血红蛋白测定(hemoglobin,Hb)133血红蛋白的组成珠蛋白(globin)(4条肽链)亚铁血红素(heme)(1个)血红蛋白血红蛋白的组成134珠蛋白具有种属特异性,含有两条α链和两条非α链

正常成人的Hb包括:

HbAα2β2(90%以上)

HbA2α2δ2(2~3%)

HbFα2γ2(2%以下;新生儿占70%)珠蛋白具有种属特异性,含有两条α链和两条非α链135

受激素调节

红细胞生成素:直接

雄激素:直接和间接自身调节

血红素过多氧化为高铁血红素负反馈血红蛋白的合成受激素调节负反馈血红蛋白的合成136血红蛋白的代谢珠蛋白

氨基酸血红素

胆色素(胆绿素、胆红素、胆素原及胆素)血红蛋白血红蛋白的代谢珠蛋白氨基酸血红蛋白137还原血红蛋白(reducedhemoglobin,Hbred)氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,HbO2)高铁血红蛋白(hemiglobin,Hi)碳氧血红蛋白(HbCO)硫化血红蛋白(SHb)血红蛋白的种类还原血红蛋白(reducedhemoglobin,Hbr138血红蛋白的测定定义指单位体积血液中所含血红蛋白的量参考值

成年男性:120-160g/L

成年女性:110-150g/L

初生儿:170-200g/L血红蛋白的测定定义139Hb测定方法分光光度计比色

氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)(国际标准参考方法)十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS-Hb)(次选方法)叠氮高铁血红蛋白测定法(HiN3)碱羟血红蛋白测定法(AHD575)目视比色

沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法仪器法Hb测定方法分光光度计比色140氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)为国际标准参考方法步骤:取样加转化液(溶血、转化)比色氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)为国际标准参考方法141原理:血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,再与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白,通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。原理:142方法:计算:有三种方法求得Hb浓度1.A×367.72.得A值后,在标准曲线上直接查找3.A×KK=ΣHb/ΣA转化液5ml+血20ul(5min),比色读吸光度(A)(540nm)方法:计算:有三种方法求得Hb浓度转化液5ml+血143标准曲线的绘制用一组已知浓度的HiCN参考液,在分光光度计上分别测定A值,以A为纵座标,血红蛋白参考值为横座标,绘制标准曲线。

例如:HiCN参考品

Hbg/L:50100150200A:0.140.270.410.54如果标本A为0.32,则标本Hb=0.32×370.37=118.52(g/L)K=ΣHb/ΣA=370.37标准曲线的绘制用一组已知浓度的HiCN参考液,在分光光度计上144优点操作简单呈色快且稳定除SHb外均可检测根据吸光度直接定值方法学评价缺点KCN有剧毒HbCO转化较慢高WBC和高球蛋白血症可致溶液浑浊优点方法学评价缺点145红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义146生理变化年龄与性别新生儿:RBC高,两周后下降,6-7岁最低男性:25-30岁高峰女性:13岁-15岁达高值,21岁-35岁低水平,以后渐渐增高

生理变化年龄与性别147精神因素肾上腺素RBC剧烈体力劳动或运动相对缺氧EpoRBC气压降低

缺氧代偿性RBC妊娠中后期

血液稀释RBC老年人

造血功能减退RBC精神因素148病理变化

红细胞和血红蛋白增多相对增多:血浆中水分丢失,血液浓缩所致,如呕吐、腹泻绝对增多:

原发性

—真性红细胞增多

继发性

—低氧血症Epo(如心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病)

—肾上腺皮质功能亢进病理变化红细胞和血红蛋白增多149红细胞生成素代偿性增加生理性:

新生儿高原居民病理性:严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病红细胞生成素非代偿性增加:某些肿瘤或肾脏疾患红细胞生成素代偿性增加生理性:150临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件151红细胞和血红蛋白量减少主要见于贫血:由于各种原因引起的全身血循环中红细胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少,低于该地区、该年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。贫血病因生成减少破坏过多失血过多红细胞和血红蛋白量减少主要见于贫血:由于各种原因引起的全身血1521)骨髓造血功能减退药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移2)造血原料不足

缺铁(缺铁性贫血)、缺乏VitB12或叶酸(巨幼细胞性贫血)3)红细胞破坏增加

溶血性贫血(输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症)4)红细胞丢失过多各种原因的失血(如消化性溃疡、痔疮、钩虫病)1)骨髓造血功能减退153临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件154注意问题Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数在某些病理情况下,Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量,如:急性失血、水潴留、失水等发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时,RBC计数与Hb浓度不成比例注意问题Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数155红细胞形态检查红细胞形态检查156红细胞形态观察

大小及均匀程度红细胞形状血红蛋白含量细胞内结构红细胞形态观察大小及均匀程度157红细胞大小改变

直径例如小红细胞<6um缺铁性贫血大红细胞>10um巨幼细胞贫血巨红细胞>15um巨幼细胞贫血大小不均增生性贫血红细胞大小改变158ACBA:normalB:megalocyteC:anisocytosisACBA:normal159红细胞形状改变球形红细胞遗传性或获得性椭圆形红细胞遗传性靶形红细胞珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病口形红细胞遗传性镰形红细胞异常血红蛋白S(HbS)棘形红细胞遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症新月形红细胞阵发性睡眠性血红蛋白尿症泪滴形红细胞贫血、骨髓纤维化症缗钱状形成纤维蛋白原和球蛋白增高裂红细胞DIC、微血管病性溶血性贫血红细胞形态不整巨幼细胞性贫血红细胞形状改变球形红细胞遗传性160spherocytespherocyte161ElliptocyteElliptocyte162人为假椭圆红细胞人为假椭圆红细胞163TargetcellTargetcell164stomatocytestomatocyte165SicklecellSicklecell166镰形红细胞镰形红细胞167acanthocyteacanthocyte168临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件169meniscocytemeniscocyte170TeardropcellTeardropcell171RouleauxformationRouleauxformation172schistocyteschistocyte173poikilocytosispoikilocytosis174血红蛋白含量改变正常色素性

急性失血、再障、白血病低色素性

缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血高色素性

巨幼细胞性贫血嗜多色性

溶血性或急性失血性贫血细胞着色不一铁粒幼红细胞性贫血血红蛋白含量改变正常色素性急性失血、再障、175normochromichypochromichyperchromicpolychromaticnormochromichypochromichyperch176人为面包圈红细胞人为面包圈红细胞177铁粒幼红细胞性贫血铁粒幼红细胞性贫血178细胞内的异常结构●

嗜碱性点彩红细胞:RNA,铅中毒●

染色质小体(豪焦小体):核残余物,巨幼细胞贫血、脾切除后●

卡波环:脂蛋白变性,巨幼细胞贫血、铅中毒●

寄生虫:疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫●

有核红细胞:

溶血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后细胞内的异常结构●嗜碱性点彩红细胞:RNA,铅中毒179BasophilicstipplingcellBasophilicstipplingcell180HowellJolly’sbodyHowellJolly’sbody181CabotringCabotring182疟原虫(malarialparasite)疟原虫(malarialparasite)183有核红细胞有核红细胞184临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件185红细胞的各种改变红细胞的各种改变186红细胞比容测定

(Hematocrit,HCT)定义:抗凝血在一定条件下离心沉淀,求出单位体积血液中红细胞占的体积百分比(L/L)。

与红细胞数量以及红细胞大小有关红细胞比容测定

(Hematocrit,HCT)定义:187

温氏法(常量,中速离心)

微量法——首选常规方法放射性核素法——参考方法

折射计法、黏度法、比重法、电阻抗法(仪器)测定方法温氏法(常量,中速离心)测定方法188参考值

温氏法:男性0.4~0.54女性0.37~0.47

微量法:男性0.42~0.52女性0.37~0.48仪器法:男性0.40~0.52女性0.37~0.48参考值温氏法:男性0.4~0.54女性0.3189离心法EDTA抗凝离心PlasmPLTWBCRBC-redRBC-O2离心法EDTA抗凝190诊断贫血并判断其严重程度,结合有关指数变化可推断贫血病因,并对贫血进行分类;评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度,有助于补液量的控制。

●增高:血液浓缩、原发性或继发性红细胞增多症

●降低:贫血、稀释血症(充血性心力衰竭、妊娠、输液过多)临床意义诊断贫血并判断其严重程度,结合有关指数变化可推断贫血病因,并191红细胞平均指数通过RBC计数、Hb测定、HCT测定可计算出红细胞平均指数红细胞平均指数通过RBC计数、Hb测定、192定义:每个红细胞的平均体积。以飞升(fL)为单位计算:MCV=HCT/RBC例如:RBC为3.50×1012/L,Hct为0.36,则:MCV=0.363.50×1012/L=103fL参考值:手工法80~92fL仪器法80~100fL红细胞平均容积(meancorpuscularvolume,MCV)定义:每个红细胞的平均体积。以飞升(fL)为单位红细胞平均容193红细胞平均血红蛋白量

(meancorpuscularhemoglobin,MCH)定义:每个红细胞内所含平均血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位计算:MCH=Hb/RBC例如:RBC为3.50×1012/L,Hb为120g/L,则:MCH=120g/L3.50×1012/L=34.20pg参考值:手工法27~31pg仪器法27~34pg红细胞平均血红蛋白量

(meancorpuscularh194红细胞平均血红蛋白浓度

(meancorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC)

定义:单位容积红细胞的平均血红蛋白浓度,以g/L为单位计算:MCHC=Hb/Hct例如:Hb为120g/L,Hct为0.36,则:MCHC=120g/L0.36=333g/L参考值:320~360g/L红细胞平均血红蛋白浓度

(meancorpuscular195临床意义MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理变化,有利于分析病人红细胞形态特征,进行贫血分类、诊断和鉴别诊断。临床意义MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理196贫血分类MCVMCHMCHC常见病因正常细胞性正常正常正常再障、急性失血、急性溶血、白血病大细胞性增高增高正常巨幼细胞性贫血单纯小细胞性减低减低正常慢性感染、尿毒症小细胞低色素性减低减低减低缺铁性贫血、地中海贫血、慢性失血贫血的红细胞形态学分类贫血分类MCVMCHMCHC常见病因正常细胞性正常正常正常再197红细胞体积分布宽度

(RBCVolumeDistributionWidth,RDW)定义

红细胞体积分布宽度是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出,反映周围血红细胞体积异质性的参数,是反映红细胞大小均一程度的客观指标,常用变异系数(CV)或标准差(S)表示。红细胞体积分布宽度

(RBCVolumeDistribu198临床意义与MCV结合进行贫血分类:这种分类法更能反映贫血的病理变化,对贫血的鉴别诊断有一定的价值。诊断缺铁性贫血:IDA的病人95%以上RDW增高,可与β-珠蛋白生成障碍性贫血(88%RDW正常)鉴别。临床意义与MCV结合进行贫血分类:这种分类法更能反映贫血的病199贫血类型常见疾病大细胞均一性部分再障大细胞不均一性巨幼细胞性贫血正细胞均一性急性失血正细胞不均一性再障、部分溶贫小细胞均一性地中海贫血小细胞不均一性缺铁性贫血贫血类型常见疾病200思考某女性病人,测得红细胞为2.8*1012/L,血红蛋白为65g/L,血细胞比积0.20。计算:MCV、MCH、MCHC该病人属于哪种类型的贫血下一步检测的方向思考某女性病人,测得红细胞为2.8*1012/L,血红蛋201网织红细胞计数

(reticulocyte,Ret)网织红细胞计数

(reticulocyte,Ret)202Ret是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞,其胞质中残存嗜碱性物质(核糖体和RNA),可被某些染料(如煌焦油蓝等)活体染色呈蓝色网状或颗粒状结构,故而得名。直径:8~9.5um骨髓中网织红细胞数比外周血高约3倍定义Ret是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成203根据Ret的形态特征和成熟程度分为五型:

0型(花冠型):有核网织红细胞Ⅰ型(丝球型):红细胞几乎被网织物充满Ⅱ型(网型):红细胞中央线团样结构开始松散Ⅲ型(破网型):网织结构稀小,呈不规则枝点状排列Ⅳ型(点粒型):呈分散的细颗粒、短丝状ICSH将网织红细胞分为I~IV型根据Ret的形态特征和成熟程度分为五型:204临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件205临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件206临床医学检验红细胞的检查以及临床意义课件207方法学选择手工法(manual)染料:

新亚甲蓝、煌焦油蓝等

新亚甲蓝对Ret染色力强且稳定,为WHO推荐染料。

煌焦油蓝应用历史长,但易产生沉淀。方法学选择手工法(manual)208原理:

RNA带负电荷,与带正电荷的染料形成复合物,呈深染的颗粒状或彼此连缀成网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞,即为Ret。原理:209玻片法10g/L煌焦油蓝乙醇溶液加染液→加血液→制备涂片→观察,计算

混合血液中水分易蒸发,染色时间短,染料沉渣干扰,计数结果不准确。玻片法10g/L煌焦油蓝乙醇溶液210试管法10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液

染液+血液(等量),混匀,置室温15~20分钟→制备涂片→观察、计算

重复性好,染色时间长。试管法10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液211Miller窥盘计数法将Miller窥盘置于接目镜内,选择红细胞散在且分布均匀的部位计数。ABMiller窥盘计数法将Miller窥盘置于接目镜内,选择红212计算1.

网织红细胞%=×1002.

绝对值计算:(×109/L)大格网织红细胞总数小格红细胞总数×9大格网织红细胞总数小格红细胞总数×9213仪器法染料:荧光染料(吖啶橙等)原理:荧光染色,激光测量。方法:流式细胞仪网织红细胞计数仪仪器法染料:荧光染料(吖啶橙等)214可同时将Ret分为高荧光强度(HFR)、中荧光强度(MFR)、低荧光强度(LFR)测量细胞多,避免主观因素的影响,方法易于标准化如遇NRBC、Howell-

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论