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文档简介
生物技术二班于涛月季的植物组织培养月季的植物组织培养
生物技术二班于涛实验设备:烧杯、移液器、玻璃棒、500ml容量瓶、100ml锥形瓶三个、微波炉、解剖刀、镊子、超净工作台、酒精灯、酒精棉等。实验设备实验材料:75%酒精、0.15%升汞、6--BA、MgSO47H2O、FeSO47H2O、NH4NO3、Na2EDTA2H2O、CaCl22H2O、生长调节剂、KNO3、KH2PO4、NAA、KI、肌醇、H3BO3、烟酸、MnSO44H2O、盐酸硫胺素、ZnSO47H2O、盐酸吡哆醇、Na2MoO42H2O、甘氨酸、CuSO45H2O。一.植物组织培养的基本过程二、影响植物组织培养的因素:1、外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)
大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S
微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等不同植物激素使用顺序和使用量使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素细胞分裂素比值结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长不同植物激素使用顺序和使用量生长素细胞分裂素比值结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长制备MS固体培养基外植体消毒
接种
培养栽培实验操作
移栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上2植物生长调节剂影响月季组织培养的植物生长调节剂主要有细胞分裂素(如BA、ZT、ZR、2iP、ipA和TDZ等)、生长素(如NAA、IAA和IBA)和赤霉素(GA3)3种。细胞分裂素参与克服顶端优势的过程,因而能促进侧枝的萌发和生长,试管中嫩芽的繁殖主要是细胞分裂素影响的结果。在茎增殖阶段,细胞分裂素浓度过高对下一步的生根培养有影响,增殖用的BA含量愈高,对生根的抑制愈严重。在生根阶段,细胞分裂素对生根和移栽有抑制效应,使用0.3mg/L或更高浓度的2iP培养基进行月季组织培养,组培苗一般无法生根,即使2iP浓度较低时能形成一些根,在移栽时也会失败。因此,一般在月季生根培养基中都尽可能降低细胞分裂素的浓度,而使用一定量的生长素。但生长素浓度过高也同样会抑制月季根的形成,只有选择适宜的生长素浓度才能有效地促进根的生长。用IAA诱导生根,浓度只能在1mg/L以下,IAA浓度过高根的诱导有下降趋势。对NAA而言,浓度为0.5mg/L时对月季的诱导生根和提高移栽成活率有良好效果。在切花月季萨曼莎的组织培养试验中,为保证生根率,IAA、IB
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