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文档简介
1血液学一般检查项目二红细胞检查1血液学一般检查项目二红细胞检查项目二红细胞检查常用的红细胞检查项目:红细胞计数本次血红蛋白测定授课内容红细胞形态观察血细胞比容红细胞平均指数计算网织红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数红细胞沉降率测定项目二红细胞检查常用的红细胞检查项目:3项目二红细胞检查3项目二红细胞检查4红细胞概述4红细胞概述572小时48小时572小时48小时血红蛋白(血色素,Hb或HGB)是一种微红色的胶体物质,分子量为64458。是一种呼吸载体,每克血红蛋白可携带氧1.34毫升.成人红细胞总量约有600g血红蛋白,可携氧800毫升。血红蛋白概述血红蛋白(血色素,Hb或HGB)是一种微红色的胶体71.血红蛋白组成FEPFe++血红素HPHb71.血红蛋白组成FEPFe++血红素HPHb82.血红蛋白分子结构及成分组成Hb的多肽链两大类:①α类链:αζ和θ链;②非α链:βδγε链。
α链由141个氨基酸组成,
β链由146
个氨基酸组成。82.血红蛋白分子结构及成分9每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成,每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素。9每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成,在人体不同生长时期,Hb种类与比例不同:在人体不同生长时期,Hb种类与比例不同:11
检测方法1.手工显微镜法:2.血液分析仪法:任务一红细胞计数11检测方法任务一红细胞计数手工显微镜法12定义:测定每升血液中所含红细胞数目,用?.?X1012/L表示。手工显微镜法1213改良牛鲍计数板计数板13改良牛鲍计数板计数板1414151516【操作】1.准备计数板2.加稀释液:2ml3.加血:10μl混匀4.充池5.计数6.计算:红细胞数=N/5*25*10*200*106/L16【操作】17
1.手工法误差来源:标本、操作、器材、固有误差
2.仪器法
严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控质量控制17质量控制181.手工显微镜法
①血液分析仪的校正②白细胞减少时的对照核实。③血小板计数受小红细胞干扰时的校正2.血液分析仪法方法精确,且操作简便、快速,已广泛应用。方法学评价181.手工显微镜法方法学评价19成年:男性(4~5.5)×1012/L
女性(3.5~5.0)×1012/L新生儿:(6.0~7.0)×1012/L参考值19参考值201.生理性变化(1)年龄与性别的差异(2)精神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期
临床意义201.生理性变化(1)年龄与性别的差异临床意义21
2.病理性变化
(2)红细胞增多
1)原发性红细胞增多2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多
(1)红细胞和血红蛋白量减少1)红细胞生成障碍2)造血原料缺乏3)利用障碍红细胞4)破坏过多和失血临床意义212.病理性变化(2)红细胞增多(1)红细胞和血红蛋白22
医学决定水平①高于6.8×l012/L,应采取相应的治疗措施。②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限,应继续寻找原因。③低于1.5×l012/L应考虑输血
指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采取一定的措施,为患者处理起提供依据的作用。临床意义22医学决定水平①高于6.8×l012/L,应采取相应的治疗23定义:血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度,用g/l表示任务二血红蛋白测定23定义:血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总241.氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法
2.其他测定法
十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法(CTAB)等检测原理241.氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法检测原理25HiCN转化液:即文齐氏液540nm处有一吸收波峰,用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。
CN-血红蛋白高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白高铁氰化钾540nm血红蛋白浓度吸光度25CN-血红蛋白高铁血氰化高铁高铁氰化钾540nm血红蛋吸262627血红蛋白浓度计算公式:Hb(g/L)=Aג540HiCN×64458/44000×251=A×367.727血红蛋白浓度计算公式:28方法学评价28方法学评价
方法
优点
缺点HiCN操作简便、快速(5min),结果稳定可靠,试剂容易保存,便于质控,为参考方法①KCN有剧毒②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。③HbCO转化慢SDS-Hb不用剧毒试剂、无公害,操作简便,呈色稳定,准确度和精度高①SDS-Hb消光系数未确定②SDS质量差异性大。③SDS溶血活力大,不适于同时进行自动化分析AHD575
同HiCN法,不用剧毒试剂不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准HiN3
准确度和精密度高,试剂毒性低HbCO转化慢CTAB溶血活力强,但不破坏白细胞,适合自动化分析精密度和准确性低29方法优点缺点HiCN操作简便、快速(5mi30
质量控制30质量控制31
①成年:男性:120~160g/L;女性:llO~150g/L。②新生儿:170~200g/L。③老年(70岁以上):
男性:94~122g/L;女性87~112g/L。
参考值31参考值32①轻度贫血,成年男性Hb<120g/L,成年女性<100g/L;②中度贫血<90g/L;③重度贫血<60g/L;④极度贫血<30g/L。临床意义32临床意义项目二-红细胞检查课件34任务三红细胞形态检查红细胞大小、形态、染色和内涵物的是否异常34任务三红细胞形态检查红细胞大小、形态、染色和内涵物的是
1.显微镜分析法采用人工显微镜法血涂片染色观察,是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。
2.计算机图像分析建立统计模型,以正常红细胞形态为参比、作出分析,可用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。3.血液分析仪法提供红细胞数量及其他相关参数,对异常结果报警,但不能提供确切信息,需用镜检血涂片核实。
检测原理和方法学评价1.显微镜分析法采用人工显微镜法血涂片染色观察,检测原1.有合格的血液细胞形态检验人员2.选择细胞分布均匀区域进行镜检3.注意完整规范的检查顺序低倍镜细胞分布和染色油镜细胞形态,是否存在其他异常细胞4.减少人为影响因素全片浏览质量保证1.有合格的血液细胞形态检验人员质量保证373738正常红细胞双凹圆盘形大小均一,平均7.2μm(6.7-7.7μm);淡粉红色,Hb充盈良好,中央部位为生理性淡染区,大小约为直径的1/3;胞质内无异常结。38正常红细胞双凹圆盘形393940异常红细胞大小异常40异常红细胞大小异常41大小异常41大小异常42小红细胞大红细胞42小红细胞大红细胞染色异常染色异常444445染色异常45染色异常464647形态异常47形态异常48484949505051515252535354545555565657575858595960结构异常60结构异常6161626263636464656566寄生虫:当患者感染疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等时,可见红细胞胞质内相应的病原体。66寄生虫:当患者感染疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等时,可见676768
血细胞比容(Hct或PCV),以前称为红细胞压积,是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。
HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关
任务四血细胞比容测定68任务四血细胞比容测定1.常量法(Wintrobe法)和微量法(microhematocrit)
将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。
5层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,Hct=红细胞计数×红细胞平均体积。检测原理检测原理项目二-红细胞检查课件方法优点缺点温氏法无需特殊仪器,广泛应用不能完全排除残留血浆,且单独采血,用血量大微量法快速(5min)标本用量小、结果准确、重复性好。WHO推荐的首选参考方法有残留血浆,但较温氏法少电阻抗法简便快速(5-15s)
白细胞、血小板增多可引起血液导电异常,使结果不可靠血细胞分析仪法简便快速、精密度高,无需单独采血准确性稍低,结果仅供参考71方法优点缺点温氏法无需特殊仪器,广泛应用不能完全排除残留血
1.操作规范化
避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不均等。
2.注意干扰因素①假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明,
(细胞变形性减低和数量增多血浆残留量增加);高网织红细胞或高白细胞等②假性降低:体外溶血、自身凝集等。
质量保证质量保证参考值男性:0.380—0.508;女性:0.335—0.450参考值男性:0.380—0.508;临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标,HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。临床意义
1.临床补液量的参考
各种原因导致脱水时,HCT都会增高,补液时可监测HCT,HCT恢复正常表示血容量得到纠正。
2.真性红细胞增多症诊断指标当HCT大于0.7,RBC为(7-10)X1012/L,Hb大于180g/L,即可诊断。临床意义1.临床补液量的参考临床意义
3.红细胞平均指数计算的基础数据
红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学分类。
4.血液流变学指标
HCT增高表明红细胞数量偏高,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,微循环障碍、组织缺氧。
HCT与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状态进行监测。
临床意义3.红细胞平均指数计算的基础数据77任务五红细胞平均指数计算红细胞平均容积(meancorpuscularvolume,MCV),指每个红细胞平均体积的大小,以飞升(f1)为单位;红细胞血平均红蛋白含量(meancorpuscularhe-moglobin,MCH),指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位;红细胞平均血红蛋白浓度(meancorpuscularHemoglobinconcentration,MCHC),指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度(g/L)。
77任务五红细胞平均指数计算红细胞平均容积(meanco(1)MCV=每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞个数=Hct/RB(f1)
(2)MCH=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数=Hb/RBC(pg)
(3)MCHC=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比容=Hb/Hct
78(1)MCV=每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞个数=H
[检测原理]
1.手工法
同时计数红细胞,测定血红蛋白和血细胞比容,计算出红细胞3个平均指数。例:RBC为3.50X1012/L,Hct为0.36,Hb为120g/L
Hct0.36MCV=——(fl)=——————=103(fl)
RBC3.50X1012/LHbHbMCH=——(pg),MCHC=——(g/L)
RBCHct[检测原理][检测原理]2.血液分析仪能直接导出MCV的值,再结合仪器直接测定的RBC和Hb,计算出MCH和MCHCMCH=Hb/RBC,
MCHC=Hb/(RBC×MCV)。
[检测原理]81参考值81参考值临床意义贫血分类MCV MCHMCHC贫血正细胞贫血正常正常正常再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些溶血性贫血大细胞贫血增高增高正常各种造血物质缺乏或利用不良的贫血单纯小细胞贫血减低减低正常慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血小细胞低色素贫血减低减低减低缺铁性贫血及铁利用不良贫血,慢性失血性贫血作为贫血的红细胞形态学分类临床意义贫血分类MCV MCHMCHC贫血正细胞贫血83任务六网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyte,Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经煌焦油蓝等活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,连缀成线,线连接成网。属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞),一般为8~9.5μm。83任务六网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyt84848585
[检测原理]
1.普通光学显微镜法
活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团网织红细胞RNA的磷酸基(带负电荷)RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,蓝色的点状、线状或网状结构
,显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数,以百分比或分数数表示。
[检测原理]
[检测原理]
流式细胞仪法2.仪器法网织红细胞计数仪血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中RNA结合,发出特定颜色的荧光进行RNA定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret%)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞比率(HFR、MFR、LFR)并计算网织红细胞其他参数。
[检测原理]血液分析仪法
提供与网织红细胞相关的多个参数,网织红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、
LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。血液分析仪法8989【质量保证】
以手工计数法为重点。
1.染料选择【质量保证】以手工计数法为重点。
1.染料选择【质量保证】
2.正确辨认网织红细胞外周血中网织红细胞主要为Ⅳ型,凡含有2个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。
3.网织红细胞计数方法
(1)Miller窥盘:(2)显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件,①HFR:粗颗粒堆积成网状。②MFR:粗颗粒在10个以上,或细小颗粒超过15个。③LFR:细胞内含15个以下细小颗粒
【质量保证】①网织红细胞百分数:成人和儿童:0.005~0.025
新生儿:0.02~0.06②网织红细胞绝对数:成人和儿童:(24~84)X109/L参考值①网织红细胞百分数:参考值临床意义1.评价骨髓增生能力,判断贫血类型。
(1)网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛,各种增生性贫血
(2)网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血
(3)鉴别贫血:临床意义1.评价骨髓增生能力,判断贫血类型。
(1)网织红细项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞检查课件临床意义2.评价疗效(1)观察贫血疗效:贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,2~3d后Ret开始上升,7~10d达到最高峰(约10%),2周后渐降至正常。
(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后第21天,如Ret大于15X109/L,常表示无移植并发症;若骨髓开始恢复造血功能,首先HFR和MFR上升,其次为网织红细胞计数值上升。临床意义2.评价疗效临床意义3.放疗和化疗的监测
指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制。机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期HFR和MFR降低,而后网织红细胞数值降低;停止放、化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次上升。
临床意义3.放疗和化疗的监测临床意义临床意义项目二-红细胞检查课件101任务七点彩红细胞计数定义:
嗜碱性点彩红细胞(basophilicstipplingcell)是不完全成熟的红细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如美蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以瑞氏染色,则在粉红色的胞质中见到大小,形状不一紫红色或蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞。101任务七点彩红细胞计数定义:
[检测原理]
点彩红细胞计数(basiphilicstipplingcount),用碱性美蓝液作血涂片染色,红细胞呈淡蓝绿色,颗粒显深蓝色;用瑞氏染色,颗粒呈蓝黑色。通常在油镜下计数1000个红细胞中的点彩红细胞数,换算成百分率。[检测原理]
[方法学评价]
点彩红细胞计数操作目前仍用显微镜血涂片染色的传统检查法。必要时可扩大红细胞计数的数量。例如,先计数50个视野中点彩红细胞数,同时计数5个视野内红细胞总数,再按下式求出点彩红细胞的百分比。
50个视野中点彩红细胞数点彩红细胞%=————————————5个视野内红细胞总数×10
[方法学评价][质量控制]
计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数。
[参考值]
<0.03%
[临床意义]
点彩红细胞计数增高主要见于:1.中毒患者如铅、汞、银、铋等金属中毒及硝基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高。2.各类贫血如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细胞增加常表示造血旺盛。
[质量控制]项目二-红细胞检查课件红细胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR)简称血沉,指在规定条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。血沉过程一般分为3期:①缗钱状红细胞形成期,一般要经过数分钟至10min。②快速沉降期,形成缗钱状红细胞以等速下降,约40min。
③细胞堆积期,又称缓慢沉积期或挤紧期,此时红细胞堆积在试管底部。八、红细胞沉降率测定红细胞沉降率(erythrocytesedimentati
[检测原理]
1.魏氏法(Westergren法)
将离体抗凝血液置于特制刻度测定管内,垂直立于室温中,记录1h时红细胞层下沉的距离(上层血浆的高度
),用毫米(mm)数值报告。
[检测原理]项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞检查课件
[检测原理]2.血沉仪法
血液经抗凝静置后,红细胞下降,红细胞与血浆分离,其界面随时间而下移,血沉仪用发光二极管和光电管检测此界面的透光度改变,得到血沉值并显示红细胞沉降高度H与对应时间t相关的H—t曲线。[检测原理]111111[方法学评价]1.手工法
魏氏法:为传统方法,为国内规范方法
.EDTA或枸橼酸钠抗凝血液标本充分混合后,吸入魏氏血沉管200mm刻度处,将血沉管垂直室温放置至少60min,应避免振动、风吹、阳光直射,然后读取柱中红细胞沉淀上透明血浆层约lmm处结果。ICSH方法:参考方法,用于验证其他方法的可靠性。[方法学评价]项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞检查课件[方法学评价]2.仪器法血沉仪可动态记录整个血沉过程的变化,描绘出红细胞沉降的曲线,
ESR测定在30min或lmin内得到检测结果,大大缩短了临床等候报告的时间。
[方法学评价]116116项目二-红细胞检查课件
[质量保证]
红细胞数量、表面积、厚度、直径、血红蛋白量和血浆中各种蛋白比例。影响红细胞缗钱状形成的主要因素有:
1.血浆中各种蛋白的比例,与总蛋白浓度无关。清蛋白带负电荷,球蛋白与纤维蛋白原带正电荷,红细胞因唾液酸而带负电荷,彼此排斥。促缗钱状聚集的物质:纤维蛋白原>γ球蛋白>αβ球蛋白、胆固醇、甘油三酯等;清蛋白及卵磷脂则抑制红细胞缗钱状的形成。影响因素[质量保证]影响因素
2.红细胞数量和形状
①红细胞数量:一般情况下,红细胞沉降率和血浆逆阻力保持一定的平衡状态,如红细胞数量减少,其总面积减少,所承受的血浆逆阻力也减少,因此血沉加快;但如红细胞数量太少,则影响红细胞缗钱状形成,血沉也减慢;反之,红细胞增多时,血沉减慢。②红细胞直径和形状:直径愈大血沉愈快,球形红细胞、镰形红细胞不易聚集,因而血沉减慢。影响因素2.红细胞数量和形状影响因素3.血沉管与血沉架
血沉管与血沉架规格必须符合标准。血沉管置血沉架上应完全垂直,倾斜时,会加速沉降。4.血标本
避免脂肪血;抗凝剂浓度增加使血沉减慢,每周配制1次,置冰箱血与抗凝剂比例要准确。抽血应在30s内完成,不得混入消毒剂,避免形成凝块。影响因素3.血沉管与血沉架影响因素5.温度
18~25~C的室温下测定。室温过高时血沉加快,可以按温度系数校正。6.其他注射器、试管、血沉管要干燥洁净,以避免溶血。7.及时测定采血后应尽快进行测定,室温下,标本置放时间不应超过4h,置4℃冰箱时枸橼酸钠抗凝血可6h,EDTA抗凝血可24h。影响因素
[质量保证]
5.温度18~25~C的室温下测定。室温过高时血沉加快,
[参考值]①<50岁:男性<
15mm/h,女性<
20mm/h。②>50岁:男性<
20mm/h,女性<
30mm/h③>85岁:男性<
30mm/h,女性<
42mm/h。④儿童<
10mm/h。
[参考值]1.血沉增快
(1)生理性:女性高于男性。妇女月经期由于子宫内膜破损及出血,血沉略有增快;妊娠3个月以上可因生理性贫血及血浆纤维蛋白原增加使血沉增快;老年人,特别是70岁以上的高龄者,多因纤维蛋白原增高而血沉增快。临床意义1.血沉增快临床意义
(2)病理性1)各种炎症:感染是血沉加快最常见的原因。急性细菌性炎症时,由于血中急性时相反应蛋白增多,包括α1胰蛋白酶、α2巨球蛋白、C反应蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原等。在炎症发生后2~3d可出现血沉增快;慢性炎症,如结核病、结缔组织炎症、风湿热等,于活动期常见血沉增快,病情好转时血沉减慢,非活动期血沉可正常。临床意义(2)病理性临床意义
2)组织损伤及坏死:范围较大的组织损伤或手术创伤常致血沉增快,若无合并症,一般2~3周内恢复正常;心肌梗死时,于发病后3~4d可见血沉增快(急性时相反应蛋白),并持续1~
3周,而心绞痛时血沉多正常。2)组织损伤及坏死:
3)恶性肿瘤:
血沉可作为恶性肿瘤的普查筛选的辅助指标,通常迅速增长的恶性肿瘤血沉均增快,良性肿瘤血沉多正常。恶性肿瘤手术切除后或治疗较彻底,血沉可趋于正常,复发或转移时又可增快。3)恶性肿瘤:
4)高球蛋白血症:
多种因素导致的免疫球蛋白增高可见血沉增快,如系统性红斑狼疮、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、亚急性感染性心内膜炎、肝硬化、慢性肾炎等。高粘滞性综合征时,血沉可不增快甚至减慢。4)高球蛋白血症:5)贫血:贫血患者血红蛋白低于90g/L时,血沉可轻度增快,并随贫血加重而增快。6)高胆固醇血症:如动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合征、粘液性水肿、原发性家族性高胆固醇血症等,血沉常常增快。5)贫血:贫血患者血红蛋白低于90g/L时,血沉可轻度增快,2.血沉减慢
一般临床意义较小,主要见于真红、低纤维蛋白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常(如异形红细胞、球形红细胞、镰形红细胞)。
2.血沉减慢项目二-红细胞检查课件131血液学一般检查项目二红细胞检查1血液学一般检查项目二红细胞检查项目二红细胞检查常用的红细胞检查项目:红细胞计数本次血红蛋白测定授课内容红细胞形态观察血细胞比容红细胞平均指数计算网织红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数红细胞沉降率测定项目二红细胞检查常用的红细胞检查项目:133项目二红细胞检查3项目二红细胞检查134红细胞概述4红细胞概述13572小时48小时572小时48小时血红蛋白(血色素,Hb或HGB)是一种微红色的胶体物质,分子量为64458。是一种呼吸载体,每克血红蛋白可携带氧1.34毫升.成人红细胞总量约有600g血红蛋白,可携氧800毫升。血红蛋白概述血红蛋白(血色素,Hb或HGB)是一种微红色的胶体1371.血红蛋白组成FEPFe++血红素HPHb71.血红蛋白组成FEPFe++血红素HPHb1382.血红蛋白分子结构及成分组成Hb的多肽链两大类:①α类链:αζ和θ链;②非α链:βδγε链。
α链由141个氨基酸组成,
β链由146
个氨基酸组成。82.血红蛋白分子结构及成分139每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成,每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素。9每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成,在人体不同生长时期,Hb种类与比例不同:在人体不同生长时期,Hb种类与比例不同:141
检测方法1.手工显微镜法:2.血液分析仪法:任务一红细胞计数11检测方法任务一红细胞计数手工显微镜法142定义:测定每升血液中所含红细胞数目,用?.?X1012/L表示。手工显微镜法12143改良牛鲍计数板计数板13改良牛鲍计数板计数板1441414515146【操作】1.准备计数板2.加稀释液:2ml3.加血:10μl混匀4.充池5.计数6.计算:红细胞数=N/5*25*10*200*106/L16【操作】147
1.手工法误差来源:标本、操作、器材、固有误差
2.仪器法
严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控质量控制17质量控制1481.手工显微镜法
①血液分析仪的校正②白细胞减少时的对照核实。③血小板计数受小红细胞干扰时的校正2.血液分析仪法方法精确,且操作简便、快速,已广泛应用。方法学评价181.手工显微镜法方法学评价149成年:男性(4~5.5)×1012/L
女性(3.5~5.0)×1012/L新生儿:(6.0~7.0)×1012/L参考值19参考值1501.生理性变化(1)年龄与性别的差异(2)精神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期
临床意义201.生理性变化(1)年龄与性别的差异临床意义151
2.病理性变化
(2)红细胞增多
1)原发性红细胞增多2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多
(1)红细胞和血红蛋白量减少1)红细胞生成障碍2)造血原料缺乏3)利用障碍红细胞4)破坏过多和失血临床意义212.病理性变化(2)红细胞增多(1)红细胞和血红蛋白152
医学决定水平①高于6.8×l012/L,应采取相应的治疗措施。②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限,应继续寻找原因。③低于1.5×l012/L应考虑输血
指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采取一定的措施,为患者处理起提供依据的作用。临床意义22医学决定水平①高于6.8×l012/L,应采取相应的治疗153定义:血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度,用g/l表示任务二血红蛋白测定23定义:血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总1541.氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法
2.其他测定法
十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法(CTAB)等检测原理241.氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法检测原理155HiCN转化液:即文齐氏液540nm处有一吸收波峰,用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。
CN-血红蛋白高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白高铁氰化钾540nm血红蛋白浓度吸光度25CN-血红蛋白高铁血氰化高铁高铁氰化钾540nm血红蛋吸15626157血红蛋白浓度计算公式:Hb(g/L)=Aג540HiCN×64458/44000×251=A×367.727血红蛋白浓度计算公式:158方法学评价28方法学评价
方法
优点
缺点HiCN操作简便、快速(5min),结果稳定可靠,试剂容易保存,便于质控,为参考方法①KCN有剧毒②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。③HbCO转化慢SDS-Hb不用剧毒试剂、无公害,操作简便,呈色稳定,准确度和精度高①SDS-Hb消光系数未确定②SDS质量差异性大。③SDS溶血活力大,不适于同时进行自动化分析AHD575
同HiCN法,不用剧毒试剂不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准HiN3
准确度和精密度高,试剂毒性低HbCO转化慢CTAB溶血活力强,但不破坏白细胞,适合自动化分析精密度和准确性低159方法优点缺点HiCN操作简便、快速(5mi160
质量控制30质量控制161
①成年:男性:120~160g/L;女性:llO~150g/L。②新生儿:170~200g/L。③老年(70岁以上):
男性:94~122g/L;女性87~112g/L。
参考值31参考值162①轻度贫血,成年男性Hb<120g/L,成年女性<100g/L;②中度贫血<90g/L;③重度贫血<60g/L;④极度贫血<30g/L。临床意义32临床意义项目二-红细胞检查课件164任务三红细胞形态检查红细胞大小、形态、染色和内涵物的是否异常34任务三红细胞形态检查红细胞大小、形态、染色和内涵物的是
1.显微镜分析法采用人工显微镜法血涂片染色观察,是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。
2.计算机图像分析建立统计模型,以正常红细胞形态为参比、作出分析,可用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。3.血液分析仪法提供红细胞数量及其他相关参数,对异常结果报警,但不能提供确切信息,需用镜检血涂片核实。
检测原理和方法学评价1.显微镜分析法采用人工显微镜法血涂片染色观察,检测原1.有合格的血液细胞形态检验人员2.选择细胞分布均匀区域进行镜检3.注意完整规范的检查顺序低倍镜细胞分布和染色油镜细胞形态,是否存在其他异常细胞4.减少人为影响因素全片浏览质量保证1.有合格的血液细胞形态检验人员质量保证16737168正常红细胞双凹圆盘形大小均一,平均7.2μm(6.7-7.7μm);淡粉红色,Hb充盈良好,中央部位为生理性淡染区,大小约为直径的1/3;胞质内无异常结。38正常红细胞双凹圆盘形16939170异常红细胞大小异常40异常红细胞大小异常171大小异常41大小异常172小红细胞大红细胞42小红细胞大红细胞染色异常染色异常17444175染色异常45染色异常17646177形态异常47形态异常178481794918050181511825218353184541855518656187571885818959190结构异常60结构异常1916119262193631946419565196寄生虫:当患者感染疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等时,可见红细胞胞质内相应的病原体。66寄生虫:当患者感染疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等时,可见19767198
血细胞比容(Hct或PCV),以前称为红细胞压积,是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。
HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关
任务四血细胞比容测定68任务四血细胞比容测定1.常量法(Wintrobe法)和微量法(microhematocrit)
将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。
5层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,Hct=红细胞计数×红细胞平均体积。检测原理检测原理项目二-红细胞检查课件方法优点缺点温氏法无需特殊仪器,广泛应用不能完全排除残留血浆,且单独采血,用血量大微量法快速(5min)标本用量小、结果准确、重复性好。WHO推荐的首选参考方法有残留血浆,但较温氏法少电阻抗法简便快速(5-15s)
白细胞、血小板增多可引起血液导电异常,使结果不可靠血细胞分析仪法简便快速、精密度高,无需单独采血准确性稍低,结果仅供参考201方法优点缺点温氏法无需特殊仪器,广泛应用不能完全排除残留血
1.操作规范化
避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不均等。
2.注意干扰因素①假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明,
(细胞变形性减低和数量增多血浆残留量增加);高网织红细胞或高白细胞等②假性降低:体外溶血、自身凝集等。
质量保证质量保证参考值男性:0.380—0.508;女性:0.335—0.450参考值男性:0.380—0.508;临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标,HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。临床意义
1.临床补液量的参考
各种原因导致脱水时,HCT都会增高,补液时可监测HCT,HCT恢复正常表示血容量得到纠正。
2.真性红细胞增多症诊断指标当HCT大于0.7,RBC为(7-10)X1012/L,Hb大于180g/L,即可诊断。临床意义1.临床补液量的参考临床意义
3.红细胞平均指数计算的基础数据
红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学分类。
4.血液流变学指标
HCT增高表明红细胞数量偏高,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,微循环障碍、组织缺氧。
HCT与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状态进行监测。
临床意义3.红细胞平均指数计算的基础数据207任务五红细胞平均指数计算红细胞平均容积(meancorpuscularvolume,MCV),指每个红细胞平均体积的大小,以飞升(f1)为单位;红细胞血平均红蛋白含量(meancorpuscularhe-moglobin,MCH),指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位;红细胞平均血红蛋白浓度(meancorpuscularHemoglobinconcentration,MCHC),指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度(g/L)。
77任务五红细胞平均指数计算红细胞平均容积(meanco(1)MCV=每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞个数=Hct/RB(f1)
(2)MCH=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数=Hb/RBC(pg)
(3)MCHC=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比容=Hb/Hct
208(1)MCV=每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞个数=H
[检测原理]
1.手工法
同时计数红细胞,测定血红蛋白和血细胞比容,计算出红细胞3个平均指数。例:RBC为3.50X1012/L,Hct为0.36,Hb为120g/L
Hct0.36MCV=——(fl)=——————=103(fl)
RBC3.50X1012/LHbHbMCH=——(pg),MCHC=——(g/L)
RBCHct[检测原理][检测原理]2.血液分析仪能直接导出MCV的值,再结合仪器直接测定的RBC和Hb,计算出MCH和MCHCMCH=Hb/RBC,
MCHC=Hb/(RBC×MCV)。
[检测原理]211参考值81参考值临床意义贫血分类MCV MCHMCHC贫血正细胞贫血正常正常正常再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些溶血性贫血大细胞贫血增高增高正常各种造血物质缺乏或利用不良的贫血单纯小细胞贫血减低减低正常慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血小细胞低色素贫血减低减低减低缺铁性贫血及铁利用不良贫血,慢性失血性贫血作为贫血的红细胞形态学分类临床意义贫血分类MCV MCHMCHC贫血正细胞贫血213任务六网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyte,Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经煌焦油蓝等活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,连缀成线,线连接成网。属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞),一般为8~9.5μm。83任务六网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyt2148421585
[检测原理]
1.普通光学显微镜法
活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团网织红细胞RNA的磷酸基(带负电荷)RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,蓝色的点状、线状或网状结构
,显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数,以百分比或分数数表示。
[检测原理]
[检测原理]
流式细胞仪法2.仪器法网织红细胞计数仪血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中RNA结合,发出特定颜色的荧光进行RNA定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret%)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞比率(HFR、MFR、LFR)并计算网织红细胞其他参数。
[检测原理]血液分析仪法
提供与网织红细胞相关的多个参数,网织红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、
LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。血液分析仪法21989【质量保证】
以手工计数法为重点。
1.染料选择【质量保证】以手工计数法为重点。
1.染料选择【质量保证】
2.正确辨认网织红细胞外周血中网织红细胞主要为Ⅳ型,凡含有2个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。
3.网织红细胞计数方法
(1)Miller窥盘:(2)显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件,①HFR:粗颗粒堆积成网状。②MFR:粗颗粒在10个以上,或细小颗粒超过15个。③LFR:细胞内含15个以下细小颗粒
【质量保证】①网织红细胞百分数:成人和儿童:0.005~0.025
新生儿:0.02~0.06②网织红细胞绝对数:成人和儿童:(24~84)X109/L参考值①网织红细胞百分数:参考值临床意义1.评价骨髓增生能力,判断贫血类型。
(1)网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛,各种增生性贫血
(2)网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血
(3)鉴别贫血:临床意义1.评价骨髓增生能力,判断贫血类型。
(1)网织红细项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞检查课件临床意义2.评价疗效(1)观察贫血疗效:贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,2~3d后Ret开始上升,7~10d达到最高峰(约10%),2周后渐降至正常。
(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后第21天,如Ret大于15X109/L,常表示无移植并发症;若骨髓开始恢复造血功能,首先HFR和MFR上升,其次为网织红细胞计数值上升。临床意义2.评价疗效临床意义3.放疗和化疗的监测
指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制。机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期HFR和MFR降低,而后网织红细胞数值降低;停止放、化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次上升。
临床意义3.放疗和化疗的监测临床意义临床意义项目二-红细胞检查课件231任务七点彩红细胞计数定义:
嗜碱性点彩红细胞(basophilicstipplingcell)是不完全成熟的红细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如美蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以瑞氏染色,则在粉红色的胞质中见到大小,形状不一紫红色或蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞。101任务七点彩红细胞计数定义:
[检测原理]
点彩红细胞计数(basiphilicstipplingcount),用碱性美蓝液作血涂片染色,红细胞呈淡蓝绿色,颗粒显深蓝色;用瑞氏染色,颗粒呈蓝黑色。通常在油镜下计数1000个红细胞中的点彩红细胞数,换算成百分率。[检测原理]
[方法学评价]
点彩红细胞计数操作目前仍用显微镜血涂片染色的传统检查法。必要时可扩大红细胞计数的数量。例如,先计数50个视野中点彩红细胞数,同时计数5个视野内红细胞总数,再按下式求出点彩红细胞的百分比。
50个视野中点彩红细胞数点彩红细胞%=————————————5个视野内红细胞总数×10
[方法学评价][质量控制]
计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数。
[参考值]
<0.03%
[临床意义]
点彩红细胞计数增高主要见于:1.中毒患者如铅、汞、银、铋等金属中毒及硝基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高。2.各类贫血如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细胞增加常表示造血旺盛。
[质量控制]项目二-红细胞检查课件红细胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR)简称血沉,指在规定条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。血沉过程一般分为3期:①缗钱状红细胞形成期,一般要经过数分钟至10min。②快速沉降期,形成缗钱状红细胞以等速下降,约40min。
③细胞堆积期,又称缓慢沉积期或挤紧期,此时红细胞堆积在试管底部。八、红细胞沉降率测定红细胞沉降率(erythrocytesedimentati
[检测原理]
1.魏氏法(Westergren法)
将离体抗凝血液置于特制刻度测定管内,垂直立于室温中,记录1h时红细胞层下沉的距离(上层血浆的高度
),用毫米(mm)数值报告。
[检测原理]项目二-红细胞检查课件项目二-红细胞
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