医院消毒灭菌效果的监测及医院环境卫生学监测课件

医院消毒灭菌及环境卫生学监测技术医院消毒灭菌效果监测卫生部《医院感染管理规范》医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测；灭菌合格率必须达到100%；不合格的物品不得进入临床使用部门。医院消毒灭菌效果监测医院消毒灭菌效果监测的目的：是预防医院内感染的重要措施之一。对消毒效果的监测是评价：其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段。是无菌技术操作及隔离技术的基础。因此消毒灭菌效果监测是保证医院消毒灭菌质量的重要措施。医院消毒灭菌效果监测的内容热力灭菌效果监测：压力蒸汽紫外线消毒效果监测；使用中消毒剂的监测；软式内镜消毒效果监测采样；医院环境卫生学监测采样：空气、物体表面、工作人员手一、压力蒸汽灭菌效果监测压力蒸汽灭菌器的分类：根据排放空气的方式和程度不同可分为：下排气式压力蒸汽灭菌器预真空、脉动真空压力蒸汽灭菌器一、压力蒸汽灭菌效果监测压力蒸汽灭菌效果监测方法包括：

A、物理监测

B、化学监测

C、生物监测一、压力蒸汽灭菌效果监测

A、物理监测（程序监测）

按照经过试验所确定的灭菌工艺和有关参数进行检查，以判断灭菌是否按照规定的条件进行

一、压力蒸汽灭菌效果监测物理监测的主要项目：②排气情况：灭菌温度:

灭菌时间压力每次灭菌应做详细记录，包括：每锅锅号、压力、温度、时间、灭菌物品、灭菌操作者签名一、压力蒸汽灭菌效果监测物理监测的主要项目：③物品的装放：大包上层、小包下层

织物上层、金属下层物品竖放不能贴靠柜壁下排气：装量不超过柜室内容量80%一、压力蒸汽灭菌效果监测B、化学监测包括：①包内指示卡(121℃、132℃）

②包外指示胶带要求：指示胶带每包外必贴；指示卡每包包内必放。包内：化学指示卡

结果判断：打开灭菌包，指示剂由米色变成黑色，表示达到灭菌条件灭菌包的外包装×√√注意事项：

包外化学指示胶带，根据变色情况，只能代表物品是否已经灭菌，仅仅起到一个鉴别作用，不能代表灭菌是否彻底。包内化学指示卡，可以准确反映灭菌的时间、温度和饱和蒸汽的综合变化，用以鉴定每一个包裹内部的情况，指示剂与对照色块颜色相符，表示灭菌彻底。B-D试验B-D试验包的准备：由100%脱脂纯棉布折叠成长30*25*25（cm）大小的布包裹，测试包的质量为4kg或用一次性B-D试验包。操作方法：将专门的B-D试验纸，放入自制测试包或专用的一次性B-D试验包的中间，将B-D试验包水平放于灭菌柜内灭菌车的前底层，靠近柜门与排气口的前方，柜内除测试包外物任何物品，134℃,3.5--4分钟后，取出B-D试验纸观察颜色变化。B-D试验结果判定：包内试纸均匀一致变色，说明B-D试验通过冷空气排除效果良好，灭菌器可以使用，反之，变色不均则说明灭菌器有冷空气残留，B-D试验失败，可重复一次B-D试验。直至通过B-D试验后该灭菌器方可使用。压力蒸汽灭菌效果监测C、生物监测1）压力蒸汽灭菌器：采用“自含式生物指示剂”每周进行一次（指示菌株采用耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢）2）灭菌器新安装、移位、大修后的灭菌器应进行物理监测、化学监测和生物监测，物理监测、化学监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用，对于小型压力蒸汽灭菌器，生物监测应满载连续监测三次，合格后灭菌器方可使用。预真空压力蒸汽灭菌器应进行B-D试验并重复3次，连续监测合格后，方可使用。二、紫外线消毒效果监测紫外线消毒的监测，必须进行：

A、日常监测

B、化学监测

C、生物监测二、紫外线消毒效果监测日常监测：使用时记录：新灯管启用日期、灯管使用照射时间、累计照射时间、擦管时间、化学及生物监测结果记录紫外线强度照射指示卡测定法

图1物品准备：标尺、紫外线强度照射指示卡图2放好标尺，开启紫外线灯图3开启紫外线灯5分钟后，将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1m处，有图案面朝上图4照射1min后，关掉紫外线灯，观察指示卡色块的颜色，进行结果判定。将指示卡色块的颜色与“灯管强度90µw/cm2”、“灯管强度70µw/cm2”标准色块进行比较，判定测定结果。二、紫外线消毒效果监测C、生物监测：⑴空气消毒效果的监测：空气培养⑵表面消毒效果的监测：物体表面采样

使用紫外线消毒灯的注意事项：紫外线消毒灯强度监测化学指示卡必须经过卫生部批准认可，并在有效期内使用及时记录判断结果，放置时间过久，指示卡光敏涂料的颜色会随着时间变化而变淡。指示卡应用避光纸包装，置于4℃冰箱内储存，以免光敏涂料遇日光照射不稳定变色而影响监测结果。紫外线灯安置后及使用前应进行监测，使用中的灯管照射强度监测，应6个月监测一次。监测时应特别注意照射距离和时间，以免影响检测结果的准确性。测试时注意个人防护，避免灼伤眼角膜、皮肤。三、消毒剂的监测化学监测要求应该根据消毒剂、灭菌剂的性能定期监测。含氯消毒剂：应该每日监测浓度，并做好记录；消毒剂使用的时间不得超过产品说明书规定的使用期限戊二醛：每周不少于1次监测浓度；应同时对消毒、灭菌的物品进行消毒灭菌效果的监测消毒物品，不得检出致病性微生物；灭菌物品，不得检出任何微生物。三、消毒剂的监测化学监测①含氯消毒剂浓度测试纸：测定时，半分钟内，在自然光下与标准色块比较，读出溶液所含的有效成分浓度值。时间超过1分钟，颜色即逐渐消退。化学监测：（测氯浓度试纸）三、消毒剂的监测化学监测①戊二醛浓度测试纸操作方法：从小瓶中取出一条试纸，并旋紧瓶盖；将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，并及时取出；用吸水纸吸取多余的液体；横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝下；等候3~8分钟的颜色变化，判读结果。（低于3分钟，颜色变化不彻底结果不正确；超过8分钟，颜色逐渐褪去，也使判读困难）化学监测（测戊二醛浓度试纸）三、消毒剂的监测化学监测戊二醛浓度试纸操作操作结果判定：指示色块变成均匀黄色时，说明溶液的有效浓度高于所测最低有效浓度。指示色块全部或仍有部分白色，说明溶液的有效浓度低于最低有效浓度。三、消毒剂的监测生物监测检测方法：A、涂抹法：用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有相应中和剂的采样管内混匀；用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml，滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做2个平行样；一平板置20℃培养7天，观察其霉菌生长情况，另一平板置35℃温箱培养72小时记数菌落数同时按照卫生部《消毒技术规范》2002年11月版,详见204页（按照3.17.15

原则执行）检测致病菌（金葡、乙型溶血性链球菌）。消毒液染菌量（cfu/ml）=每个平板上的菌落数×50三、消毒剂的监测生物监测检测方法：B、倾注法：用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀；分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内，加入已熔化的45℃-48℃的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；一平板置20℃培养7天，观察其霉菌生长情况；另一平板置36℃±1℃培养72小时，记数菌落数；同时按照卫生部《消毒技术规范》2002年11月版,详见204页（按照3.17.15原则执行）检测致病菌（金葡、乙型溶血性链球菌）。消毒液染菌量（cfu/ml）=每个平板上的菌落数×20三、消毒剂的监测生物监测结果判断：消毒剂：每季度监测1次，其含菌量必须＜100cfu/ml，不得检出致病性微生物；灭菌剂：每月监测1次，不得检出任何致病性微生物。3、注意事项：采样后1小时内检测。使用中的碘伏效果监测法使用中的碘伏注意：如果自己配制的消毒剂，要有配置时间、失效期、配置人员签名。所有化学测试纸、卡，必须经过卫生部批准认可，并在有效期内使用。四、软式内镜消毒灭菌效果监测

采样四、软式内镜消毒灭菌效果监测采样四、软式内镜消毒灭菌效果监测

卫生部要求：消毒后的内镜应该每季度进行生物学监测并记录完整；灭菌后的内镜应该每月进行生物学监测并记录完整。内镜消毒、灭菌后合格标准：消毒后的内镜合格标准为：细菌总数<20cfu/件，不能检出致病菌。灭菌后的内镜合格标准为：无菌检测合格。（灭菌后的内镜和附件应按照无菌物品要求进行储存）五、医院环境卫生学监测医院环境卫生学监测内容包括：

定期进行空气培养

定期进行物体表面培养

定期进行工作人员手培养

环境类别范围空气平均菌落数a物体表面平均菌落数CFU/

㎡CFU/皿CFU/

m³

Ⅰ类环境洁净手术部符合GB50333要求≤150≤5.0其他洁净场所≤4.0（30min）bⅡ类环境普通手术室、产房、导管室、新生儿室、普通保护性隔离室、烧伤病房、ICU≤4.0（15min）≤5.0Ⅲ类环境儿科病房、血液透析中心、消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；其他普通住院病区≤4.0（5min）≤10.0Ⅳ类环境普通门（急）诊及其检查、治疗（注射、换药等）室；感染性疾病科门诊和病区≤4.0（5min）≤10.0aCFU/皿为平板暴露法，CFU/

m³为空气采样器法

b平板暴露法检测时的平板暴露时间空气及物体表面微生物学监测指标五、医院环境卫生学监测卫生部《医院感染管理规范》规定：医院应每月对手术室、重症监护（病房）室ICU、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。

当有医院感染流行时，怀疑与医院环境卫生学因素有关时，应该及时进行监测。洁净手术室空气采样流程图1手术间准备图2采样物品准备，培养皿采样前室温放置30分钟图3采样人员准备，穿戴与待测洁净区相应的工作服123图4不同级别区域采样布点，布点上方避免遮挡物图5打开培养皿盖，平移至培养皿边缘，暴露的培养皿上面禁止操作，防止污染54图6暴露培养皿30min后，将培养皿盖合上图7标识培养皿图8随机取出培养皿一个，打开培养皿盖，平移至培养皿边缘后立即合上，做操作对照678图9将培养皿放入转运箱，密闭转运至细菌室，在37℃条件下培养24h图10每批次随机抽取培养皿放入培养箱中培养，做培养皿无菌试验910非洁净环境空气沉降菌采样图1待测房间准备，静止至少10分钟图2物品准备图3根据待测房间面积大小，按GB15982要求放置培养皿图4空白对照图5从里到外逐个打开培养皿盖，扣放于平皿旁（注：手、头等严禁从培养基上方越过图6暴露规定时间后，按打开顺序盖上平皿盖，及时送检物体表面消毒效果监测方法1234图1物品准备：规格内板径5cm×5cm图2打开无菌棉签图3消毒采样管口后取下管塞图4将无菌棉签放入无菌0.03mol/L的PBS或生理盐水中浸湿并挤出多余液体。物体表面消毒效果监测方法6655图5A.在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉签，连续采样4个规格板面积；爆发流行调查时，采样面积不限；B.小件物体则涂