final实验二、血涂片制备 WBC分类计数课件

实验二、血涂片制备

WBC分类计数

实验二、血涂片制备

WBC分类计数1要求

初步掌握血图片制备、瑞氏染色原理方法，WBC染色后形态学特点及其分类计数方法要求

初步掌握血图片制备、瑞氏染色原理方法，WBC染色后形态2流程图：血液标本的采集制作1-2张血涂片提取白细胞充池WBC计数瑞氏染色WBC分类计数流程图：血液标本的采集制作1-2张血涂片提取白细胞充池WBC3原理：血标本形态特点/颜色差异分类计数操作：

⑴涂片

⑵染色⑶镜下观察（低倍镜、油镜）⑷计算涂片瑞氏染色原理：涂片瑞氏染色4血涂片制备

血涂片制备5final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件6final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件7final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件8瑞氏染色机理主要成分：碱性美兰与酸性伊红物理吸附、化学亲和与电荷作用，复杂的机理使细胞不同部位着色不同。瑞氏染色机理主要成分：碱性美兰与酸性伊红9瑞氏染色的原理组成：酸性染料伊红和碱性染料美兰溶于甲醇中酸性染料与细胞中的碱性物质，如血红蛋白，嗜酸性颗粒结合，使其染成红色碱性染料与细胞中的酸性物质，如核染色质，嗜碱性颗，血小板等结合，使其染成蓝色。而中性颗粒可与两者都结合，染成紫红色瑞氏染色的原理组成：酸性染料伊红和碱性染料美兰溶于甲醇中10【操作】1、血涂片制备标记推片干燥2、染色染液(I液)数滴覆盖整个血膜滴加等量或稍多的缓冲液(II液)

流水冲洗干燥

5-10min【操作】5-10min11血涂片染色勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液充分混匀静置10分钟直接流水冲洗3-5分钟（切勿先倒掉染液）涂片经水洗干燥后用油镜分类计数100个白细胞李四123涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴覆盖整个血膜1分钟血涂片染色勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液12

干燥

染色

冲洗瑞氏染液盖满血涂片1min缓冲液1-2倍5-10min晾干干燥瑞氏染液1min缓冲液5-10min晾干干燥133、低倍镜观察

全片浏览WBC分布与染色4、油镜观察

一定方向顺序分类100个WBC

5、计算

各类细胞百分率final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件14血涂片的观察低倍镜观察1.染色情况(满意、偏酸、偏碱）2.细胞分布情况油镜下分类计数：体尾交界处。油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。李四123血涂片的观察低倍镜观察李四12315外周血镜下WBC

外周血镜下WBC16外周血中常见细胞形态中性粒细胞：胞体呈圆形，胞质量丰富胞质中含有大量细小均匀的紫红色中性颗粒核分为2-5叶，叶间有核丝相连外周血中常见细胞形态中性粒细胞：17嗜酸粒细胞

胞体呈圆形

胞质中充满粗大、均匀整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒

胞核常分两叶，形似眼镜嗜酸粒细胞18嗜碱粒细胞

胞体呈圆形

胞质中含少量粗大、大小不均、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒，常覆盖在核上，核分叶常不明显。嗜碱粒细胞19单核细胞

胞体呈不规则性或椭圆形胞质量丰富，常呈毛玻璃样半透明胞核大，形状不规则，呈椭圆形，肾形，马蹄形或不规则分叶，有时折叠卷曲，染色质细致疏松如网状单核细胞20淋巴细胞

胞体呈圆形

胞质量较少，仅在和的一侧出现，染色呈天蓝色或深蓝色透明

胞浆中偶见几颗大小不等的紫红色嗜天青颗粒

胞核圆形，染色质粗糙紧密，偶见凹陷淋巴细胞21大淋巴细胞

胞体圆形/椭圆形胞质透明、淡蓝色胞质内可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒胞核圆/椭圆/肾形染色质粗紧成块，深紫红色，核外缘光滑大淋巴细胞

胞体圆形/椭圆形22final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件23final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件24final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件25final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件26

27final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件28final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件29final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件30final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件31final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件32final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件33final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件34final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件35final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件36final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件37final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件38白细胞分类计数的临床意义疾病的诊断与鉴别白血病筛查功能性/器质性疾病鉴别病情观察及疗效判断判断感染的性质及预后白细胞分类计数的临床意义疾病的诊断与鉴别39谢谢谢谢40实验二、血涂片制备

WBC分类计数

实验二、血涂片制备

WBC分类计数41要求

初步掌握血图片制备、瑞氏染色原理方法，WBC染色后形态学特点及其分类计数方法要求

初步掌握血图片制备、瑞氏染色原理方法，WBC染色后形态42流程图：血液标本的采集制作1-2张血涂片提取白细胞充池WBC计数瑞氏染色WBC分类计数流程图：血液标本的采集制作1-2张血涂片提取白细胞充池WBC43原理：血标本形态特点/颜色差异分类计数操作：

⑴涂片

⑵染色⑶镜下观察（低倍镜、油镜）⑷计算涂片瑞氏染色原理：涂片瑞氏染色44血涂片制备

血涂片制备45final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件46final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件47final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件48瑞氏染色机理主要成分：碱性美兰与酸性伊红物理吸附、化学亲和与电荷作用，复杂的机理使细胞不同部位着色不同。瑞氏染色机理主要成分：碱性美兰与酸性伊红49瑞氏染色的原理组成：酸性染料伊红和碱性染料美兰溶于甲醇中酸性染料与细胞中的碱性物质，如血红蛋白，嗜酸性颗粒结合，使其染成红色碱性染料与细胞中的酸性物质，如核染色质，嗜碱性颗，血小板等结合，使其染成蓝色。而中性颗粒可与两者都结合，染成紫红色瑞氏染色的原理组成：酸性染料伊红和碱性染料美兰溶于甲醇中50【操作】1、血涂片制备标记推片干燥2、染色染液(I液)数滴覆盖整个血膜滴加等量或稍多的缓冲液(II液)

流水冲洗干燥

5-10min【操作】5-10min51血涂片染色勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液充分混匀静置10分钟直接流水冲洗3-5分钟（切勿先倒掉染液）涂片经水洗干燥后用油镜分类计数100个白细胞李四123涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴覆盖整个血膜1分钟血涂片染色勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和Ⅱ液52

干燥

染色

冲洗瑞氏染液盖满血涂片1min缓冲液1-2倍5-10min晾干干燥瑞氏染液1min缓冲液5-10min晾干干燥533、低倍镜观察

全片浏览WBC分布与染色4、油镜观察

一定方向顺序分类100个WBC

5、计算

各类细胞百分率final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件54血涂片的观察低倍镜观察1.染色情况(满意、偏酸、偏碱）2.细胞分布情况油镜下分类计数：体尾交界处。油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。李四123血涂片的观察低倍镜观察李四12355外周血镜下WBC

外周血镜下WBC56外周血中常见细胞形态中性粒细胞：胞体呈圆形，胞质量丰富胞质中含有大量细小均匀的紫红色中性颗粒核分为2-5叶，叶间有核丝相连外周血中常见细胞形态中性粒细胞：57嗜酸粒细胞

胞体呈圆形

胞质中充满粗大、均匀整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒

胞核常分两叶，形似眼镜嗜酸粒细胞58嗜碱粒细胞

胞体呈圆形

胞质中含少量粗大、大小不均、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒，常覆盖在核上，核分叶常不明显。嗜碱粒细胞59单核细胞

胞体呈不规则性或椭圆形胞质量丰富，常呈毛玻璃样半透明胞核大，形状不规则，呈椭圆形，肾形，马蹄形或不规则分叶，有时折叠卷曲，染色质细致疏松如网状单核细胞60淋巴细胞

胞体呈圆形

胞质量较少，仅在和的一侧出现，染色呈天蓝色或深蓝色透明

胞浆中偶见几颗大小不等的紫红色嗜天青颗粒

胞核圆形，染色质粗糙紧密，偶见凹陷淋巴细胞61大淋巴细胞

胞体圆形/椭圆形胞质透明、淡蓝色胞质内可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒胞核圆/椭圆/肾形染色质粗紧成块，深紫红色，核外缘光滑大淋巴细胞

胞体圆形/椭圆形62final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件63final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件64final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件65final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件66

67final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件68final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件69final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件70final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件71final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件72final实验二、血涂片制备WBC分类计数课件73