肺部感染的实验室检查演示教学课件

肺部感染的实验室检查第二军医大学长征医院全军临床免疫研究所仲人前1肺部感染的实验室检查第二军医大学长征医院仲人前1肺部感染的临床特点

肺部感染的发生过程

肺部感染实验室检查

实验室检查质量保证报告提纲2肺部感染的临床特点

肺部感染的发生过程

肺部感染实验室检查

肺部感染的临床特点肺部感染临床症状相似，以咳嗽、咳痰为主感染的病原体繁多，不同年龄，不同季节，不同环境，不同基础疾病感染的病原体不同针对不同的病原体应采取针对性的治疗方法3肺部感染的临床特点肺部感染临床症状相似，以咳嗽、咳痰为主3肺部感染的发生过程遗传因素环境因素免疫因素肺部感染病原体4肺部感染的发生过程遗传因素环境因素免疫因素肺部感染病原体4病原体感染的易感基因AdrianVSHill,

PhilTransRSocB(2012)367,840–8495病原体感染的易感基因AdrianVSHill,Phil肺部感染的环境因素生物燃料吸烟空气污染滥用抗生素免疫抑制剂气候变化RobertJ.Laumbach,JAllergyClinImmunol.2012January;129(1):3–13JoonYoungSong.JKoreanMedSci2013;28:4-156肺部感染的环境因素生物燃料RobertJ.LaumbaEffectofcigarettesmokeoninflammationJ.Lee,JDentRes.2012;91(2):142–1497Effectofcigarettesmokeoni肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithelialcellsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:7913928肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithel肺部感染的免疫因素EpithelialcellproducedchemokinesandcytokinesagainstbacteriainfectionsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:7913929肺部感染的免疫因素Epithelialcellprodu肺部感染常见病原体类型细菌性肺炎如肺炎链球菌、甲型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、埃希大肠杆菌、结核杆菌等真菌性肺炎如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等病毒性肺炎如冠状病毒、腺病毒、流感病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等非典型性肺炎如军团菌、支原体和衣原体等其它病原体所致的肺炎如立克次体、弓形虫、原虫、寄生虫如肺包虫、肺吸虫、肺血吸虫）等10肺部感染常见病原体类型细菌性肺炎如肺炎链球菌、甲型溶血性链英国肺炎病原体病原体占肺炎病因%临床表现肺炎链球菌50社区、既往健康肺炎支原体6同上流感病毒A5同上流感嗜血杆菌5基础肺病：COPD肺炎衣原体5社区获得性肺炎鹦鹉热衣原体3接触鸟类金黄色葡萄球菌2儿童、毒品、流感病毒相关军团菌2公共场所爆发、散发、地方流行伯纳特立克次体1屠宰场和皮革工人铜绿<1囊性纤维化卡氏肺孢子菌<1AIDS、淋巴瘤、白血病、使用细胞毒药物及糖皮质激素衣氏放线菌星型诺卡菌CMV、烟曲霉、厌氧菌<1吸入性肺炎、酗酒、手术后未分离到病原菌2011英国肺炎病原体病原体占肺炎病因%临床表现肺炎链球菌50社区、肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染2、根据感染部位推测可能的病原体3、根据感染人群推测可能的病原体4、根据可能的病原体选择检测方法12肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染12肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染血常规CRPPCT内毒素G试验，GM试验13肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染13血常规检查14血常规检查14CRP（CreactiveProtein）与肺炎链球菌C多糖体反应是一种重要的急性时相反应蛋白血清CRP由肝脏合成,半衰期19小时IL-1、IL-6、TNF是其最重要的调节因子15CRP（CreactiveProtein）与肺炎链球菌DiagnosticaccuracyofCRPincombinationwithIL-6andIL-8NoraHofer,Neonatology2012;102:25–3616DiagnosticaccuracyofCRPinPCT（procalcitonin）Procalcitonin（降钙素原）由细菌内毒素诱导产生升高：严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭不升高：自身免疫、过敏和病毒感染不升高：局部有限的细菌感染、轻微感染和慢性炎症17PCT（procalcitonin）ProcalcitoPCTastoGuideAntibioticTherapyin

AdultPatientswithRespiratoryTractInfectionsDavidN.Gilbert,ClinicalInfectiousDiseases2011;52(S4):S346–S35018PCTastoGuideAntibioticTheG试验G试验检测的是真菌的细胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高（浅部真菌感染无类似现象）。

1-3-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。适用于除隐球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。以下情况可出现假阳性：（1）使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；（2）静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）链球菌血症；（4）操作者处理标本时存在污染。（5）另外，使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性，食用菌类，如蘑菇等食物可以导致假阳性。19G试验G试验检测的是真菌的细胞壁成分---(1,3)-β-DGM试验GM试验检测的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断，GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。连续检测GM可作为治疗疗效的监测。在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。以下情况可出现假阳性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性：（1）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。20GM试验GM试验检测的是半乳甘露聚糖（galactomann病原学诊断2、根据感染部位推测可能的病原体感染类型病原菌类别咽炎/扁桃体炎A群C群和G群链球菌★，坏死梭杆菌，淋病奈瑟菌，肺炎衣原体，白喉棒状杆菌，溃疡棒状杆菌，肺炎支原体，溶血性隐秘杆菌鼻窦炎肺炎链球菌★，流感嗜血杆菌★，金黄色葡萄球菌，卡他莫拉菌，混合厌氧菌和嗜氧菌感染，A群链球菌，肺炎嗜披衣菌，绿脓杆菌及其他革兰阴性杆菌会厌炎化脓性链球菌★，肺炎链球菌★，金黄色葡萄球菌，流感嗜血杆菌支气管炎百日咳鲍特菌★，肺炎支原体，肺炎衣原体，卡他莫拉菌，流感嗜血杆菌，铜绿假单胞菌，肺炎链球菌脓胸金黄色葡萄球菌★，肺炎链球菌★，A群链球菌，脆弱拟杆菌，肺炎克雷伯菌及其它肠杆菌菌，放线菌，奴卡氏菌，结核分枝杆菌及其它菌种肺炎肺炎链球菌★，肺炎克雷伯菌★，大肠埃希菌★，铜绿假单胞菌★，鲍曼不动杆菌★，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌★，卡氏肺孢子菌★，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌，军团菌，肺炎支原体，沙眼衣原体，肺炎衣原体，金黄色葡萄球菌，嗜麦芽窄食单胞菌，结核分支杆菌，奴卡菌，曲霉菌4．肺部特殊病原体感染：鼠疫耶尔森菌，放线菌，炭疽杆菌，球孢子菌，组织胞浆菌，结核分支杆菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隐球菌，洋葱伯克霍氏菌，马红球菌，立克次体21病原学诊断2、根据感染部位推测可能的病原体感染类型病原菌类别病原学诊断3、根据感染人群推测可能的病原体社区获得性感染：肺炎链球菌★，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌，军团菌，肺炎支原体，沙眼衣原体，肺炎衣原体，金黄色葡萄球菌医院获得性感染：肺炎克雷伯菌★，大肠埃希菌★，铜绿假单胞菌★，鲍曼不动杆菌★，嗜麦芽窄食单胞菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌★免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌★，结核分支杆菌，奴卡菌，曲霉菌肺部特殊病原体感染：鼠疫耶尔森菌，放线菌，炭疽杆菌，球孢子菌，组织胞浆菌，结核分支杆菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隐球菌，洋葱伯克霍氏菌，马红球菌，立克次体22病原学诊断3、根据感染人群推测可能的病原体22CAP、HAP的发病时间和病原体构成48h≤HAP早期<5天肺炎链球菌流感嗜血杆菌HAP中期≥5天HAP晚期MSSAorMRSA肠杆菌属肺炎克雷伯菌,大肠杆菌绿脓杆菌不动杆菌属嗜麦芽窄食假单胞菌35101520CAP<48h主要致病菌多为非多重耐药菌，预后好肺炎支原体G＋菌为主,G－菌比例较早发性HAP低20入院时间（天）多为多重耐药菌株ATS.AmJRespirCritCareMed.2005;171.388–41嗜肺军团菌23CAP、HAP的发病时间和病原体构成48h≤HAP早期<5病原学诊断4、根据可能的病原体选择检测方法培养： 细菌、真菌染色镜检： 结核分枝杆菌、真菌、肺孢子菌病原体鉴定： 生化鉴定、质谱分析（布鲁克、梅里埃）抗原检测： 肺炎链球菌（尿抗原）、军团菌（尿抗菌）、 病毒、支原体、衣原体、真菌抗体检测： 立克次体、军团菌PCR： 所有病原菌，尤其是难培养的细菌和病毒细胞因子检测：INF-γ24病原学诊断4、根据可能的病原体选择检测方法24培养基的选择增菌培养基：肉汤、碱性蛋白胨水基础培养基：营养琼脂、M-H琼脂选择培养基：麦康凯琼脂、SS琼脂鉴别培养基：胆汁七叶苷琼脂厌氧培养基：厌氧血平板接种方法肉汤增菌：血液、脑脊液等蛋白胨水增菌：粪便（弧菌）平板划线接种：其他标本（四区划线法）25培养基的选择接种方法25染色镜检直接镜检：湿片法或悬滴法，观察细菌动力革兰染色镜检：阳性（紫色）、阴性（红色）抗酸染色镜检：抗酸菌（红色）其它染色镜检：a.荚膜

b.鞭毛

c.异染颗粒26染色镜检直接镜检：湿片法或悬滴法，观察细菌动力26流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌27流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌27六胺银染色（肺孢子菌）PAS染色（肺诺卡菌）肺活检组织抗酸杆菌28六胺银染色（肺孢子菌）PAS染色（肺诺卡菌）肺活检组织抗酸杆生化鉴定利用细菌可以分解、发酵不同的底物： 葡萄糖、乳糖等糖类，氨基酸、盐类等产生不同的代谢产物的特性： 酸性、碱性、产气等等29生化鉴定利用细菌可以分解、发酵不同的底物：29质谱与传统细菌鉴定仪的区别质谱仪传统细菌鉴定仪鉴定方法MALDI-TOF传统微生物形态学、细菌生理生化特点操作流程直接细菌涂布标本板上，加上基质，上机细菌涂片、手工生化、比浊、上机鉴定板种类一种五种鉴定时间数分钟12-24h菌种常见细菌、分支杆菌、丝状真菌常见细菌成本25元55元30质谱与传统细菌鉴定仪的区别质谱仪传统细菌鉴定仪鉴定方法MAL抗原抗体检测31抗原抗体检测31分子诊断定性PCR

实时荧光定量PCR

多指标检测平台32分子诊断定性PCR32呼吸道感染常见病原体及检测方法肺炎病原体分子诊断平台BhatN，UseandEvaluationofMolecularDiagnosticsforPneumoniaEtiologyStudies.ClinicalInfectiousDiseases2012;54(S2):S153–833呼吸道感染常见病原体及检测方法肺炎病原体分子诊断平台Bhat肺炎病原体分子诊断平台的条件可满足条件必要条件可检测到变异的目标病原体可检测到目标病原体简易使用、流程和空间具有高分析敏感性和特异性报告时间快速具有高临床敏感性和特异性整个处理过程包含核算抽提能处理不同呼吸道样本小样本量也可检测明确样本采集要求有效期长且室温保存内含质控品及质控程序可提供定量或半定量结果提供必要的维护经认证机构注册具有可接收的发展时间框架有合理价格34肺炎病原体分子诊断平台的条件可满足条件必要条件可检测到变异的Antigen-specificTcellsLiuHY,HepatobiliaryPancreatDisInt2006;5(1):129-13235Antigen-specificTcellsLiuHY3636实验室检查的质量保证分析前影响因素分析中影响因素分析后影响因素37实验室检查的质量保证分析前影响因素分析中影响因素分Reviewoflaboratoryerrors38Reviewoflaboratoryerrors38BoniniP，Errorsinlaboratorymedicine.ClinChem2002;48(5):69139BoniniP，Errorsinlaboratory沟通与合作非常重要正确的临床思维是指导选择适当的临床检验方法的前提寻找病原体源头所在、多方协作、倾力寻找“对症”治疗没有最好的药物，只有最正确的选择临床疗效是最高的肯定和奖励病原菌越来越刁钻，每一个患者都是一本书，我们从中学到知识，获得乐趣40沟通与合作非常重要正确的临床思维40谢谢!41谢谢!41肺部感染的实验室检查第二军医大学长征医院全军临床免疫研究所仲人前42肺部感染的实验室检查第二军医大学长征医院仲人前1肺部感染的临床特点

肺部感染的发生过程

肺部感染实验室检查

实验室检查质量保证报告提纲43肺部感染的临床特点

肺部感染的发生过程

肺部感染实验室检查

肺部感染的临床特点肺部感染临床症状相似，以咳嗽、咳痰为主感染的病原体繁多，不同年龄，不同季节，不同环境，不同基础疾病感染的病原体不同针对不同的病原体应采取针对性的治疗方法44肺部感染的临床特点肺部感染临床症状相似，以咳嗽、咳痰为主3肺部感染的发生过程遗传因素环境因素免疫因素肺部感染病原体45肺部感染的发生过程遗传因素环境因素免疫因素肺部感染病原体4病原体感染的易感基因AdrianVSHill,

PhilTransRSocB(2012)367,840–84946病原体感染的易感基因AdrianVSHill,Phil肺部感染的环境因素生物燃料吸烟空气污染滥用抗生素免疫抑制剂气候变化RobertJ.Laumbach,JAllergyClinImmunol.2012January;129(1):3–13JoonYoungSong.JKoreanMedSci2013;28:4-1547肺部感染的环境因素生物燃料RobertJ.LaumbaEffectofcigarettesmokeoninflammationJ.Lee,JDentRes.2012;91(2):142–14948Effectofcigarettesmokeoni肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithelialcellsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:79139249肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithel肺部感染的免疫因素EpithelialcellproducedchemokinesandcytokinesagainstbacteriainfectionsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:79139250肺部感染的免疫因素Epithelialcellprodu肺部感染常见病原体类型细菌性肺炎如肺炎链球菌、甲型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、埃希大肠杆菌、结核杆菌等真菌性肺炎如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等病毒性肺炎如冠状病毒、腺病毒、流感病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等非典型性肺炎如军团菌、支原体和衣原体等其它病原体所致的肺炎如立克次体、弓形虫、原虫、寄生虫如肺包虫、肺吸虫、肺血吸虫）等51肺部感染常见病原体类型细菌性肺炎如肺炎链球菌、甲型溶血性链英国肺炎病原体病原体占肺炎病因%临床表现肺炎链球菌50社区、既往健康肺炎支原体6同上流感病毒A5同上流感嗜血杆菌5基础肺病：COPD肺炎衣原体5社区获得性肺炎鹦鹉热衣原体3接触鸟类金黄色葡萄球菌2儿童、毒品、流感病毒相关军团菌2公共场所爆发、散发、地方流行伯纳特立克次体1屠宰场和皮革工人铜绿<1囊性纤维化卡氏肺孢子菌<1AIDS、淋巴瘤、白血病、使用细胞毒药物及糖皮质激素衣氏放线菌星型诺卡菌CMV、烟曲霉、厌氧菌<1吸入性肺炎、酗酒、手术后未分离到病原菌2052英国肺炎病原体病原体占肺炎病因%临床表现肺炎链球菌50社区、肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染2、根据感染部位推测可能的病原体3、根据感染人群推测可能的病原体4、根据可能的病原体选择检测方法53肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染12肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染血常规CRPPCT内毒素G试验，GM试验54肺部感染的实验室检查1、根据检验常规初步判定是否感染13血常规检查55血常规检查14CRP（CreactiveProtein）与肺炎链球菌C多糖体反应是一种重要的急性时相反应蛋白血清CRP由肝脏合成,半衰期19小时IL-1、IL-6、TNF是其最重要的调节因子56CRP（CreactiveProtein）与肺炎链球菌DiagnosticaccuracyofCRPincombinationwithIL-6andIL-8NoraHofer,Neonatology2012;102:25–3657DiagnosticaccuracyofCRPinPCT（procalcitonin）Procalcitonin（降钙素原）由细菌内毒素诱导产生升高：严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭不升高：自身免疫、过敏和病毒感染不升高：局部有限的细菌感染、轻微感染和慢性炎症58PCT（procalcitonin）ProcalcitoPCTastoGuideAntibioticTherapyin

AdultPatientswithRespiratoryTractInfectionsDavidN.Gilbert,ClinicalInfectiousDiseases2011;52(S4):S346–S35059PCTastoGuideAntibioticTheG试验G试验检测的是真菌的细胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高（浅部真菌感染无类似现象）。

1-3-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。适用于除隐球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。以下情况可出现假阳性：（1）使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；（2）静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）链球菌血症；（4）操作者处理标本时存在污染。（5）另外，使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性，食用菌类，如蘑菇等食物可以导致假阳性。60G试验G试验检测的是真菌的细胞壁成分---(1,3)-β-DGM试验GM试验检测的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断，GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。连续检测GM可作为治疗疗效的监测。在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。以下情况可出现假阳性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性：（1）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。61GM试验GM试验检测的是半乳甘露聚糖（galactomann病原学诊断2、根据感染部位推测可能的病原体感染类型病原菌类别咽炎/扁桃体炎A群C群和G群链球菌★，坏死梭杆菌，淋病奈瑟菌，肺炎衣原体，白喉棒状杆菌，溃疡棒状杆菌，肺炎支原体，溶血性隐秘杆菌鼻窦炎肺炎链球菌★，流感嗜血杆菌★，金黄色葡萄球菌，卡他莫拉菌，混合厌氧菌和嗜氧菌感染，A群链球菌，肺炎嗜披衣菌，绿脓杆菌及其他革兰阴性杆菌会厌炎化脓性链球菌★，肺炎链球菌★，金黄色葡萄球菌，流感嗜血杆菌支气管炎百日咳鲍特菌★，肺炎支原体，肺炎衣原体，卡他莫拉菌，流感嗜血杆菌，铜绿假单胞菌，肺炎链球菌脓胸金黄色葡萄球菌★，肺炎链球菌★，A群链球菌，脆弱拟杆菌，肺炎克雷伯菌及其它肠杆菌菌，放线菌，奴卡氏菌，结核分枝杆菌及其它菌种肺炎肺炎链球菌★，肺炎克雷伯菌★，大肠埃希菌★，铜绿假单胞菌★，鲍曼不动杆菌★，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌★，卡氏肺孢子菌★，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌，军团菌，肺炎支原体，沙眼衣原体，肺炎衣原体，金黄色葡萄球菌，嗜麦芽窄食单胞菌，结核分支杆菌，奴卡菌，曲霉菌4．肺部特殊病原体感染：鼠疫耶尔森菌，放线菌，炭疽杆菌，球孢子菌，组织胞浆菌，结核分支杆菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隐球菌，洋葱伯克霍氏菌，马红球菌，立克次体62病原学诊断2、根据感染部位推测可能的病原体感染类型病原菌类别病原学诊断3、根据感染人群推测可能的病原体社区获得性感染：肺炎链球菌★，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌，军团菌，肺炎支原体，沙眼衣原体，肺炎衣原体，金黄色葡萄球菌医院获得性感染：肺炎克雷伯菌★，大肠埃希菌★，铜绿假单胞菌★，鲍曼不动杆菌★，嗜麦芽窄食单胞菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌★免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌★，结核分支杆菌，奴卡菌，曲霉菌肺部特殊病原体感染：鼠疫耶尔森菌，放线菌，炭疽杆菌，球孢子菌，组织胞浆菌，结核分支杆菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隐球菌，洋葱伯克霍氏菌，马红球菌，立克次体63病原学诊断3、根据感染人群推测可能的病原体22CAP、HAP的发病时间和病原体构成48h≤HAP早期<5天肺炎链球菌流感嗜血杆菌HAP中期≥5天HAP晚期MSSAorMRSA肠杆菌属肺炎克雷伯菌,大肠杆菌绿脓杆菌不动杆菌属嗜麦芽窄食假单胞菌35101520CAP<48h主要致病菌多为非多重耐药菌，预后好肺炎支原体G＋菌为主,G－菌比例较早发性HAP低20入院时间（天）多为多重耐药菌株ATS.AmJRespirCritCareMed.2005;171.388–41嗜肺军团菌64CAP、HAP的发病时间和病原体构成48h≤HAP早期<5病原学诊断4、根据可能的病原体选择检测方法培养： 细菌、真菌染色镜检： 结核分枝杆菌、真菌、肺孢子菌病原体鉴定： 生化鉴定、质谱分析（布鲁克、梅里埃）抗原检测： 肺炎链球菌（尿抗原）、军团菌（尿抗菌）、 病毒、支原体、衣原体、真菌抗体检测： 立克次体、军团菌PCR： 所有病原菌，尤其是难培养的细菌和病毒细胞因子检测：INF-γ65病原学诊断4、根据可能的病原体选择检测方法24培养基的选择增菌培养基：肉汤、碱性蛋白胨水基础培养基：营养琼脂、M-H琼脂选择培养基：麦康凯琼脂、SS琼脂鉴别培养基：胆汁七叶苷琼脂厌氧培养基：厌氧血平板接种方法肉汤增菌：血液、脑脊液等蛋白胨水增菌：粪便（弧菌）平板划线接种：其他标本（四区划线法）66培养基的选择接种方法25染色镜检直接镜检：湿片法或悬滴法，观察细菌动力革兰染色镜检：阳性（紫色）、阴性（红色）抗酸染色镜检：抗酸菌（红色）其它染色镜检：a.荚膜

b.鞭毛

c.异染颗粒67染色镜检直接镜检：湿片法或悬滴法，观察细菌动力26流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌68流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌27六胺银染色（肺孢子菌）PAS染色（肺诺卡菌）肺活检组织抗酸杆菌69六胺银染色（肺孢子菌）PAS染色（肺诺卡菌）肺活检组织抗酸杆生化鉴定利用细菌可以分解、发酵不同的底物： 葡萄糖、乳糖等糖类，