植物病害与生物技术组

2014年度课题进展汇报植物病害与生物技术课题组汇

报

内

容一、科研进展二、科研业绩技术研发基础研究疫病检测监测技术病菌变异机制病菌致病机理防控技术开发一、科研进展示范应用应用研究研究进展一：致病相关功能解析去年完成的工作：的筛选、同源序列比对及1.磷脂转运蛋白功能域分析生长不同阶段及侵染不同时间转录表达分析沉默载体构建及PEG介导原生

转化今年的工作：沉默转化子半定量及定量PCR验证沉默对辣椒疫霉菌生长及致病的影响沉默对辣椒疫霉菌侵染能力的分析1.1

沉默转化子半定量及定量PCR验证NbPepper1.2

沉默对辣椒疫霉菌生长及致病的影响1.3

沉默对辣椒疫霉菌侵染能力的分析研究进展二：疫霉菌群体遗传结构及毒性变异去年完成的工作：1.大豆疫病样本并分析180个大豆疫霉菌株的遗传结构2.分析120个大豆疫霉菌株毒性变异今年的工作：分离纯化150个大豆疫霉菌株测定100个大豆疫霉菌株毒性组成及抗药性分析150个大豆疫霉菌株遗传多样性注：植株（S）；植株率≤30%，记为抗病（R）；植株

率≥70%，记为感病率在30%-70%之间，记为中间型（I).2.1

致病性分析结果福建地区大豆疫霉菌株对嘧菌脂、甲霜灵、烯酰吗啉等药剂均表现为敏感。10天福建大豆疫霉菌耐药性检测结果0.693

(<

0.002)

**1.836

(<

0.002)

**0.784

(<0.002)

**3.834

(<0.002)

**0.405(<

0.002)

**0.498

(<

0.002)

**0.812

(<

0.002)

**-0.012

(0.446)1.626(<

0.002)

**1.205

(<

0.002)

**1

026

(0

016)

*-0.262(1.000)BS13Bangshan,

FJPlantBS12Bangshan,

FJPlantBS10Bangshan,

FJPlantBS08Bangshan,

FJPlantHC13Haicheng,

FJPlantHC10Haicheng,

FJPlantGW10Gangwei,

FJPlantGW07Gangwei,

FJPlantBAIS04Baishui,

FJPlantJLJiling,

JLPlantAHAnhui,

AHPlantHLJ11Heilongjiang,

HLJPlantHLJ08Heilongjiang,

HLJPlantTotalCodePopulation(location,

province)SampleoriginYearisolationNHaplot-ypeHo(SE)Allelicrichness(SE)+IA(pvalue)YY13Yun ,

FJPlant201334220.049(0.020)4.333(1.000)0.777(<0.002)**YY12Yun ,

FJPlant201221100.026(0.014)2.444(0.377)0.099

(0.288)YY08Yun ,

FJSoil2008770.111(0.078)3.556(0.530)1.328

(<0.002)

**YY07Yun ,

FJPlant2007750.000(0.000)2.667(0.333)1.595(0.008)

**201357470.103(0.024)5.111(1.086)201220110.056(0.018)3.222(0.434)201032260.077(0.019)4.444(1.069)2008750.143(0.092)2.667(0.333)201328250.107(0.030)5.444(1.281)201032310.058(0.022)4.111(0.807)201037240.036(0.012)3.222(0.619)2007550.067(0.033)3.000(0.289)200412100.065(0.030)3.667(0.577)2008990.160(0.100)4.00(0.667)2008550.200(0.082)2.889(0.351)20111280.292(0.125)1.556(0.242)20080.085(0.055)4.667(0.816)0.564(0.002)

**.091(0.014)

3.494(0.175) -0.523

(<

0.002)

**在17个群体的IA中有13个极显著和1个显著偏离0，只有3个群体的IA值较接近于0（YY12、GW07

、HLJ11），且所有群体的IA值极显著地偏离0，说明在整个群体存在着无性生殖或者是近亲交配。2.2

遗传多样性分析Structure

聚类分析STRUCTRUE

分析结果表明，当k=2时，Delta

k值最大可以推断所有大豆疫霉群体可以分为2个类群注：Bootstrap=100；蓝色字体表示福建地区p.sojae

群体黑色字体表示东北地区群体；Cluster

BCluster

ANJ聚类分析研究进展三：重要植物病原菌检测技术开发前期工作：1.10多种植物病原菌检测技术的研发2.以钙黄绿素为指示剂的LAMP检测平台建立今年的工作：辣椒疫霉菌LAMP检测技术的开发黄曲霉菌LAMP检测技术的开发3.1

辣椒疫霉菌LAMP检测技术的开发特异性人工接种和自然发病样品检测能从人工接种和自然发病的样本中检测到病原菌ITSaflP分别只在阳性样本中有显色反应，非常特异，能区分近缘种3.2

黄曲霉菌LAMP检测技术的开发ITS-和aflP-LAMP引物灵敏性验证ITSaflP10fg1

pg灵敏度达10

fg和1pg研究进展四：大豆疫病及马铃薯晚疫病防治去年完成的工作：拮抗放线菌的筛选及鉴定明确新型植物激发子亚磷酸盐对致病疫霉菌的拮抗作用今年的工作：大豆疫霉菌拮抗放线菌发酵条件优化

新型植物激发子亚磷酸盐对马铃薯晚疫病的防治4.1

大豆疫霉菌拮抗放线菌发酵条件优化St19属链霉菌

1ml/100ml4.2

马铃薯晚疫病的防治Ck

(10

Day)银法利(10Day)Phi

(10

Day)银法利+phi(10

Day)小区发病及生长对比Ck

(10

Day)Phi+银法利

(10Day)银法利

(10Day)phi

(10

Day)研究进展五：服务三农参与项目“屏南花菜长期连作下土壤及病虫害综合防控技术示范”不处理氟啶胺处理“双百行动”帮助龙海格林解决了其毛豆疫病防控难

的实际问题，减少了毛豆疫病的危害，提高出口品质，促进农民增收。2015年度工作计划检测及群体遗传变异致病相关功能研究防治技术及药剂开发疫霉防控植物病害与生物技术课题组2014年度业绩报表新立项目序号项目名称项目类型项目来源经费（万元）1重要植物有害生物快速检测技术及试剂盒的应用与示范农业部科技成果转化项目农业部602钙离子通道蛋白在辣椒疫霉菌生长发育及致病过程中的作用机制国家自然科学基金基金委253马铃薯寄主群体遗传结构在致病疫霉进化中的作用机理973计划前期研究专项子项目科技部104马铃薯晚疫病菌适应寄主抗性选择压力的微进化研究福建省自然科学基金省科技厅45辣椒疫霉菌热激转录因子基因克隆及功能研究福建省自然科学基金省科技厅36院科技英才双百计划院科技英才基金农科院107设施蔬菜病虫害综合防控技术集成与示范农科院双百项目农科院28屏南花菜病虫害综合防控技术示范农科院

项目农科院文章序号题目第一作者/通讯作者1Development

and

evaluation

of

ITS

andaflP

based

LAMP

assay

for

rapid

detection

ofAspergillus

flavus

in

food

samplesCanadian

Journalof

microbiology/2Specific

and

sensitive

detection

of

Phytophthora

nicotianae

by

nested

PCR

andloop-mediated

isothermal

amplification

assaysJournal

ofPhytopathology李本金/3烟草青枯病菌巢式PCR检测方法的建立及应用热带作物学报李本金/投稿文章序号题目第一作者/通讯作者备注1Development

of

a

loop-mediatedisothermal

amplification

assayfor

sensitive

and

rapid

detectionof

Phytophthora

capsiciCanadianJournal

ofPlantPathology/正返修中2基于毒素编码

aflp的黄曲霉菌巢式PCR检测福建农业学报/已接收知识序号名称类型人1香蕉枯萎病菌4号小种的LAMP检测引物及其应用国家发明专利福建省农业

植物保护2一种烟草疫霉菌分子检测引物及其检测方法国家发明专利福建省农业

植物保护3一种黄瓜疫霉菌LAMP引物及其快速检测方法国家发明专利福建省农业

植物保护申报知识序号名称类型人1一种烟草疫霉菌LAMP引物及其快速检测方法国家发明专利福建省农业

植物保护制订序号标准名称标准第一完成单位申报序号标准名称标准第一完成单位1菜用大豆疫病防治技术规程福建省农科院植保所2冬种马铃薯晚疫病防治技术规程福建省农科院植保所成果序号获奖项目名称等级1重要植物有害生物快速检测技术及试剂盒的研发与应用福建省科学技术进步奖一等奖评审成果或序号获奖项目名称等级1大豆疫霉菌分子检测技术规程福建省贡献