乙肝病前s1蛋白在乙型肝炎临床诊断中的意义和应用

乙肝病毒前S1蛋白在乙型肝

炎临床诊断中的意义和应用第一页，共二十六页。病毒性肝炎的主要特性如下分型项目甲型乙型丙型丁型戊型病原27nm42nm30-60nm36nm27-38nmRNA病毒DNA病毒RNA病毒RNA病毒RNA病毒主要传播途径粪→口血液、母婴血液血液粪→口

流行性散发或流行散发散发散发流行或散发潜伏期30天90天5周4－20周36天

（15－50）（45－160）（2－26）（15－75）起病急性较多多缓慢多缓慢多缓慢急性较多慢性肝炎或无有有有无慢性病毒携带血清病毒性肝炎标志物检测EIAEIAEIAEIAEIA、IEM以及基因检测RT-PCRPCRRT-PCRRT-PCR第二页，共二十六页。

在我国建立简便、灵敏、重复性好的检测乙型肝炎病毒试剂盒是及其重要的。我国为病毒性肝炎的高发区，特别是乙型肝炎，我国人群乙型肝炎病毒的感染率达45-85%，HBsAg携带者有1.2亿以上，10%以上转为慢性肝炎，部分演变为肝硬变，进而引发肝癌。第三页，共二十六页。前S1蛋白分子生物学特性第四页，共二十六页。

1、乙肝病毒(HBV)基因结构

HBV为嗜肝DNA病毒，由一个不完全双链DNA组成，约3200个氨基酸；长链L(-)含4个开放读码框架（OFR)，为病毒蛋白的编码区：S区、C区、P区、X区；短链S(+)相当于长链的50—100%。其不固定端可被内源性DNA多聚酶延长，使病毒成为完整的双链。第五页，共二十六页。外膜核壳负链DNA正链DNADNA多聚酶乙型肝炎病毒（HBV）图解第六页，共二十六页。Xgene

XgeneCgenePreCHBxAgHBcAgHBeAgSgenepreS2preS1PgeneHBsAg

DNApolymeraseHBV基因组：编码HBV抗原的基因第七页，共二十六页。ssspreS2preS2preS1226aa“major”or”small”HBsAg226aa

226aa55aa

55

aa

281aa”middle”HBsAg389aa”large”HBsAg108aa编码不同形式表面抗原（HBsAg)的HBV基因区域第八页，共二十六页。乙型肝炎病毒血清学检测的临床意义检测名称HBV感染，高滴度的HBsAg常表示病毒的高复制水平，低滴度则表示病毒低复制或不复制。HBsAg抗HBs乙型肝炎的保护性抗体。当HBV感染趋向恢复时，抗HBs开始产生并逐渐增多。HBeAg临床上病毒复制的指标。HBeAg与ALT结合，用于病期和病情判断。抗HBe通常表示病毒复制减弱和肝病渐趋恢复。前c/A83变异，HBeAg不表达，抗HBe(+)，病毒持续复制，肝病转慢。抗HBcHBV现症或既往感染标志。流行病学研究的指标。乙肝五项（HBV－M)缩略语临床意义第九页，共二十六页。乙肝IgM核心抗体检测名称缩略语临床意义抗HBcIgMHBV的急性感染和重新活动的慢性感染标志。前S1蛋白Pres1抗原

HBV感染的最早期出现，提示HBV的感染，复制和传染性。Pres1抗原的转阴是病毒清除最早迹象，如持续阳性提示肝病转慢。Pres1抗体急性HBV感染最早出现的抗体。它即反应了病毒的清除又反应了病变的活动。动物试验表明抗前S1有抗病毒的作用。乙型肝炎病毒血清学检测的临床意义第十页，共二十六页。S基因变异状况1.前S1变异株以前S1蛋白C端AA183缺失突变较多见，这种突变因影响HBsAg正常分泌，并使L蛋白发生蓄积而引起肝细胞病变和肝细胞对炎性因子的损伤更敏感。2.前S1基因起病密码下游230位核苷酸（nt230）可因突变形成终止密码并影响前S2起始密码，可使HBV逃避干扰素治疗和宿主免疫清除。3.S基因变异是疫苗免疫失败的重要原因：①HBsAgaa

145变异株。②HBsAgaa

126，129，132，133，134等变异株。③理想的疫苗应能诱导覆盖野毒株和变异株保护性免疫。4.S基因变异导致形成HBsAg/抗HBs双阳性（aa126，130，145）5.S基因变异导致形成HBsAg阴性，抗HBs阳性，HBV-DNA持续阳性的慢性乙型肝炎的重要原因（aa126，131，145）第十一页，共二十六页。

乙肝病毒前S1的研究表明：前S1蛋白及其抗体与HBV-DNA、HBeAg、肝脏损害、乙肝的转归、乙肝疫苗有效成分等都有极其密切的关系。

乙肝病毒前S1蛋白及其抗体可作为乙肝病毒感染、复制和乙肝病人的诊断、治疗和预后的新标志和新检测系统。第十二页，共二十六页。意义

HBsAganti-anti-HBcHBeAganti-HBV/preS1preS1HBsIgMtotHBeDNA抗原抗体＋－＋＋＋－＋＋＋／－＋－＋＋－＋/－＋＋＋／－＋－＋＋－＋/－－－＋／－＋－－＋－＋/－－－－－－＋＋－－－－－－＋－＋－＋/－－－－－＋－－－－－－－病毒活动（主要为野生型）病毒活动（主要为前核负链变异型）正在消退的急性肝炎健康携带者“核心窗口”期自然感染后的免疫疫苗接种后的免疫不同形式的血清学HBV标记物和它们的解释第十三页，共二十六页。前S1、HBV免疫检测结果HBV标志前S1(＋)例数例数+阳性率(%)HBsAg(＋)HBeAg(＋)抗HBc(＋)1079487.9HBsAg(＋)抗HBe(＋)抗HBc(＋)1196857.1HBsAg(＋)HBeAg(＋)211676.2HBsAg(＋)抗HBc(＋)371129.7HBsAg(＋)HBeAg(＋)抗HBe(＋)4125.0HBsAg(＋)抗HBe(＋)1310.77HBsAg(＋)抗HBs(＋)抗HBe(＋)抗HBc(＋)400HBsAg(＋)抗HBs(＋)1900HBsAg(＋)抗HBs(＋)抗HBe(＋)200HBsAg(＋)400合计33019157.9

第十四页，共二十六页。第十五页，共二十六页。HBsAgPreS1抗原PreS1抗体(IgM)PreS1抗体(IgG)抗HBs年抗HBe抗HBc(IgG)HBeAg0102030感染HBV-DNAHBV携带者血清病毒学标志物的转换曲线第十六页，共二十六页。前S1蛋白与HBV-M

和HBV-DNA

测定结果PreS1HBV-DNA（＋）阳性率阳性率（＋）HBV-MnHBsAg,HBeAg,抗HBc

HBsAg,抗HBe,抗HBc

HBsAg,抗HBc抗HBs,抗HBe，抗HBc抗HBs，抗HBc抗HBcHBsAg,抗HBs387347893519123676328235

10823212927210000300000360012.740000第十七页，共二十六页。急性乙肝不同病期的免疫标志动态病日例数前S1抗原(＋)抗前S1抗体(＋)HBsAg(＋)HBeAg(＋)抗HBs入院日

25222325180入院后一月25172223140入院后二月258221358入院后三月212124115第十八页，共二十六页。急性乙型肝炎前S1抗体动态变化第十九页，共二十六页。不同类型

HBV

感染的前S蛋白及其抗体的检出率％HBV（杂交）前S1蛋白前S2

蛋白前S1抗体前S2抗体急性乙型肝炎极期恢复6月内恢复0.5-2年趋向慢性暴发性乙型肝炎慢性无症状携带HBeAg(+)抗HBe(+)慢性乙型肝炎HBeAg(+)抗HBe(+)95979287820026989500003095906501222306752882999700312400071859281681353706580*据骆抗先文献综合第二十页，共二十六页。结语第二十一页，共二十六页。乙型肝炎病毒前Ｓ1抗原研究进展国内外对前Ｓ蛋白/抗前Ｓ蛋白临床意义的基本共识一·前Ｓ蛋白１．前Ｓ1病毒蛋白出现在急性HBV感染的最早期，是病毒清除的最早迹象。２．前Ｓ1病毒蛋白持续存在者将发展至慢性肝炎。３．前Ｓ1病毒蛋白与HBV-DNA,HBeAg高度相关。与肝内

HBV-DNA,HBcAg检出高度相关。４．在抗HBe(+)的HBV感染者中，检出前Ｓ1蛋白可表明病毒的复制。

第二十二页，共二十六页。５．病毒附着于肝细胞膜上，最重要的介导部位是前Ｓ1蛋白的氨基酸(AA)21-47片段。变异的病毒只要这一区段完好就有传染性。仅仅是对(AA)21-47肽的

前Ｓ1抗体才能中和病毒。６．前S1蛋白颗粒表面具有高度的免疫原性，常作为乙肝疫苗的主要成分。⒎前S1抗原主要存在于血清中完整HBV表面。第二十三页，共二十六页。二．抗前Ｓ蛋白

前Ｓ抗体同时反映病变的活动和对病毒的清除。1.HBsAg消失后才转换为抗HBs，而前Ｓ抗体常与其抗原同时存在。2.前Ｓ抗体通过对感染细胞的破坏而清除病毒，因而同时参与病变活动性和免疫清除机制。抗HBs则通过中和作用预防病毒再感染。3.早期出现抗前Ｓ，可能是病毒将清除，感染将结束的最早标志物。即使在暴发性肝炎，出现抗前Ｓ也可能预示垂危中的生机。4.猩猩试验表明，抗前Ｓ有对抗HBV的保护作用。第二十四页，