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文档简介

PCR技术的发明、原理及应用什么是PCRPCR:Polymerasechainreaction，即聚合酶链反应是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术

PCR技术的发展历史关于PCR的文章首次由美国科学家KaryMullis等人在《Science》杂志上发表《Science》杂志报道了耐热性DNA多聚酶Taq酶（生活在温泉中的水生嗜热杆菌内提取到的一种耐热的DNA聚合酶）的发现,预示着分子时代的到来。12月《Science》杂志将PCR和它所使用的聚合酶命名为第一个“年度分子”。1993KaryMullis因PCR的发明获得诺贝尔化学奖。PCR技术的原理1遗传物质：细胞核染色体

DNA（脱氧核糖核酸和磷酸链和碱基构成)碱基（A、T、C、G）是按双链螺旋排列的，碱基序列的长度和排列的顺序决定了生物的多样性。比如人类体细胞中共有31亿个碱基对，按上述的0.1%的差，人和人之间有3百万个碱基对的差别。PCR的基本工作原理就是以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机理沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成。PCR技术的原理2PCR反应的基本成分模板DNA、特异性引物、热稳定DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸（dNTP）基本反应步骤：变性--退火--延伸最后通过染料如EB染色DNA后在紫外灯下显色检出PCR技术的原理31234522557294时间（min）温度（℃）适温延伸3高温变性1低温退火2重复1~3步25~35轮目的DNA片段扩增100万倍以上DNA双螺旋DNA单链与引物复性DNA变性形成2条单链子链延伸DNA加倍PCR技术的优点优点:

特异敏感快速、简便易自动化等PCR技术的局限性为了构建特定引物，使特定DNA序列的选择性扩增，必须有一个庞大的已知序列的数据库。

聚合酶链反应效率差异很大，根据不同的因素需要优化反应条件。PCR技术扩增产物的长度有限。PCR技术的应用基因克隆、测序和表达等法医学个体识别和亲子鉴定遗传性疾病检测、肿瘤诊断、病原体检测等基因克隆和表达DNA指纹技术11984年英国的遗传学家AlecJeffreys在进行肌红蛋白的DNA序列研究时，意外发现非功能DNA（不产生蛋白的DNA）上重复着一种小片段DNA，这一含15个左右碱基的DNA片段，在不同个体间重复的频率及位置有明显的不同，Jeffreys首先在自己的DNA上进行研究，验证了这一技术，如果我们有血缘关系，这些不同会大大缩小。Jeffreys命名这一技术为DNA指纹技术（DNAfingerprint）。DNA指纹技术2采集血样（毛发、

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