2023年河南省郑州市郑州一中高二生物第二学期期末质量跟踪监视模拟试题（含解析）

2023学年高二年级下学期生物模拟测试卷注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于固定化酵母细胞制备过程的叙述，错误的是A．将干酵母与蒸馏水混合并搅拌，有利于酵母菌的活化B．配制海藻酸钠溶液时要进行小火或间断加热C．将溶化并冷却的海藻酸钠溶液直接转移至注射器中D．将制备好的凝胶珠放入氯化钙溶液中浸泡半小时左右2．内环境是体内细胞与外界环境进行物质交换的媒介。据图分析判断下列说法正确的是A．若③为胰岛B细胞，饭后半小时⑤处的胰岛素浓度高于①处B．若③为脑细胞，⑤处的氧气浓度高于①处，而C02的浓度相反C．若③为骨骼肌细胞，饭后五小时⑤处的血糖浓度低于①处D．若③为肝脏细胞，合成的血红蛋白通过胞吐运送到⑤处3．细胞质基质是细胞代谢的重要场所。下列有关细胞质基质的叙述，不正确的是A．人体细胞的细胞质基质不能产生CO2B．由水、无机盐、脂质、糖类、氨基酸、核苷酸和多种酶等组成C．同一个体不同细胞的细胞质基质的成分相同D．细胞质基质是活细胞进行新陈代谢的主要场所4．下列有关植物细胞能量代谢的叙述，正确的是A．含有两个高能磷酸键的ATP是RNA的基本组成单位之一B．加入呼吸抑制剂可使细胞中ADP生成减少，ATP生成增加C．无氧条件下，丙酮酸转变为酒精的过程中伴随有ATP的合成D．光下叶肉细胞的细胞质基质、线粒体和叶绿体中都有ATP合成5．家庭中制作泡菜的方法：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”，密封后置于温度适宜的地方，下列与此过程相关的叙述，不正确的是A．用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒B．加入“陈泡菜水”的作用是提供菌种C．制作泡菜过程中，有机物的干重和种类将减少D．若制作的泡菜咸而不酸，最可能的原因是大量的食盐抑制了乳酸菌的发酵6．下列关于遗传信息的携带者——核酸的相关叙述，正确的是()A．在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，用质量分数为8%的盐酸处理的口腔上皮细胞仍是活细胞，只是其膜的通透性增强B．在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，需将两滴吡罗红和甲基绿染液先后滴在载玻片上C．与甲基绿发生结合的核酸分子只分布在细胞核中D．核酸在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有重要作用二、综合题：本大题共4小题7．（9分）科学家从牛的胰脏中分离出一条由76个氨基酸组成的多肽链（Ub）。研究发现Ub在细胞自我监测和去除某些“不适用蛋白质”（即靶蛋白）的机制中扮演着重要角色。如果某个蛋白质被贴上Ub这个标签，就会被运送到细胞内的蛋白酶体处被水解掉，其过程如图1所示：请回答下列问题：（1）Ub由76个氨基酸组成，则它具有___个肽键，其结构简式是_________，Ub的合成场所是________，若它在小肠中被水解，则如图2中哪种物质不可能产生？_____。（2）如果靶蛋白不与Ub结合，便不能被蛋白酶体水解。①过程说明Ub的作用是识别________并与之结合；据图1可知完成①、②过程需要的主要条件是___________和________________。（3）已知在翻译产生Ub过程中，运输丙氨酸的tRNA的一端三个碱基为CGA，则丙氨酸的密码子为_____，如果知道了Ub这条肽链的氨基酸序列，能否确定编码该肽链的Ub基因的碱基序列？______（4）若有99个氨基酸（假设它们的平均分子量为100），通过结合形成了含有2条多肽链的蛋白质，则其相对分子质量比原来减少了______________，含氨基的数量最少是_____________个。（5）若某一多肽链由201个氨基酸组成，其分子式为CxHyNaObS2（a＞201，b＞202），并且是由如图3中5种氨基酸组成的，那么该多肽链彻底水解后将会得到赖氨酸、天冬氨酸各多少个？______。A．a﹣202、b﹣202B．a﹣202、（b﹣202）/2C．a﹣201、（b﹣201）/2D．a﹣201、（b﹣202）/28．（10分）某种雌雄异株的二倍体高等植物（性染色体为XY型），其花色（A、a）和叶型（B、b）性状是独立遗传的，其中一对等位基因位于X染色体上。下面是两个杂交组合的亲本性状及子代表现型与比例，回答下列问题：杂交组合亲代子代♂♀甲红花宽叶♂X白花宽叶♀1/4红花宽叶1/4红花窄叶1/4白花宽叶1/4白花窄叶1/2红花宽叶1/2白花宽叶乙白花窄叶♂X红花宽叶♀1/2红花宽叶1/2红花窄叶无雌性个体（1）根据杂交组合______可判定控制_______性状的基因位于X染色体上且______是显性性状。（2）杂交组合乙的后代没有雌性个体，其可能的原因有：一是基因b使雄配子致死；二是基因_____________使雄配子致死。若欲通过杂交实验进一步确定原因到底是哪种，请以题干中子代为亲本设计杂交方案，并预期结果得出结论。杂交方案：______。预期结果及结论：①若子代_____，则是原因一；②若子代_____，则是原因二。（3）若是第二种原因成立，让组合乙中子代的红花窄叶雄株与组合甲中子代的红花宽叶雌株交配，后代表现型及比例为______。9．（10分）I以富含纤维素的作物秸秆为原料、利用微生物发酵生产乙醇，是现代化石能源的重要途径。科学家通过实验筛选出分解纤维素能力较强的菌株，实验流程如下。请回答:（1）样品最好取自于______的土壤。（2）筛选过程中，可以采用______染色法进行鉴定，其中______的菌落中的菌种分解纤维素能力较强。（3）培养基b应为______（固体、液体）培养基。扩大培养后，可采用______的方法进行计数。（4）得到的目的菌种，一般用______法进行固定，常用的多孔性载体有______（写出1种即可）。在工业生产中使用固定化菌种的优点是____________（写出2点即可）。Ⅱ肿瘤细胞的蛋白PD-L1能够与T细胞的蛋白PD-1结合，抑制免疫系统对肿瘤的杀伤作用。某种靶向药物可以阻断上述结合过程，从而增强免疫系统对肿瘤的杀伤作用。下图是制备该药物的流程图：请据图回答：（1）以______作为抗原注入小鼠体内，发生免疫反应后，从小鼠体内的______（器官）中提取细胞a。（2）细胞a与b能融合的原理是______，常用的诱导方法有______（写出2个即可）。经过诱导，两两融合的细胞有______类。（3）细胞d的特点是：____________。可将细胞d通过______或______进行大规模培养。（4）鉴定提取物中是否含有该靶向药物时，可取适量提取物，加入______，观察是否出现凝集沉淀。10．（10分）某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______________，也是为了保证__________________。（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。11．（15分）研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点：Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，还应含有_____；引物应选用下图中的_____（填图中字母）。（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为_____。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是_____（填图中的编号），③处的培养液应添加_____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。（3）图中桑椹胚需通过_____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行_____处理。

参考答案（含答案详细解析）一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【答案解析】干酵母与蒸馏水混合并搅拌，以利于酵母菌活化，A正确；配制海藻酸钠溶液时要用小火或间断加热的方法，防止焦糊，B正确；溶化好的海藻酸钠溶液需冷却后才能加入已活化的酵母细胞，再将混合液转移至注射器中，C错误；将与酵母菌混匀的海藻酸钠溶液注入CaCl2溶液中浸泡半小时左右，以形成球形或椭球形的凝胶珠，D正确。2、B【答案解析】

内环境是细胞的直接环境，细胞与内环境之间进行物质交换，彼此相互影响；根据不同细胞的生理特点分析它对血浆的影响。【题目详解】若③为胰岛B细胞，由于饭后半小时血糖浓度升高，胰岛素向血液的分泌增多，根据血液流向，⑤处的胰岛素浓度低于①处，A错误；若③为脑细胞，细胞呼吸消耗氧气，血浆中氧气浓度降低，根据血液的流向，⑤处的氧气浓度高于①处，而C02的浓度相反，B正确；若③为骨骼肌细胞，吸收并分解葡萄糖获得能量，使血糖降低，根据血液流向，饭后五小时⑤处的血糖浓高于①处，C错误；血红蛋白位于红细胞中，血浆蛋白分泌到血浆中，所以若③为肝脏细胞，通过胞吐运送到⑤处的应该是血浆蛋白，D错误。【答案点睛】易错点：骨骼肌和血糖的关系，肌细胞可以把血糖合成肌糖原但不能分解糖原释放葡萄糖，却可以通过细胞呼吸消耗葡萄糖；易混点：血浆蛋白和血红蛋白。3、C【答案解析】

考查细胞质基质的组成和功能，从而考查通过总结形成知识体系的能力。【题目详解】A.人体细胞进行有氧呼吸时在线粒体中产生二氧化碳，无氧呼吸不产生二氧化碳，所以细胞质基质不能产生CO2，A正确。B.由水、无机盐、脂质、糖类、氨基酸、核苷酸和多种酶等组成，B正确。C.同一个体不同细胞的形态结构和功能因细胞分化而不同，细胞质基质的成分也会有区别，比如成熟红细胞有血红蛋白，而其它细胞没有，C错误。D.细胞质基质是活细胞进行新陈代谢的主要场所，D正确。【答案点睛】细胞质基质是代谢的主要场所，不同细胞的功能不同，因而细胞质基质的物质组成和发生的化学反应也不相同。4、D【答案解析】

1、ATP的结构简式是A-P～P～P，其中A代表腺苷（腺嘌呤+核糖），T是三的意思，P代表磷酸基团。

2、叶绿体是光合作用的细胞器，光合作用的光反应阶段产生ATP，光反应的条件是光照，光反应产生的ATP被光合作用的暗反应利用。

3、线粒体是有氧呼吸的主要场所，有氧呼吸的第一阶段在细胞质基质中进行，产生丙酮酸，在氧气充足的条件下，丙酮酸进入线粒体继续反应产生二氧化碳和水，有氧呼吸的三个阶段都能合成ATP。【题目详解】ATP是腺嘌呤+核糖+3个磷酸基团，含有两个高能磷酸键，ATP除去两个磷酸基团后是RNA的基本单位，A错误；加入呼吸抑制剂可以抑制细胞呼吸，生成ATP减少，B错误；无氧条件下，丙酮酸转变为酒精属于无氧呼吸的第二阶段，该阶段不产生ATP，C错误；光合作用的光反应阶段产生ATP，光反应的条件是光照，有氧呼吸的三个阶段都能合成ATP，有氧呼吸的场所是细胞质基质和线粒体，所以光下叶肉细胞的细胞质基质、线粒体和叶绿体中都有ATP合成，D正确。故选D。5、C【答案解析】

制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，进行无氧呼吸，产生乳酸。【题目详解】可以用酒擦泡菜坛进行消毒处理，A正确；陈泡菜水中含乳酸菌，B正确；制作泡菜过程中，乳酸菌进行乳酸发酵，无氧呼吸消耗有机物，有机物干重减少，种类会增多，C错误；加入食盐过多，会导致乳酸菌发生渗透失水，代谢减弱，影响乳酸菌发酵，D正确。故选C。6、D【答案解析】用8%的盐酸处理的口腔上皮细胞其膜的通透性增强，但细胞已死亡，A错误；对DNA和RNA染色，需滴两滴吡罗红甲基绿在载玻片上，是混合同时滴加的，B错误；核酸分为DNA和RNA，与甲基绿发生结合的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体也含有少量，C错误；核酸在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中具有重要作用，D正确。二、综合题：本大题共4小题7、75-CO-NH-核糖体D靶蛋白多种酶ATP提供能量GCU不能17462D【答案解析】

本题是关于蛋白质的问题，蛋白质的合成场所是核糖体，其中氨基酸数-肽链数=肽键数，蛋白质的分子量=氨基酸的总分子量-脱去水的总分子量。密码子是指mRNA上控制氨基酸的三个相邻的碱基，而tRNA上的反密码子与之能够互补配对。在计算蛋白质中某种氨基酸的数目时一般依据这种氨基酸的特殊之处来计算，例如可以依据硫元素数目确定半胱氨酸的数目。【题目详解】（1）题目中Ub由76个氨基酸组成，有一条肽链，因此，肽键数=76-1=75，肽键的结构简式是-CO-NH-，Ub是蛋白质，其的合成场所是核糖体，蛋白质在小肠中被水解，最终形成氨基酸，氨基酸中至少有一个氨基和一个羧基连在同一个中心碳原子上，如图2ABC都是氨基酸，而D不是氨基酸。（2）靶蛋白不与Ub结合，便不能被蛋白酶体水解。①过程说明Ub的作用是能够识别靶蛋白并与靶蛋白结合；据图1可知完成①、②过程需要消耗能量，需要多种酶的催化。

（3）在翻译过程中，mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子互补配对，因此，运输丙氨酸的tRNA的一端三个碱基为CGA，则丙氨酸的密码子为GCU，如果知道了Ub这条肽链的氨基酸序列，不能确定编码该肽链的Ub基因的碱基序列，是由于密码子具有简并性。

（4）若有99个氨基酸（假设它们的平均分子量为100），通过结合形成了含有2条多肽链的蛋白质，则肽键的数目为99-2=97个，因此其相对分子质量比原来减少了97×18=1746，由于该蛋白质中有两条肽链，因此，氨基的数量最少是2个。（5）若某一多肽链由201个氨基酸组成，其分子式为CxHyNaObS2（a＞201，b＞202），并且是由如图3中5种氨基酸组成的，题目可知赖氨酸中有两个N元素，而其他氨基酸中只有一个氮元素，因此，赖氨酸的数目为a-201，天冬氨酸特殊之处是由四个O元素，其他氨基酸只有两个氧元素，因此可以依据氧元素的数量来了一个方程计算，假设有x天冬氨酸，那么4x+2(201-x)-200=b，计算可知天冬氨酸=（b﹣202）/2，因此D正确。

故选D。【答案点睛】蛋白质计算的有关规律：规律一：设氨基酸的平均相对分子质量为a，n个氨基酸经脱水缩合成蛋白质(含一条肽链)。那么该反应生成(n-1)分子水，该蛋白质有(n-1)个肽键，至少含有1个游离氨基，1个游离羧基，游离的氨基总数为1+R基上的氨基数，游离的羧基总数为1+R基上的羧基数，该蛋白质的相对分子质量为na-(n-1)×18。规律二：设氨基酸的平均相对分子质量为a，n个氨基酸经脱水缩合成蛋白质(含m条肽链)。那么该反应生成(n-m)分子水，该蛋白质有(n-m)个肽键，至少含有m个游离氨基，m个游离羧基，游离的氨基总数为m+R基上的氨基数，游离的羧基总数为m+R基上的羧基数，该蛋白质的相对分子质量是na-(n-m)×18-2x。(其中x表示二硫键—S—S—的个数)规律三：设n个氨基酸经脱水缩合成蛋白质(含一条或多条肽链)。决定该蛋白质的mRNA的密码子有n个，碱基数有3n个，相关基因的碱基数有6n个。基因碱基数：mRNA的碱基数：氨基酸数=6：3：1。8、甲叶型（宽叶和窄叶）宽叶a和b共同作用选子代中红花窄叶雄株与白花宽叶（或红花宽叶）雌株进行杂交，观察后代雌雄比例(或性状表现）若后代全是雄株若后代雌雄株都有（雌：雄=1：2）红花宽叶雄株：红花窄叶雄株：白花宽叶雄株：白花窄叶雄株：红花宽叶雌株：红花窄叶雌株=9：3：3：1：6：2【答案解析】

据表分析：（1）由甲组中宽叶×宽叶，后代出现窄叶，判断宽叶为显性，由乙组中白花×红花后代全为红花，判断红花为显性；（2）由甲组实验中，后代雌雄个体中红花：白花均为1∶1，判断控制花色的基因位于常染色体上，由后代雌性全为宽叶，雄性宽∶窄=1∶1，判断控制叶形的基因位于X染色体上；（3）由后代性状分离比及（1）（2）的分析推断，甲组亲本为AaXBY×aaXBXb，乙组亲本为aaXbY×AAXBXb，据此答题即可。【题目详解】（1）根据分析：甲组中宽叶×宽叶，后代出现窄叶，判断宽叶为显性，后代雌性全为宽叶，雄性宽∶窄=1∶1，判断控制叶形的基因位于X染色体上。因此，由杂交组合甲可判定控制叶型性状的基因位于X染色体且宽叶为显性。（2）由分析判断，乙组亲本为aaXbY×AAXBXb，表格显示其没有雌性后代，有雄性后代，说明雌配子是成活的，则可能的原因是：一是基因b使雄配子致死；二是基因a和b共同使雄配子致死。为了检验到底是哪种原因，可以选择子代基因型为AaXbY的雄株作为父本，即选子代中红花窄叶雄株与白花宽叶（或红花宽叶）雌株进行杂交，若子代全为雄性个体，则为原因一；若子代有雌性个体，也有雄性个体（雄性：雌性=2∶1），则为原因二。（3）根据题意确定基因a和b共同使雄配子致死。让乙组子代的红花窄叶雄株（AaXbY，产生AY、AXb、aY三种配子）与甲组子代的红花宽叶雌株（AaXBXB或AaXBXb，产生AXB、aXB、AXb、aXb）交配，子代表现型及比例为：红花宽叶雄株（A_XBY）∶红花窄叶雄株（A_XbY）∶白花宽叶雄株（aaXBY）∶白花窄叶雄株（aaXbY）∶红花宽叶雌株（A_XBXb）∶红花窄叶雌株（A_XbXb）=（×+）∶（×+）∶（×）∶（）∶（×+）∶（×+）=9∶3∶3∶1∶6∶2。【答案点睛】本题以图表的形式，考查伴性遗传及常染色体上的遗传，要求考生掌握伴性遗传及常染色体遗传的特点，并根据题干信息准确判断其中相对性状的显隐性关系，及控制该相对性状的基因所在的位置，进而推断出各组亲本的基因型，再依据分离定律解答即可。9、富含纤维素刚果红透明圈直径越大液体显微镜直接计数包埋海藻酸钠可以重复使用，减少投资（稳定性强、操作简便、发酵速度快、生产周期短、酒精得率高）PD-L1（或蛋白PD-L1）脾细胞膜具有流动性聚乙二醇、灭活的病毒、电激等3既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体体外培养注入小鼠腹腔PD-L1（或蛋白PD-L1）【答案解析】

I本题考查纤维素分解菌的分离和培养,要求考生识记分离分解纤维素的微生物的原理,掌握固定化术及优点,能结合所学的知识准确题；Ⅱ本题主要考查人体免疫系统在维持稳态中的作用以及单克隆抗体制备过程,意在考查学生对基础知识的理解掌握,难度适中。据图分析,细胞a是经过抗原免疫的B淋巴细胞,细胞b是骨髓瘤细胞,筛选1是通过筛选得到杂交瘤细胞c(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞),筛选2是选出能够产生特异性抗体的细胞d,然后进行体外和体内培养,分离提取即可。【题目详解】I(1)要筛选出分解纤维素能力较强的菌株,样品最好取自于富含纤维素的土壤。(2)在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌,其中透明圈直径越大的菌落中的菌种分解纤维素能力较强。(3)要扩大培养菌种,应该采用液体培养基。扩大培养后,可采用显微镜直接计数的方法进行计数。(4)固定化细胞一般采用包埋法,常用的多孔性载体有海藻酸钠。在工业生产中使用固定化菌种的优点是:可以重复使用,减少投资、稳定性强、操作简便、发酵速度快、生产周期短、酒精得率高等。Ⅱ(1)由图示可知,以PD-L1作为抗原注入小鼠体内,发生免疫反应后,从小鼠体内的脾脏中提取细胞a。(2)细胞a与b能融合的原理是细胞膜具有流动性,常用的诱导方法有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。经过诱导,两两融合的细胞有3类,即瘤瘤细胞、BB细胞、杂交瘤细胞。(3)细胞d的特点是:既能无限增殖,又能产生专一抗体。可将细胞d通过体外培养或注入小鼠腹腔进行大规模培养。(4)鉴定提取物中是否含有该靶向药物时,可取适量提取物,加入PD-1,观察是否出现凝集沉淀,若出现凝集沉淀,则说明提取物中含有该靶向药物。【答案点睛】分解纤维素的微生物的分离实验的原理①土壤中存在着大量纤维素分解酶,包括真菌、细菌和放线菌等,它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分解为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用,故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中,纤维素分解菌能够很好地生长,其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌。10、E1和E4甲的完整甲与载体正确连接转录翻译细胞核去核卵母细胞核DNA【答案解析】【分析】本题以图文结合的形式综合考查学生对基因工程、核移植等相关知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解核移植技术的过程、基因工程的基本操作程序，特别是明确PCR技术的原理和过程、基因表达载体的组成及其作用、限制酶的作用等相关知识并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题图中提取有效信息进行相关问题的解答。【题目详解】（1）要保证目的基因在受体细胞中能够正确表达，目的基因的首端应有启动子，尾端应有终止子。甲是将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5ˊ末端而获得的L1-GFP融合基因，据此结合题意并分析图示可知：该团队在将甲插入质粒P0时，如果用E2或E3，则目的基因不完整，而使用E1和E4这两种限制酶进行酶切