药物分析总结范文

药物分析总结药物分析是一门研究和发展药品全面质量控制的学科。药品质量标准是药品现代化生产和质量管理的重要组成部分，是药品生产、经营、使用和行政、技术监督管理各部门应共同遵循的法定技术依据，也是药品生产和临床用药水平的重要标志。吸收系数在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度单位液层厚度时的吸收度。杂质任何影响药物纯度，无治疗作用，或者影响药物的稳定性和疗效，甚至危害人们健康的物质。药物的纯度指药物的纯净程度。杂质的限量在不影响疗效、不产生毒性和保证药物质量的原则下，综合考虑杂质的安全性、生产的可行性与产品的稳定性，允许药物中含有一定量的杂质，药物中所含杂质的最大允许量杂质限量（%）=杂质最大允许量/供试品量*100%=标准溶液的浓度*标准溶液的体积/供试品量*100%即L（%）=C*V/S*100%滴定度指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量。准确度指用该法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。精密度指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品经多次取样测定所得结果之间的接近程度，一般用偏差（d）标准偏差（SD）相对标准偏差（RSD）表示。专属性指在其他成分可能存在条件下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。检测限（LOD）是指试样中被测物能被测出的最低浓度或量。定量限（LQD）是指试样中被测物能被定量测定的最低量。线性指在设计的“范围”内，测试结果（响应值）与试样中被测物的浓度或量直接呈正比关系的程度。范围指能达到一定精密度、准确度和线性，测定方法适用的高低限浓度或量的区间。耐用性指在测定条件有小的变化时，测定结果不受影响的承受程度。药学工作者的职责是保证广大人民能使用安全、有效、质量可控的药品。药品质量的内涵包括真伪、纯度和品质的质量要求。药品检验工作的一般程序为取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告。鉴别试验的项目性状、一般鉴别试验、专属鉴别试验。杂质的分类按来源分一般杂质和特殊杂质按来源还可分为工艺杂质，降解产物，试剂中混入的杂质按毒性分毒性杂质和信号杂质按理化性质分有机杂质、无机杂质、残留杂质。药物分析方法验证内容准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。药品质量标准的分类1、国家药品标准2、临床研究用药品质量标准3、暂行或试行药品标准4、企业标准药品质量标准的主要内容1、名称2、性状3、鉴别4、检查5、含量测定6、贮藏选择含量测定方法的基本原则1、原料药（西药）的测定应首选容量分析法。滴定终点的确定，应用适宜的电化学方法确定等当点的变色域，例如酸碱滴定可用电位滴定法。如果无合适的容量分析法可选用时，可选用重量法。如两法均不可取时，可考虑用紫外分光光度法，色谱法或其他方法。2、制剂含量测定应首选色谱法。在色谱法中采用率最高的是HPLC法，而GC法，TLC法则应用较少。当辅料不干扰测定时，也可选用UV法。对于复方制剂常采用HPLC法或GC法。3、对于酶类药品应首选酶分析法，抗生素类药品应首选HPLC法及微生物检定法，放射性药品应首选放射性药品检定法等。4、在上述方法均不适用时，可考虑采用计算机分光光度法。例如VitA的含量测定即采用了三点校正法。使用该法时，对样品的预处理及允许使用该法的条件都做了规定。在严格控制逐项条件的情况下，方可剥壳测定的准确度和精密度。5、对于新药的研制，其含量测定应选用原理不同的两种方法进行对照性测定。然而，有些药品没有合适的含量测定法，对于这类药品应参照《中国生物制品规程》的有关规定进行坚定及试验。常见干扰及排除（一）糖类糖类可能干扰氧化还原滴定。在选择含糖类附加剂片剂的含量测定时，应避免使用氧化性强的滴定剂。同时应用阴性对照品做对照试验，若阴性对照品要消耗滴定剂，说明附加剂对测定有干扰，应换用其他的方法测定。（二）硬脂酸镁硬脂酸镁是常用的润滑剂，其干扰作用可分为两方面，一方面Mg2+可干扰配位滴定法，一方面硬脂酸镁根离子可干扰非水滴定法。若Mg2+有干扰，可以加掩蔽剂掩蔽。若硬脂酸镁根离子有干扰，如果药物是脂溶性的，可采用适当的有机溶剂提取出药物后测定，以排除干扰。也可采用草酸做掩蔽剂消除硬脂酸镁根离子的干扰，也可换用其他方法测定含量。（三）抗氧剂具有还原性药物的注射剂，常需加入抗氧剂以增加药物的稳定性。抗氧剂均具有较强的还原性，当用氧化还原滴定法测定药物含量时便会产生干扰，排除方法有1、加入掩蔽剂2、加酸分解3、加入弱氧化剂氧化4、利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱的差异进行测定（四）溶剂油有的脂溶性药物（如甾体激素类药物）的注射液是用植物油为溶剂配制的。溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响。排除方法有1、有机溶剂稀释法2、萃取法3、柱色谱法。试述药品检验的程序及各项检验的意义药品检验的程序如下①取药，从大量的药品中取出少量样品进行分析，取药的基本原则是均匀、合理；②药物的鉴别，依据药物的化学结构和理化性质进行某些化学反应，测定某些理化常数或光谱特征，来判断药物及其制剂的真伪；③药物的检查，主要进行纯度检查；④药物的含量测定，测定药物中主要有效成分的含量；⑤检验报告的书写，实验数据必须真实，不得涂改。扩展阅读药物分析总结ByBrianWang201*-6-21药物分析总结1，《新修本草》，这是世界上最早的一部药典。2，国家药品（质量）标准是国家对药品质量规格及检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应(经营）、使用、检验和行政、技术监督管理部门共同遵循的法定技术依据。是强制性的法定计术标准。3，药典（Pharmacopeia）国家关于药品质量标准的法典。中国药典（1）新中国药典勤奋严谨建国之后至今共出了八版1953、1963、1977、1985、1990、1995、201*、201*版《药品红外光谱集》另行出版多种配套丛书始分一二两部求实创新4，有英文版出现二部注释选编二部药品名称取消了拉丁名首次收载指导原则分为三部PharmaceuticalAnalysis-201*.2-6201*-6-1865，201*年版主要内容一部中药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂二部化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品三部生物制品（《中国生物制品规程》）6，其他重要规定水浴温度除另有规定外，均指98~100℃室温10~30℃冰浴0℃放冷指放冷至室温阴凉处不超过20℃凉暗处避光并不超过20℃110固体溶质0g或液体溶质0ml加溶剂使成10ml的溶液。溶液的滴20℃时，0ml水相当于20滴恒重供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下。精密称定称取重量应准确至所取重量千分之一。称定称取重量应准确至所取重量的百分之一。约指取用量不得超过规定量的±10%标准品&对照品用于鉴别、检查和含量测定的标准物质，指定单位制备、标定、供应。标准品指用于生物检定、抗生素或生化药品含量或效价测定的标准物质，一般按效价单位ByBrianWang201*-6-21计。对照品一般指化学药品，按百分含量计。空白试验不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果。7，Solubility极易溶解系指溶质1g（ml）能在溶剂不到1ml中溶解；易溶系指溶质1g（ml）能在溶剂1～不到“10ml中溶解；溶解系指溶质1g（ml）能在溶剂10～不到30ml中溶解；略溶系指溶质1g（ml）能在溶剂30～不到100ml中溶解；微溶系指溶质1g（ml）能在溶剂100～不到1000ml中溶解；极微溶解系指溶质1g（ml）能在溶剂1000～不到10000ml中溶解；几乎不溶或不溶系指溶质1g（ml）在溶剂10000ml中不能完全溶解。8，空白试验不出现正反应试剂等不干扰鉴别试验对照试验呈正反应试验条件正常9，药物的杂质检查一、药物的杂质和纯度的概念1，杂质（Impurity，RelatedSubstances，Product-RelatedImpurity）药物中存在的无治疗作用、或影响药物的疗效和稳定性、甚至对人体健康有害的物质。2，纯度（Purity）药物的纯净程度。它是判定药品质量优劣的一个重要指标。对药物纯度的要求是随着生产工艺的改进、变化以及分离分析技术的发展而不断提高、完善的。3，药品质量标准中的杂质不包括变更生产工艺或变更原辅料而产生的新的杂质，也不包括参入或污染的外来物质。二、药物中杂质的来源和分类杂质的主要来源（1）生产过程中引入原料药生产（合成未反应完的原料、反应的中间体、副产物、残留溶剂；提取药物结构、性质相近的物质、残留溶剂）制剂生产*注意生产设备也可能引入杂质（2）贮藏过程中引入受外界条件影响（温度、湿度、光线、空气、微生物）而发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等变化杂质的分类（1）按杂质来源一般杂质和特殊杂质。一般杂质指在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。（2）按杂质结构无机杂质和有机杂质。（3）按杂质性质信号杂质和有害杂质。三、杂质的限量检查1．杂质限量的概念在不影响药物疗效和不发生毒性的前提下，药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几（％）或百万分之几（ppm）来表示。药物中杂质的检查，一般也不要求测定其含量，而只检查杂质的量是否超出限量杂质限量检查（LimitTest)2、杂质限量的计算ByBrianWang201*-6-21100％供试品量标准溶液浓度（C）标准溶液体积（V）＝100％供试品量（S）杂质限量＝杂质的最大允许量LCVS100%示例例对乙酰基酚中的氯化物的检查(p29):已知S=0g25/100；C=10μg/ml；V=0ml求L=？解LCVS100%1002106勤奋严谨25100100%0.01%*注意:单位要统一PharmaceuticalAnalysis-201*.2-701815勤奋严谨例2．葡萄糖中重金属的检查(p30)已知S=0g；C=10μg/ml；L=510-6求V=？解VLSC51060610100(ml)PharmaceuticalAnalysis-201*.2-7018163、一般杂质的检查方法（参考课件）氯化物检查法标准液NaCl标准液硫酸盐检查法标准硫酸钾溶液铁盐检查法盐酸酸性溶液、标准铁溶液硫酸铁铵〔FeNH4(SO4)212H2O〕重金属检查法标准铅溶液硝酸铅、硫代乙酰胺法、炽灼破坏法、硫化钠法、微孔滤膜法CH3CSNH2H2OCH3CONH32H2SByBrianWang201*-6-21砷盐检查法标准砷溶液三氧化二砷H2SPb2PbSHpH5方法第一法(古蔡氏法)、第二法(二乙基二硫代氨基甲酸银法；Ag-DDC法)古蔡法（Gutzeit）加KI和SnCl2目的还原As5+；抑制SbH3生成；形成锌锡齐，使氢气的生成连续均匀。醋酸铅棉花吸收H2S酸碱度检查法溶液颜色检查法第一法目视比色法:标准比色液进行比较的方法第二法分光光度法:规定波长处吸收度值易炭化物检查法澄清度检查法与浊度标准液比浊的进行检查炽灼残渣检查法供试品重目的:控制有机药物和挥发性无机药物中存在的非挥发性无机杂质。炽灼残渣%残渣及坩锅重空坩锅重100%第三法色差计法干燥失重测定法概念:药品在规定条件下,经干燥后所减失的量,以百分率表示；热分析法残留溶剂测定法4，特殊杂质的检查方法原理:利用药物和杂质在物理和化学性质上的差异小结杂质和纯度生产过程来源按来源分分类一般杂质特殊杂质有机杂质按结构分无机杂质信号杂质有害杂质勤奋严谨杂质贮藏过程未反应的原料、中间体、副产物杂质限量最大允许量按性质分L4CVS100%01880PharmaceuticalAnalysis-201*.2-ByBrianWang201*-6-21干燥失重(热分析法)炽灼残碴7008000C有机溶媒残留量勤奋氯化物(Cl-)严加HNO3,避免弱酸银谨硫酸盐(SO42-)溶液澄清度1%硫酸肼+10%乌洛托品一般杂质检查*原理、方法、条件控制加HCl,避免弱酸钡铁盐(Fe3+、Fe2+)加稀HCl,过硫酸铵、硫氰酸铵，与标准对照易炭化物砷盐检查（四种方法）K2Cr2O7、CuSO4、（四种方法）018CoCl2标准比色液PharmaceuticalAnalysis-201*.2-710，巴比妥类药物的分析溶液颜色重金属(Pb2+)检查811结构和性质HN453621勤奋严谨母核巴比妥酸为环状丙二酰脲结构取代基O5,5二取代1,5,5三取代2位硫代ONHR1R2O求区别各种巴比妥药物实创新PharmaceuticalAnalysis-201*.2-7特性,区分其它类药物酸、氧化剂、还原剂不开环水解开环环状结构碱液ByBrianWang201*-6-21有本类药物的结构知其具有弱酸性（1，3位等）、水解反应（碱）、与重金属离子的反应（含有丙二酰脲或酰亚胺结构；与银盐的反应可用于本类药物的鉴别和含量测定）、与香草醛（Vanillin）的反应（丙二酰脲基团中氢比较活泼）、紫外吸收、色谱行为、晶型11，巴比妥类药物鉴别试验丙二酰脲类鉴别反应、测定熔点、利用特殊取代基或元素（利用不饱和取代基的鉴别试验；药典收载的有司可巴比妥钠与高锰酸钾反应，碱性溶液；利用芳环取代基的鉴别试验；硫元素的鉴别试验--区别硫代巴比妥类药物与巴比妥类药物，药典201*对注射用硫喷妥钠的鉴别采用了此法）12，巴比妥类药物（特殊）杂质检查（一）苯巴比妥1）酸度控制副产物苯基丙二酰脲量2）溶液的澄清度控制乙醇不溶性杂质，副反应产物苯巴比妥酸杂质的含量（二）司可巴比妥钠溶液的澄清度司可巴比妥钠极易溶于水，溶液应澄清，否则药物中含有水不溶性杂质13，巴比妥类药物含量测定银量法（与银离子定量成盐）、溴量法（不饱和键）结构和性质有紫外吸收（碱性溶液）硫喷妥钠例外，酸碱性均可小结OR1R2HN453621弱酸性ONH（互变异构）O与重金属离子反应(钴、铜、银、汞盐呈色)水解反应（酰亚胺基团）ByBrianWang201*-6-21司可巴比妥烯丙基的反应（I2或KMnO4）取代基或元素反应苯巴比妥苯环取代基（亚硝酸钠-硫酸、硫酸-甲醛试液）硫喷妥钠硫元素的反应（Pb2+生成PbS）鉴别试验制备衍生物测定熔点司可巴比妥97℃苯巴比妥174℃-178℃硫喷妥钠157℃-161℃丙二酰脲类OR1R2OCCCNAgNHCOR1R2OCCCOAgNCONAg钠盐鉴别（焰色反应）铜盐反应吡啶+铜吡啶试液硫喷妥钠显绿色，其它显紫色或紫色沉淀特殊杂质检查酸度（中间体II的副产物）*司可巴比妥*苯巴比妥中性或碱性物质（中间体I的副产物）溶液的澄清度中性或碱性物质苯巴比妥含量测定银量法电位法指示终点司可巴比妥溴量法淀粉指示剂硫喷妥钠UV法304nm（对照品硫喷妥）（注射用）14，芳酸及其酯类药物的分析14-1结构性质重点阿司匹林（aspirin）14-2鉴别试验1）与铁盐的反应紫色配合物ByBrianWang201*-6-211-1）水杨酸及其盐COOHCOOO6NH2OHFe23Fe+4NH2+12HClCH3O1-2）氯贝丁酯生成羟肟酸铁配位化合物；该反应多用于羧酸及其酯类的鉴别CH3ClOCCOOC2H5CH3NH2OHHClKOHClOCCCH3NHOK氯贝丁酯H+CH3ClOCCCH3OFe3+NHO3/Fe3）重氮化-偶合反应具有芳伯氨基（或潜在；贝诺酯），加酸水解后产生游离的芳伯胺基，在酸性溶液中，与亚硝酸钠试液进行重氮化反应，生成重氮盐，再与碱性β-萘酚偶合生成橘红色沉淀。4)水解反应14-3特殊杂质检查1-1）阿司匹林中特殊杂质检查可能杂质合成过程中未反应完的酚类，生成的副产物苯酚、醋酸苯酯、水杨酸苯酯、乙酰水杨酸苯酯，乙酰化不全产生的水杨酸；等贮藏中阿司匹林水解产生的水杨酸1-2）检查a.溶液的澄清度阿司匹林溶于碳酸钠溶液，杂质不溶b.游离水杨酸水杨酸氧化生成的一系列醌类有色杂质对人体有害；水杨酸可在弱酸性溶液中与高铁盐反应而成紫堇色，而阿斯匹林（无游离酚羟基）不发生该反应。c.易碳化物检查易被硫酸碳化显色的低分子有机杂质2-1）对氨基水杨酸钠中特殊杂质检查间氨基酚2-2）检查方法2-2-1双相滴定法药典201*利用间氨基酚易溶于乙醚，而对氨基水杨酸钠不溶于乙醚的特性，用乙醚提取分离杂质后，乙醚提取液中加入适量水和指示剂，用盐酸滴定，以消耗一定量盐酸滴定液来控制其限量。该法为双相滴定法，所生成的盐酸盐在乙醚中不溶，而转溶入水相中。ByBrianWang201*-6-212-2-2HPLC3-1）氯贝丁酯中特殊杂质检查对氯酚14-4含量测定一、酸碱滴定法直接滴定法、水解后剩余滴定法、两步滴定法二、亚硝酸钠滴定法芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性水溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点。三、双相滴定法四、高效液相色谱法小结异羟肟酸铁反应UV法IR法FeCl3反应（pH6）含酚羟基或苯甲酸类鉴别试验显色、沉淀、光度法水解产物反应（如苯甲酸盐、丙磺舒）水解反应（芳酸酯类）重氮化-偶合反应1)HCl,NaNO2,2)碱性-萘酚生成有色物或(贝诺酯）亚硝酸钠滴定法酸碱滴定法1)直接滴定法（ASA原料、苯甲酸等）2)水解剩余滴定法(ASA原料、羟苯乙酯)3)两步滴定法(ASA片和肠溶片、氯贝丁酯)（芳伯胺或芳仲胺类药物、如对氨基水杨酸钠）HCl含量=双相滴定法（苯甲酸钠）HPLC法（制剂）消除杂质、辅料和添加剂的干扰乙醚层水层紫外分光光度法（直接、离子交换、柱分配色谱）ByBrianWang201*-6-2115，胺类药物的分析芳胺类药物OH2NCOCH2CH2NC2H5HClC2H5盐酸普鲁卡因注射液OHO扑热息痛NHCCH3如R=H，则有重氮化-偶合反应易水解（OH-）OR1HNCOR2弱碱性有UV吸收R3OR1R4NHCR2易水解，生成Ar-NH2如R1=OH，则与FeCl3呈色反应弱碱性与重金属离子反应生成ByBrianWang201*-6-21水解产物反应OH2NCOCH2CH2NC2H5C2H5OH-HClH2NCOONa+HOCH2CH2N(C2H5)2HClH2NCOOHHClHOOCNH2IR法Ar-NH2重氮化-偶合反应1)HCl,NaNO2,2)碱性-萘酚鉴别试验Ar-OH，FeCl3呈色反应Ar-NH-CO-R，Cu2+或Co2+反应(颜色)Ar-CONHR，羟肟酸铁反应（H2O2,FeCl3）HClUV法制备衍生物测熔点盐酸普鲁卡因胺因其分子结构中具有芳酰胺结构，可被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁形成配位化合物羟肟酸铁。杂质检查对氨基酚（合成过程或储藏不当而引入）加甲醇和碱性亚硝基铁氰化钠(蓝色配位化合物)，比色对照即可。OH2NCOCH2CH2NC2H5OHONHCCH3加乙醇应澄清；比色检查颜色中间体、副产物、分解产物等TLC检查扑热息痛C2H5HCl易水解产生杂质H2NCOOH盐酸普鲁卡因注射液TLC检查ByBrianWang201*-6-21荧光法HPLC法Ar-NH2或Ar-NHR加HCl,NaNO2,永停法亚硝酸钠滴定法比色法含量=？测定条件a.加KBr加快反应b.过量HCl加快反应c.(10~300C)滴定d.滴定管尖端插入液面下约2/3处e.永停法或外指示剂法UV法非水溶液滴定法（冰醋酸溶解；高氯酸滴定；结晶紫指示剂；盐酸盐加醋酸汞）a.Hg(Ac)2b.醋酐，使突跃敏锐苯乙胺类药物手性碳有旋光性弱碱性**R1CHOHCHR3NHR2如R1为酚类，易氧化变色，与重金属离子络合。要求记忆肾上腺素、盐酸多巴胺、盐酸去氧肾上腺素CHOHCHNH2CH3CH2CHNHCH3CH3甲基苯丙胺（MATM）“冰毒”苯丙醇胺“PPA”ByBrianWang201*-6-21R-NH2专属反应，亚硝基铁氰化钠、丙酮、碳酸氢钠呈红紫色Rimini试验（亚硝基铁氰化钠反应）具有酚羟基者FeCl3呈色反应鉴别试验甲醛-硫酸反应UV法I2或H2O2等氧化剂（定性）酮体UV法杂质检查相关物质TLC双胍检查纸色谱法非水滴定法（4）HPLC法加过量溴反应，以碘量法测定剩余溴荧光法（肾上腺素）含量=？溴量法（盐酸去氧肾上腺素，一分子消耗三分子溴）提取酸碱滴定法+-供试品H或OH溶剂提取标准酸滴定比色法中性乙醇溶解ByBrianWang201*-6-21提取酸碱滴定法本法是依据本类药物的盐酸盐或硫酸盐可溶于水，而药物本身为游离碱不溶于水，可以溶于有机溶剂的一般通性进行的。常用的方法是，将供试品溶于水或矿酸中，加入适量的碱性试剂使药物游离后，用适当的有机溶剂提取。提取液蒸干，残渣加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定；或在提取液中加过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴。（关键词溶解性差异，碱化，提取，滴定）氨基醚衍生物类药物（盐酸苯海拉明和茶苯海明）非水滴定法HCOCH2CH2NCH3XCH3X=HCl，盐酸苯海拉明HPLC法含量=？银量法阴离子表面活性剂滴定法（盐酸苯海拉明注射液）供试品H+磺基丁二酸钠二辛酯试液滴定有色物二甲基黄指示剂酸性染料比色法（盐酸苯海拉明原料）与溴甲酚绿结合成有色的配位化合物，即离子对，可溶于氯仿中，产生有色的溶液，可在415nm处比色测定，对照品比较法计算含量终点绿色变红灰色15，杂环类药物的分析OCNHNH2N异烟肼(isoniazid)ByBrianWang201*-6-21OCNNC2H5C2H5尼可刹米(nikethamide)分解产物反应加NaOH或HCl生成气体UVKoenig反应（戊烯二醛反应）尼可刹米；苯胺有色schiff碱（染料）鉴沉淀反应加Hg2+、Cu2+形成沉淀加CNBr、苯胺别试验Vongerichten反应加2,4-二硝基氯苯、乙醇、氢氧化钾二硝基氯苯反应（紫红色）缩合反应（肼类）加香草醛、乙醇，结晶测熔点还原反应（肼类还原性）AgNO3+NH3H2O银镜反应有关物质检查异烟肼中游离肼尼可刹米中的杂质(TLC高低浓度对照法)先用甲醇配制供试品溶液浓度为40mg/ml,再稀释成0.4mg/ml和0.04mg/ml对照液(1)和(2)，三者同时点样，如有杂质斑点，与(2)比较主斑点，不得更深；如有1个超过时，应不深于对照溶液(1)的主斑点。TLC法UV法比浊法加水杨醛乙醇液HPLC法非水滴定法溴酸钾法甲基橙指示剂UV法含量=？碘量法加过量I2,再用Na2S2O3滴定之溴量法加过量Br2，再用I2标准液滴定之ByBrianWang201*-6-21吩噻嗪类能与Pd2+络合呈色UV、IR特征吸收SNR1R2易氧化呈色通常是CH2CH2N(CH3)2NN通常是-H、-Cl、-CF3-COCH3、-SCH2CH2N根据分解产物反应如何鉴别？加PdCl2呈红色UVIR加硫酸、硝酸或双氧水等呈色铈量法H+介质，硫酸铈滴定含量测定非水滴定法冰醋酸溶剂、高氯酸滴定剂比色法a.pH1加Pd2+,max=500nm,测Ab.HCl、FeCl3，max=530nm,测AUV法苯骈二氮杂卓类药物（镇静剂）地西泮（安定）(diazepam)ByBrianWang201*-6-21酸性染料比色法酸性染料比色法是利用碱性药物，在一定的PH条件下，可与某些酸性染料结合显色，而进行分光光度法测定药物含量的方法。（P229）酸性染料比色法(Acidicdyescolorimetry)一.定义有机药物与酸性染料定量地结合成有色络合物，在一定波长处测定此溶液有色离子对的吸收度，即可求出其含量。二.酸性染料具备条件A.在有机相中溶解度要大；B.颜色要深；C.有机相中离子对有足够的稳定性。三.最佳条件最佳的pH值、合适的溶剂、有机相中应脱水。常用染料甲基橙、溴甲酚绿(BCG)、溴百里酚蓝(BTB)溴酚蓝(BPB)、溴甲酚紫(BCP)、苦味酸(PA)等16，生物碱类药物的分析7显色反应沉淀反应UV、IR特征吸收大多数为晶形固体部分为液体大多数为白色固体，溶解度(Solubility)生物碱性质规律酸碱性A.酸性生物碱OH3CNHNOHONNCH3NNCH3少数为黄色(小檗碱、蛇根碱)具有旋光性(opticalrotation)B.两性生物碱既有Ar-OH或－COOH也有NC.碱性生物碱在N原子周围有供电子基团，则碱性增强；反之减弱。季铵碱>叔铵碱>仲铵碱>酰铵碱ONCH3N如吗啡等ByBrianWang201*-6-21鉴别试验TLCHPLC测熔点法一般鉴别IRUV法(特征吸收)显色反应(加H2SO4和HNO3)沉淀反应(加碘化铋钾、碘化汞钾等生成沉淀)Marquis反应加甲醛－硫酸试液显色(酚羟基-异喹啉生物碱)紫脲酸铵反应咖啡因+HCl+KClO3残渣遇氨气显紫色加NaOH紫色消失Vitaili反应绿奎宁反应二盐酸奎宁+Br2+NH3产生翠绿色发烟HNO3+C2H5OH+NaOH显深紫色双缩脲反应(芳环侧链具有氨基醇特征反应)特殊鉴别CuSO4+NaOH显蓝紫色ByBrianWang201*-6-21含量测定(Assay)GC法非水滴定法BH+A-+HClO4BH+ClO4-+HAUV-Vis法硫氰酸铬铵法HPLC法含量＝提取酸碱滴定法供试品溶于水或稀矿酸碱性试剂酸性染料比色法生物碱游离生物碱有机溶媒提取a蒸干B+H+BH+BH++In-(BH+In-)水相有机相b蒸干过量酸溶解碱返滴定无水Na2SO4脱水c加过量酸碱滴定有机溶媒(BH+In-)有机相中性乙醇溶解测A值(>400nm)酸直接滴定硫氰酸铬铵法(Ammoniumthiecyanochromaticmethod)BH++Cr(NH3)2(SCN)4--BHCr(NH3)2(SCN)4溶于丙酮中碱性酒石酸钾钠加热水解(2)银量法释放出SCN-(1)灼烧法Cr2O3硫酸阿托品、硝酸士的宁、金雀花碱、举例马前子碱、喹啉生物碱等ByBrianWang201*-6-2117，维生素类药物的分析VB1（水溶性）维生素B1（vitaminB1），又称盐酸硫胺（thiaminehydrochloride）-季铵化合物的盐酸盐。性状、溶解性白色结晶或结晶性粉末，干燥品在空气中可迅速吸收4%的水分。在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶。水溶液显酸性。氨基嘧啶环噻唑环结构和性质碱性N原子嘧啶环噻唑环盐酸盐鉴别试验沉淀反应UV硫色素反应氯化物反应含量测定非水溶液滴定法(原料)硅钨酸重量法(原料)紫外分光光度法(制剂)硫色素荧光法(体液)噻唑环上含有S元素硝酸铅反应ByBrianWang201*-6-21硝酸铅反应、氯化物反应ByBrianWang201*-6-21VC（水溶性）HOHCH2OH6C5OHO41O32OHL-抗坏血酸C6H8O6=1713维生素C（vitaminC），又称抗坏血酸，在化学结构上和糖类十分相似，有四种光学异构体（两个手性碳C4/C5），其中以L构型右旋体的生物活性最强。中国药典及美、英、日、等国药典收载的均为L-抗坏血酸（L-ascorbicacid）。酸性分子结构中二烯醇基，尤其是C3-OH，受共轭效应的影响，酸性较强（pK1=17）；C2-OH的酸性极弱（pK2=157），故维生素C一般表现为一元酸，能与碳酸氢钠作用生成钠盐。（注如图，α，β-不饱和酮结构，在电荷的分布上，表现为氧负-吸电子效应，1正，2负，3正，电荷正负交替，因此3位带正电荷，表现出强的吸电子性，故呈现酸性，2位反之）还原性分子结构中的二烯醇基具极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢维生素C，加氢又可还原为维生素C。在碱性或强酸性溶液中进一步水解为2,3-二酮古洛糖酸而ByBrianWang201*-6-21失去活性（内酯环开环水解）。[维生素C与碳酸钠可生成单钠盐，与氢氧化钠作用，内酯环水解生成酮酸盐。]鉴别试验硝酸银反应、2，6-二氯靛酚钠反应----利用了VC的还原性鉴别试验利用维生素C具糖类性质的反应维生素C三氯醋酸或盐酸水解、脱羧吡咯、加热至50°C蓝色具体反应式见本科讲义戊糖失水糖醛紫外分光光度法维生素C在0.01mol/L盐酸中，在243nm处有唯一的最大吸收鉴别本法在BP（1993）采用，并规定吸收系数应为545~585。红外分光光度法含量测定---维生素C具有较强的还原性碘量法2,6-二氯吲哚酚法ByBrianWang201*-6-21直接碘量法（原料药、制剂）原理（还原性）:CH2OHHCOHOOOOCH2OHHCOHOO+I2H++2HINaOOH问题应用:(简便、快速)加稀醋酸的目的减慢氧化中国药典测维生素C及其制剂含量为什么加新沸过的冷水减少溶解氧的影响美、英、日等国均采用碘量法终点如何判断溶液呈蓝色并30s内不褪测定维生素C的含量注射剂测定前加丙酮的目的消除注射剂中抗氧剂亚硫酸氢钠对测定的影响（注亚硫酸氢钠可与羰基进行加成反应）VA（水不溶）维生素A1（视黄醇，retinol），中国药典收载的维生素A为全反式维生素A醋酸酯的精制植物油溶液。性质性质溶解性:维生素A能与氯仿、乙醚、环己烷、石油醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。易氧化变质:维生素A中有多个不饱和键性质不稳空气中氧或氧化剂紫外光裂解定（如果在加热和金属离子存在更易氧化变质）生成无活性的环氧化物维生素A醛及维生素A酸。紫外吸收性质:结构中共轭多烯醇侧链，325nm~328nm有强烈最大吸收。呈色反应:维生素A在氯仿中与三氯化锑试剂作用不稳定的蓝色。ByBrianWang201*-6-21鉴别试验三氯化锑反应（Carr-Price反应）---维生素A和亲电试剂氯化高锑（V）作用形成不稳定的正碳离子,显蓝色。反应在无水、无醇条件下进行。紫外吸收光谱薄层色谱含量测定生物学方法（最初）三氯化锑比色法（目前强化食品或饲料）专属性差呈色极不稳定维生素A+三氯化锑（无水氯仿）紫外分光光度法（目前各国药典）操作烦琐、费时方法准确度与重现性较差325~328nm最大吸收蓝色（618~620nm最大吸收）测维生素A含量含量测定注意溶剂不同max、E不同VE（水不溶）维生素E（vitaminE）α-生育酚（tocopherol）及其各种酯类。中国药典收载的维生素E为消旋-α-生育酚醋酸酯（dlαtocopheryl），收载的制剂有粉剂、片剂、注射剂、胶丸。维生素E（vitaminE）苯并二氢吡喃(色满醇)衍生物,苯环上有一个乙酰化的酚羟基H3CCH3OCO7CH38O1CH3231"3"CH3CH3CH35"7"9"11"13"CH3654结构决定性质1）长的烷基链决定其水不溶性2）苯环决定其紫外吸收性3）乙酰化的酚羟基水解后体现出酚类易被氧化的性质25CHByBrianWang201*-6-21鉴别试验硝酸反应酸性水解再氧化酚羟基三氯化铁反应碱性水解再络合酚羟基紫外光谱0.01%无水乙醇液在波长284nm处有最大吸收,在波长254nm处有最小吸收.薄层色谱法薄层板:硅胶G薄层板展开剂:环己烷-乙醚(4:1)显色剂:硫酸结果:α生育酚、α生育酚醋酸酯、α生育醌的Rf值分别为0.5、0.7、0.9。HPLCIR杂质检查酸度（制备过程中引入的游离醋酸）生育酚（乙酰化不完全）中国药典采用硫酸铈滴定法检查维生素E中的游离生育酚，限量为15%。原理游离生育酚具强还原性，可被硫酸铈定量氧化，用消耗硫酸铈滴定液的体积控制游离生育酚的限量。显色剂二苯胺（此反应可用于含量测定）正己烷（残留溶剂GC-FID、HP-5、外标法）含量测定利用水解产物游离生育酚易被氧化的性质铈量法将铁(III)还原为铁(II)后，与不同试剂生成配位化合物进行比色测定。硝酸氧化、邻苯二胺缩合测定荧光。高效液相色谱法日本药局方色谱柱id4mm，长15~30cm的不锈钢柱。固定相ODS流动相甲醇-水（49:1）检测器紫外检测波长292nm分离度应大于6(生育酚与其醋酸酯)精密度峰高的相对标准偏差应小于0.8%(n=3)气相色谱法简便快速、专属性强。各国药典多采用，适于VE尤其制剂测定。载气氮气固定相硅酮（OV-17）柱温265°C检测器FIDByBrianWang201*-6-2118，甾体激素类药物（steroidhormonedrugs）的分析是指分子结构中含有甾体母核的激素类药物。分子结构中均具有环戊烷并多氢菲母核，是临床上较为重要的一类药物。环戊烷并多氢菲母核21112CC181321201*C119D16910141537564分类肾上腺皮质激素（皮质酮的衍生物）皮质酮CHOH2A8BOHOCOH主要结构特征（1）A环的C3上有酮基；C4/C5间有双键，并与C3酮基共轭，称为，-不饱和酮，标记为4-3-酮。（2）D环的C17上有-醇酮基（-ketol）侧链（）。（3）合成甾体抗炎药在结构上多具有C1/C2间双键；C6-、C9-卤素；C16-羟基、甲基；C17-羟基等取代基。如地塞米松磷酸钠、醋酸氟轻松。OCCH2OH雄性激素与蛋白同化激素睾酮（睾丸素）衍生物可供分析主要结构特征A环的△4-3-酮结构ByBrianWang201*-6-21OH睾丸素O雌激素雌激素雌二醇及其C17-羧酸酯类戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇C17-乙炔基衍生物炔雌醇、炔雌醚、尼尔雌醇OHOHCCHHOHO（VII）雌二醇estradiol（VIII）炔雌醇ethinylestradiol可供分析结构特征（1）A环苯环，具有C3-酚羟基；（2）D环的C17上具有-乙炔基。孕激素孕激素（黄体激素）黄体酮及其衍生物如己酸羟孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮CH3COO（IX）黄体酮progesterone可供分析结构特征（1）A环具有4-3-酮结构O（2）D环的C17上有甲酮基（ketone）侧链（CCH328）ByBrianWang201*-6-21其它中国药典收载的口服避孕药炔诺酮及衍生物如炔孕酮、炔诺孕酮、左炔诺孕酮CCHOH（X）炔诺酮norethisteroneO结构特征在结构上具有上述各类性激素的特征（1）A环具有4-3-酮结构（皮质激素、雄性激素、孕激素类）（2）D环的C17上多具有-炔基（雌激素类）（3）C10上多无19-角甲基（雌激素类）鉴别试验与强酸的呈色反应甾体母核反应机理△4-3-酮浓硫酸质子化正碳离子（共轭体系）显色官能团的反应酮基的反应-----羰基试剂C17-α-醇酮基的反应------α-醇酮基（还原性）甲酮基或活泼亚甲基的反应----与羰基相连的碳上有活泼氢酚羟基的反应-------酚羟基临位活泼易被取代氟元素的反应乙炔基的反应-------端基炔的重金属反应测定衍生物熔点酯类的反应紫外分光光度法红外分光光度法各国药典收载的甾体激素类药物，几乎都采用红外光谱作为鉴别方法之一。薄层色谱法高效液相色谱法---中国药典采用HPLC鉴别醋酸氟轻松软膏（字写得不对？氢？）等十余个品种。特殊杂质检查其他甾体ByBrianWang201*-6-21薄层色谱法方法主成分自身对照法（高低浓度对照法）即将供试品制成高、低二种浓度的溶液。高浓度溶液作为供试溶液；低浓度作为对照溶液。判定法供试溶液图谱中杂质斑点的数目和颜色与对照溶液图谱的主斑点进行比较，即通过杂质总数和各单一杂质的量进行控制。检查示例醋酸氟轻松中其他甾体的检查薄层板硅胶G结果判断供试品溶液如显杂质斑点，不展开剂氯仿-甲醇（97:3）得多于2个，其颜色与对照显色剂四氮唑蓝溶液的主斑点比较，不得更深。阅读材料pdf甾体总结19，抗生素类药物的分析β-内酰胺类抗生素化学结构典型药物的结构青霉素族和头孢菌素族基本结构青霉素族CH3SHN65头孢菌素族HNS7RCO123A7BCH3COOHRCO6123N4A8B4N5O侧链母核（6-氨基青霉烷酸）（6-aminopenicillanicacid，6-APA）A-内酰胺环B氢化噻唑环CH2R1OCOOH侧链母核（7-氨基头孢烷酸）（7-aminocephalosporanicacid，7-ACA）A-内酰胺环B氢化噻嗪环ByBrianWang201*-6-21青霉素类和头孢菌素类理化性质青霉素PenicilinsOSHN*(2)旋光性CH3O头孢菌素CephalosporinsSRC6A*14B5N23*CH3RCHN**1654COOH78ANB23CH2R"7OCOOHO(3)如有共轭系统则有UV吸收，否则没有(1)强酸性（4）-内酰胺环的不稳定性(3)UV吸收鉴别试验UV、IR、NMR光谱法呈色反应羟肟酸铁反应类似肽键反应a.茚三酮反应b.裴林试剂反应其它呈色反应a.重氮苯磺酸b.变色酸-硫酸c.H2SO4-HNO3d.铜盐焰色反应(钠、钾盐)色谱法TLC、HPLC鉴别试验沉淀反应A.在稀盐酸中生成白色沉淀B.重氮化-偶合反应或与三硝基苯酚反应(结晶析出)ByBrianWang201*-6-21呈色反应羟肟酸铁反应RCOHNNOSCH3CH3COOHH2NOH.RCOHNOCNHOHNHSCH3CH3COOHHCl醇制KOHH+RCOHNOCNHFe/3ONHSCH3CH3COOHFeNH4（SO4）2(红色)(4)HPLC法(1)碘量法青霉素或头孢菌素分子不消耗碘,其降解产物消耗碘-水解A.OH含量=B.pH温度在24260C(2)电位滴定法（汞量法）(青霉素类化合物的碱性水解产物可与Cu2+或Hg2+形成稳定的络合物)。Hg(NO3)2滴定剂(3)UV-Vis法A.硫醇汞盐法B.酸水解法C.羟肟酸比色法(与羟胺作用,在稀酸或中性溶液中加Fe3+)生成红色络合物,测AByBrianWang201*-6-21氨基糖苷类抗生素（Aminoglycosidesantibiotics）鉴别试验色谱法TLC、HPLC茚三酮反应莫利西试验（MolishTest）一般鉴别试验硫酸盐反应鉴别试验光谱法UV、IR呈色反应N-甲基葡萄糖胺反应(Elson-MorganTest)麦芽酚反应(链霉素特有反应)(MaltolTest)坂口反应(链霉胍特有的反应)(SakaguchiTest)特殊杂质检查1、链霉素中链霉素B的检查TLC法2、硫酸奈米替星中有关物质检查TLC法3、庆大霉素C组分检查HPLC法4、硫酸盐测定EDTA滴定法ByBrianWang201*-6-21四环素类TetracyclinesantibioticsR78DR"R""R"""HCH3NCH3OH6C5B4A结构特点具有氢化四骈苯环两性化合物32910OH11O12OHOH1OCONH2旋光性紫外吸收和荧光特性稳定性A.易氧化B.差向异构化反应C.降解反应D.与金属离子反应殊杂质检查A.有关物质B.UV法C.残留溶剂含量测定鉴别试验A.微生物检定法B.比色法max440nmC.HPLC法A.浓H2SO4呈色B.FeCl3呈色C.AgNO3白色沉淀D.UV吸收E.荧光法F.TLCG.HPLC大环类酯类抗生素OH3C9108711OHCH3OHH3CC2H5OHCH3HOROHCH3NCH31213O65H3CCH34123H个内团本糖酯的类基苷糖抗组元苷生成部结素。分构为和由多至大官少环能一OOHCH3OCHOCH3HHOH3OH,CH3ByBrianWang201*-6-21TLC、HPLC大环内酯类杂质检查抗生素鉴别试验微生物法、TLC、HPLC、UV法等含量=UV法硫酸显色红棕色20，药品质量标准的制订（阅读）21，中药制剂分析概论（阅读）1）中药制剂分析特点①化学成分多而复杂②质量受多种因素影响③易吸潮、染菌、有效成分常不稳定④有效成分含量一般较低IR法Molish反应(糠醛）中药制剂分析的一般程序取样(Sampling)原则(根据目标成分的理化性质或根据剂型而定)提取方法Extraction纯化Purification一般杂质冷浸萃取回流超声波超临界提取(SFE)萃取、柱色谱法①灰分(总灰分和酸不溶性灰分)②重金属③砷盐④残留农药⑤微生物细菌样品溶液的制备(Preparationofsamplesolution)定性分析(Qualitativeanalysis)检查(Detection)杂质检查特殊杂质定量分析(Quantitativeanalysis)2）35制剂要求的检查项目ByBrianWang201*-6-21⑥检测成分尽量与中医用药功能主治相近⑤所测成分应归属于某单一味药⑦如确定无法进行含量测定的，可选适当溶剂，测定浸出物含量①先选君药或贵重药含量测定项目选定②如君药无法测定，再选臣药③有效成分或指标成分清楚的，可以测定其含量④成分类别清楚的，可测定某一类总成分的含量，如总黄酮、总生物碱、总皂苷等22氮测定法及其应用凯氏定氮法共分三步破坏、蒸馏、测定一.破坏（消化、消解、分解）H2SO4(NH4)2SO4含氮药物使破坏加速、完全法（1）加硫酸盐提高破坏温度（2）加辅助氧化剂H2O2(30%),HClO4(小心！),CuSO4,HgSO4,MnO2等ByBrianWang201*-6-21二.蒸馏装置严密防止爆沸硫酸和甲基红蒸馏1hr左右H3BO3三.测定因H3BO3是极弱的酸（Ka1=310-10）,只起固定NH3的作用，而不干扰测定。NH3+H3BO3NH4BO2+H2ONH4BO2+HCl+H2OH3BO3+NH4Cl（1）常量法(供试品100mg或10ml以上,约相当于含氮量20~30mg)（2）半微量法(供试品10~100mg或1~10ml,约相当于含氮量1~2mg)（3）甲醛法4NH4++6HCHO(CH2)6N4+4H++6H2OH++OH-H2O37氮的测定方法ByBrianWang201*-6-2123，药物制剂分析片剂的分析崩解时限常规分析项目外观、色泽和硬度溶出度/释放度片剂检查特殊检查含量均匀度重量差异平均重量0.30g以下0.30g或以上重量差异限度±5%±0%？包衣片注意做含量均匀度检查的药物，不再做重量差异检查注意做溶出度/释放度检查，不再做崩解时限滑石粉、硫酸钙（过滤）片剂含量测定中常见赋形剂的干扰硬脂酸镁Mg2+干扰配位滴定法(pH10加NH4F掩蔽剂)硬脂酸根离子干扰非水滴定法(提取分离、碱化后提取分离)水糖类解后淀粉均糊精生蔗糖成乳糖葡萄糖干扰氧化还原滴定(应避免使用氧化性滴定剂，并用阴性对照品作对照试验)苯甲酸盐CMC-NaPVP等干扰非水滴定，消耗HClO4使测定结果偏高ByBrianWang201*-6-21注射剂的分析分析基本步骤观察色泽、澄明度，进而鉴别试验，pH检查和含量测定热原或细菌内毒素检查pH值检查注射剂一般检查无菌检查可见异物检查注射液装量检查，（使用干燥注射器）注射用无菌粉末的装量差异溶剂水提取或蒸发后再测定溶剂油（脂溶性药物）空白油对照法和有机溶剂稀释法渗透压调节剂（等渗溶液）避免NaCl的干扰注射剂附加成分干扰及排除抑菌剂苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等提取分离或利用UV图谱差异抗氧剂(Na2SO3,NaHSO3,Na2S2O3,ViC等)加丙酮或甲醛掩蔽加HCl（SO2)加H2O2,HNO3等提取分离法UV图谱差异助（增）溶剂pH值调节剂ByBrianWang201*-6-21例.复方新诺明片分析(SMZ和TMP双波长分光光度法)SMZA257A304STST复方制剂分析ASMZA257A304SMZSMZA257A304TMPTMP287304max257A304TMPA257TMP（？）ppt计算题（阅读）24，药物现代仪器分析法药物现代仪器分析法色谱法场流分离技术(FFF)光谱法药物现代仪器分析法微型全分析系统(Lab-on-a-chip)质谱法(MS)毛细管电泳法联用技术ByBrianWang201*-6-2125，供试品前处理与测定方法效能指标（阅读）---对最后大题的思路有一些启示26，糖类及苷类药物的分析FIA法HPLC法旋光度测定法(Polarimetry)GC法药用糖类含量=折光率测定法(Refractometry)剩余碘量法比色法糖分子中的醛基或酮基对发色试剂如铜盐、汞盐、银盐、四氮唑盐等的还原作用高碘酸盐氧化法乳糖的杂质检查加硝酸汞试液不得有白色絮状沉淀,否则表明有蛋白质杂质杂质检查葡萄糖注射剂的杂质检查酸度、氯化物和硫酸盐乙醇溶液的澄清物亚硫酸盐与可溶性淀粉ByBrianWang201*-6-21鉴别实验1）灼烧实验2）Molish反应3）Fehling和Benedict反应4）三氮唑衍生物试验5）Barfoed反应6）Saliwanoff反应7）比旋度法8）TLC法27，生化药物和基因工程药物分析简介（自己掌握）28，大题的想法（仅供参考）1）第一种大题（即需选一种方法，但要深入）解决策略以通法为主，首先是分析方法的选择，需对几个特别通用的方法进行深入学习，举例HPLC（可用于定量、定性、含量测定）所用的色谱柱首选通用柱十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）、硅胶、氨基硅胶三种。（老师出题一般不会超过常用范畴）。但一定需分清楚正相还是反相键合相色谱---反键合相色谱法采用非极性键合相为固定相，如十八烷基硅烷（应用最广泛）；氰基键合相（正相）是质子受体，对双键异构体或含双键数不同的环状化合物有较好的分离能力；氨基键合相（正相）上的氨基可与糖分子的羟基选择作用，在糖的分离中广泛应用。流动相中水相的pH应维持在2～8，否则会引起硅胶溶解。检测器首选可见-紫外检测器。定量方法可用归一化法或标准品对照法，但尽可能选用内标法在反相键合相色谱中，由于固定相是非极性的，所以极性弱的溶剂洗脱能力强；例以ODS为固定相的反相色谱中，甲醇的洗脱能力比水强。对于结构鉴定，还是以结构决定性质进行分析，潜在的基团（如芳伯胺等）需认真对待，芳伯基的重氮化反应，肽键类似物的茚三酮反应，酰胺键/羧酸等的羟肟酸铁反应，红外，紫外，TLC，HPLC等等对于杂质限量检查，还是以结构决定性质为主，杂质的来源有合成过程，仪器设备，制剂过程等等，然后进行结构的分析，除了化学方法外，TLC的高低浓度对照法，HPLC等通用方法需懂一些，以便不会20分大题空白。如果是要做质量标准的制定，内容一定要了解。例如1，名称2，性状3，鉴别4，检查5，含量测定6，贮藏建议拿药典自己看看，大体内容及方法。2）需要给出更多的方法，其实还是以通法为主，红外，紫外，TLC，HPLC，核磁，容量分析（原料药）,然后对结构进行分析，进行专有反应的选择。仅供参考，大家加油,祝考好～～BrianWang友情提示本文中关于《药物分析总结》给出的范例仅供您参考拓展思维使用，药物分析总结该篇文章建议您自主创作。药物分析学相关知识点总结药物分析学相关知识点总结国务院药品监督管理部门颁布的《中华人民共和国药典》（缩写Ch.P）和药品标准为国家药品标准。中国药典(195319631977198519901995201*201*201*)USPNFJPPh.EurPh.IntGLPGSPGMPGCP药典概况真伪、纯度、品质的质量要求，三者集中体现药物的有效性和安全性。中国药典的内容包括凡例、正文、附录、索引。乙醇未指明溶度时，均系95%（ml/ml）的溶液液体的滴数，系在20℃时，以0ml水进行换算。称取0.1g系指称取重量在0.060.14g，称取2g系指称取重量在5---5；称取0系指称取9505；称取00系指称取995---005。精密称定系指精确至千分之一，称定系指精确至百分之一，约/若干系指不超过±10%。除另有规定外，实验时的温度均指25±2℃。实验用水除另有规定外，均系指纯化水；酸碱度检查所用水，均系指新沸并放冷至室温的水。酸碱实验时，如未指明用何种试剂，均系指石蕊试纸。正文品种按中文笔画编排；附录包括制剂通则、通用检测方法、和指导原则，按分类编码。除另有规定外，水溶液的PH值应以玻璃电极为指示电极、饱和甘汞电极为参比电极的酸度计进行测定。酸度计应定期进行检定。鉴别是用来判定药物的真伪，而检查和含量测定则可用来判定药物的优劣。药物的鉴别实验性状(一般用于原料药的鉴别项目)外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、吸收系数）比旋度药物通过1dm且每1ml中含旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度为比旋度吸收系数在给定的波长、溶剂和温度等的条件下测得的吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。一般鉴别实验只能证实是某一类药物，而不能证实是某一种药物。有机氟化物氧瓶燃烧法进行破坏后，加茜素氟蓝试液、硝酸亚沛在PH3溶液中形成蓝紫色络合物。水杨酸盐与三氯化铁试液生成配位化合物，在中性时显红色，弱酸性时紫色。加稀盐酸，析出白色沉淀；分离，白色沉淀在醋酸铵试液中溶解。酒石酸（C4H6O6）盐中性试品，加氨制硝酸银试液数滴，置水域中加热，银游离并附着在试管内壁成银镜。芳香第一胺类加亚硝酸钠和碱性β-奈酚试液数滴（重氮化偶合反应），视供试品不同，颜色从橙黄色到猩红色。托烷生物碱类均具有莨菪酸结构，可发生Vitali反应，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾醇溶液作用，转变形成醌型产物而显深紫色。后马托品不具莨菪酸结构。无机金属盐钠盐、钾盐、钙盐、钡盐的焰色反应钠盐显鲜黄色；钾盐显紫色；钙离子显砖红色。铵盐加氢氧化钠试液，加热，即分解产生氨臭。遇湿润的红色石蕊试纸，使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。无机酸根氯化物①稀硝酸酸化后加硝酸银试液，生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化沉淀复生成。②供试品少量，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸润湿，缓缓加热产生氯气，遇水湿润的淀粉碘化钾试纸显蓝色。硫酸盐①加氯化钡试液；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。②加醋酸铅试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。③加盐酸不生成白色沉淀（与硫代硫酸盐区别）。硝酸盐:①加等量的硫酸，混合均匀，冷后，沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两液层，交界面呈棕色。②加硫酸和铜丝，加热生成红棕色的蒸汽。③加高猛酸钾试液，紫色不应退去（与亚硝酸盐的区别）。专属鉴别实验是证实某一种药物的依据，他是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应来鉴别药物的真伪。鉴别方法化学鉴别方法呈色反应酚羟基的三氯化铁呈色反应，有机氟化物的茜素氟蓝法，芳香第一胺的重氮化偶合反应，托烷生物碱类的Vitali反应，肾上腺皮质激素类的四氮唑反应，含羰基结构的苯肼反应，氨基酸和氨基糖苷类的茚三酮反应，氨基醇结构的双缩脲反应。沉淀生成反应鉴别法丙二酰脲类的硝酸银镜反应，氯化物的银盐沉淀反应，还原性基团的银镜反应，生成氧化亚铜的红色沉淀反应，苯甲酸盐类的三氯化铁反应，与重金属离子的沉淀反应，含氮杂环类生物碱沉淀剂，磺胺类药物的铜盐反应荧光鉴别硫酸奎宁的稀硫酸溶液显蓝色荧光。气体生成鉴别反应:大多数的胺类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物可经强碱处理后，加热产生氨气。化学结构中含硫的药物可经强酸处理后，加热生成硫化氢气体，含碘有机物经直火加热可生成紫色的碘蒸气，含乙酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。使试剂褪色的鉴别方法测定生成物熔点法光谱分析法色谱法原子吸收法药物的杂质检查杂货系指无治疗作用，或者影响药物的稳定性和疗效，甚至危害人们健康的物质。青霉素在生产过程中可能引入过敏性杂质。化学试剂的纯度不能和临床用药的纯度相混淆，化学试剂不用考虑生理作用。药物的纯度主要从用药安全、有效和对药物稳定性的影响等方面考虑。杂质的来源生产过程中引入；贮藏过程中引入。同分异构体，同质异晶体。酰胺和酯容易水解杂质分类按来源分一般杂质和特殊杂质；按毒性分毒性杂质和信号杂质；按理化性质分油机、无机和残留溶剂。杂质的限量对照法灵敏度法比较法一般杂质的检查氯化物浓度以50ml中含5080mg的CL为宜。此范围内氯化物所显浊度明显，便于比较。硝酸酸度以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。如有色可采用内消色法和外消色法。内消色法采用供试品两份，一份出去氯离子后加对照品，一份直接加供试品。外消色法采用一定的外部试剂反应消除颜色的干扰。比浊放于黑色背景下，自上向下观察。比色放于白色背景下，自上向下观察。高锰酸钾中氯化物的检查，需加乙醇除去高锰酸钾的颜色。硫酸盐以50ml供试液中含2ml稀盐酸为宜铁盐的检查Ch.P和USP采用硫氰酸盐法，BP采用巯基醋酸法检查以50ml中含10-50ug三价铁为宜。加入氧化剂过硫酸铵既可以氧化供试品中二价的铁离子成三价的铁离子，同时可防止光线是硫氰酸铁还原或分解褪色。加入过量的硫氰酸铵，不仅可以增加配位离子的稳定性，提高反应灵敏度，还能消除其他杂酸根离子与铁盐形成配位化合物而引起干扰。若供试管与对照管颜色不一致，可采用正丁醇或异戊醇提取，分取醇层比色。重金属检查法重金属影响药物的安全性和稳定性，重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。一法硫代乙酰胺法适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物，为最常用的方法。硫代乙酰胺与水反应生成硫化氢气体，硫化氢与重金属反应生成有色沉淀二法炽灼后的硫代乙酰胺法适用于含芳环、杂环以及难溶于水、稀酸及乙醇的有机化合物。三法:硫化钠法适用于难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类药物等四法微孔滤膜法适用于重金属限量低。砷盐的检查法古蔡氏法金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，采用对照法判断砷盐的限量。中国药典规定制备标准砷斑采用2ml标准砷溶液（相当于2ugAs）。反应中加入碘化钾和氯化亚锡将五价态砷还原为三价态砷。同时还可以抑制锑化氢的生成。100ug锑也不至于干扰测定。碘离子能与反应中产生的锌离子形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行。锌粒和供试品种含有少量硫化物，产生硫化氢气体，产生色斑，干扰试验。采用醋酸铅棉花吸收硫化氢气体。产生的砷斑不稳定，在反应中应保持干燥和避光，并立即与标准砷斑比较。含锑药物，用古蔡氏法检查时，锑盐也可被氧化为锑化氢。故采用白田道夫法检查砷盐。方法是氯化亚锡在盐酸中将砷盐还原为棕褐色的胶态砷，标准品对照比较。此法的反应灵敏度以三氧化二砷20ug计。二乙基二硫代氨基甲酸银法，简称Ag(DCC)法，不仅用于砷盐的限量检查，也可用作微量砷盐的含量测定。原理锌与酸作用产生新生态氢，生成砷化氢，还原二乙基二硫代氨基甲酸银，产生红色胶态银，同时在相同条件下使一定量标准砷溶液呈色，比色。溶液颜色的比较①溶液颜色与标准品比较②控制药物溶液在某波长下的吸收度来检查③用色差计来测定易碳化物药物中存在的遇硫酸易碳化或易氧化而呈色的微量有机杂质称为易碳化物。溶液澄清度的检查药物溶液中存在分散的细微颗粒，当直线光通过溶液时，细微颗粒可引起光的散射，测量光的散射就可以测量光的浊度。炽灼残渣检查法系指有机药物经炭化或挥发性无机物加热分解后，高温炽灼，产生的非挥发性杂质的硫酸盐。中国药典规定在700800℃下炽灼至完全灰化。一些重金属在高温下易挥发，在做金属检查时，温度控制在500到600℃。炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30分钟后进行。常用的有机破坏方法有碱破坏方法和酸破坏方法，后于500-600℃炽灼至完全灰化。干燥失重测定法干燥失重主要检查药物中的水分及其他挥发性物质。干燥失重的量应恒重，《中国药典》规定供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在0.3mg以下即达到恒重，干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下持续干燥一小时后进行。常压恒温干燥法除另有规定外，均为在105±2℃下干燥至恒重。供试品应铺于扁形称量瓶中，其厚度不超过5mm,如为疏松物质，厚度不超过10mm。大颗粒结晶药物，应先研细至粒度约2mm。含有较多结晶水的药物，在105℃下不易除去结晶水，可提高干燥温度。某些药物含有较多结晶水，熔点又较低，直接105℃干燥，供试品易融化，表面结成一层薄膜，使水分不易继续挥发。应采取在较低温度下加热，除去结晶水分，然后逐渐提高温度至105℃干燥至恒重。某些易吸湿或受热发生相变而达不到恒重的药物，可采用一定温度下、干燥一定时间所减少的重量代表干燥失重。减压干燥法适用于熔点低或受热分解的供试品干燥剂干燥法适用于受热分解或易升华的供试品药物的定量分析与分析方法验证凯氏定氮法。药品分析方法的验证准确度精密度专属性检测限定量限线性范围耐用性常用药品的种类、采集和贮藏血样尿液唾液芳酸及其酯类药物的分析苯甲酸类苯甲酸丙磺舒甲酚那酸水杨酸类水杨酸阿司匹林二氟尼柳对氨基水杨酸钠双水杨酸酯贝诺酯其他芳酸类布洛芬（苯乙酸类衍生物）氯贝丁酯（分子中含有羧酸酯结构，采用羟肟酸铁反应鉴别）。鉴别反应水杨酸及其盐类在中性或弱酸性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成紫色配位化合物。苯甲酸盐的中性或碱性溶液，与三氯化铁试液反应可生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。丙磺舒加少量氢氧化钠成盐溶解后，与三氯化铁反应，生成米黄色铁盐沉淀。布洛芬无水乙醇溶液，加高氯酸羟胺的无水乙醇试液等，呈紫色氯贝丁酯与羟肟酸铁反应呈紫色重氮化偶合反应在酸性条件下与亚硝酸钠试液反应进行重氮化，与碱性β奈酚偶合生成橙红色沉淀。对氨基水杨酸贝诺酯氧化反应甲芬那酸的硫酸溶液，加热后显黄色，并有绿色荧光；与重铬酸钾反应，即呈深蓝色，随即变为棕绿色。水解反应阿司匹林水解后，经酸化产生白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气；分离沉淀物，溶于醋酸铵试液，于100105℃，熔点为156-161℃。分解产物的反应①苯甲酸经酸化后，生成苯甲酸在试管中凝成白色升华物。②含硫的药物可分解后鉴别经分解氧化成硫酸根离子，用硫酸盐的鉴别方法鉴别。紫外，红外含苯环，有共轭体系。薄层色谱高效液相色谱特殊杂质检查:阿司匹林中特殊杂质检查①溶液的澄清度:检查碳酸钠试液中不溶物②水杨酸在弱酸性条件下与高铁盐反应呈紫堇色③易炭化物，易被硫酸炭化呈色的化合物。甲芬那酸中特殊杂质的检查①Cu检查法，用原子吸收分光光度法测定，铜限量为0.001%含量测定直接滴定法水解后剩余滴定法两步滴定法（中和水解与测定）苯酚的酸性弱到不足以与氢氧化钠反应。亚硝酸钠滴定法对于有芳伯胺基的药物采用此法滴定双相滴定在水相中加入水不溶性有机溶剂，边滴边萃取。紫外分光光度法芳香胺类药物的分析芳胺类芳烃胺类中苯乙胺和苯丙胺类对氨基苯甲酸酯类苯佐卡因盐酸普鲁卡因盐酸氯普卡因盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺（酯键改为酰胺键）酰胺类药物对乙酰氨基酚醋胺苯砜盐酸利多卡因盐酸布比卡因含量测定亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法苯乙胺类药物的分析本类药物为拟肾上腺素药，共性为具有苯乙胺的基本结构。其中肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸多巴胺和硫酸特布他林分子结构中苯环的3、4位上都有两个酚羟基，与儿茶酚类似。属于儿茶酚类药物。弱碱性多具有邻苯二酚结构，可与重金属盐呈色光学活性（多具有手性碳）鉴别反应与三氯化铁反应与甲醛--硫酸反应（与甲醛在硫酸溶液中反应，形成具有醌式结构的有色化合物）氧化反应（苯酚易被氧化）重酒石酸间羟基胺分子中具有脂肪伯胺基与亚硝基铁氰化钠反应显红紫色双缩脲反应盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素具有氨基醇结构，可显双缩脲特性反应。与(硫酸铜在氢氧化钠碱性条件下反应显蓝紫色)特殊杂质检查酮体的检查，肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、去氧肾上腺素和甲氧明等均需检查酮体。这些药物在生产过程中均由其酮体氢化还原制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。含量测定非水溶液滴定法溴量法（药物分子中的酚羟基的邻对位活泼氢与过量的溴定量发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的硫代硫酸钠滴定液的量，即可计算供试品的量）。苯丙胺类药物的分析是一类作用于肾素血管紧张素系统，能够有效调节血压药物ACEI）。典型药物:马来酸依那普利盐酸贝那普利等各种普利酸碱性脯胺酸衍生物（大多可以看成是脯胺酸衍生物）光学活性（多具有手性碳）水解特性（多为前体药物，经酶水解后生成活性代谢产物）鉴别试验熔点测定高猛酸钾反应（红色消失）溴-间苯二酚反应（显棕红色）羟胺-三氯化铁反应（显棕红色）。旋光法（本类药物都是单一的旋光物质）杂环类药物的分析吡啶类药物本类药物中均含有β或γ位被羧基衍生物所取代的吡啶环，若α位没被取代，可发生开环反应。异烟肼尼可刹米硝苯地平尼群地平尼莫地平弱碱性还原性(异烟肼中的酰肼基具有较强的还原性，可被不同的氧化剂氧化，也可与某些含羰基的化合物发生缩合反应)。鉴别反应吡啶环的开环反应①戊烯二醛反应适用于β或γ位被羧基衍生物所取代的吡啶环，溴化氰和芳伯胺作用于吡啶环，使环上的氮原子由三价变成五价，吡啶环水解开裂，生成戊烯二醛，再与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物。②二硝基氯苯反应酰肼基的反应:还原反应（银镜反应）缩合反应（异烟肼的酰肼基与芳醛缩合反应产生有色结晶，测固定的熔点）二氢吡啶的解离反应二氢吡啶类药物的丙酮或甲醛溶液与碱作用，1,4位氢发生解离，形成pπ共轭产生颜色。沉淀反应本类药物具有吡啶环的结构，可与重金属盐类及苦味酸等试剂形成沉淀。分解产物的反应尼可刹米与氢氧化钠试液反应加热，即可有二乙胺臭味逸出，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝。有关物质的检查异烟肼中游离肼的检查，采用薄层色谱法分离后，以对二甲氨基苯甲醛与肼反应生成腙显色，进行比较检查。喹啉类药物的分析吡啶和苯稠合而成的喹啉杂环，环上杂原子的反应性能基本与吡啶相同。硫酸奎尼丁硫酸奎宁盐酸环丙沙星碱性奎宁为左旋体，碱性大于奎尼丁旋光性奎宁为左旋体奎尼丁为右旋体荧光特性硫酸奎尼丁和硫酸奎宁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光，盐酸环丙沙星则无荧光鉴别反应绿奎宁反应奎宁和奎尼丁为6位含氧喹啉衍生物，可以发生绿奎宁反应。反应基本是6位含氧喹啉，经氯水氧化氯化，再以氨水处理缩合，生成绿色的二醌基亚胺的铵盐。硫酸根的检查托烷类药物的分析托烷类药物大多数是由莨菪烷衍生的氨基醇与不同的有机酸缩合成酯的生物碱。阿托品莨菪碱东莨菪碱后阿托品水解性分子结构中具有酯的结构，易水解。以阿托品为例，水解生成莨菪醇和莨菪酸。碱性五元脂环上含有叔胺氮原子，具有较强的碱性，易与酸成盐。旋光性东莨菪碱，呈左旋体。阿托品为消旋体。鉴别试验酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾和固体氢氧化钾作用，转变为有色的醌型产物，开始呈深紫色（Vitaili反应）氧化反应生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。沉淀反应本类药物为生物碱，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。吩噻嗪类药物的分析硫氮杂蒽母核氯丙嗪异丙嗪奋乃静癸氟奋乃静氟奋乃静紫外和红外吸收光谱噻嗪类药物为共轭三环的π系统，一般在紫外区有三吸收峰值，分别在205254300吩噻嗪类药物硫氮杂蒽母核的硫为二价，易被氧化生成砜和亚砜杂质。氧化产物与原药的紫外吸收光谱有明显的不同，具有四个吸收峰。氧化呈色反应二价硫易被氧化。与金属离子配合呈色二价硫与金属钯离子形成有色的配位化合物。苯并二氮杂卓类药物的分析苯环与七元含氮杂环稠和而成的有机药物，是目前临床应用最广泛的抗焦虑、抗惊厥药地西泮氯硝西泮氯氮卓弱碱性在强酸溶液中，本类药物可水解，形成二苯甲酮衍生物。扩展阅读药物分析知识点总结国家药品标准是《中国药典》（缩写Ch.P）和局颁标准。药品质量标准是药品现代化生产和质量管理的重要组成部分，是药品生产、经营、使用和行政、技术监督管理各部门应共同遵循的法定技术依据。药典内容分凡例、正文、附录、索引。药品质量管理规范（5个G）《药品非临床研究质量