IPT的临床应用和报告解读学习培训课件

NIPT的临床应用和报告解读NIPT开展规范解读案例分享目录Contents020301NIPT介绍01NIPT技术介绍孕妇外周血胎儿游离DNA的发现PresenceoffetalDNAinmaternalplasmaand

serumLo,Y.M.;Corbetta,N.;Chamberlain,P.F.;Rai,V.;Sargent,I.L.;Redman,C.W.;Wainscoat,J.S.Lancet1997350(9076):

485-4871997年，香港中文大学的卢煜明教授等在《柳叶刀》(Lancet)上，报道了在怀有男胎孕妇的外周血中检测到了Y染色体的存在，从而证明了孕妇外周血中存在来自胎儿的游离DNA。卢煜明获2021

年科学突破奖生命科学奖无创产前检测之父孕妇外周血中胎儿游离DNA来源和特点KristinE.Webb,BS,RDMS1.DetectionofFetalAneuploidyUsingCell-FreeDNA:ALiteratureReview胎儿cffDNA的来源：孕妇外周血含有cffDNA几乎全部来源于胎盘滋养细胞孕妇外周血中cffDNA含量约在5-30%胎儿cffDNA的基本特点：DNA片段较小，大小一般位于150-200bp之间，平均长度为166bp左右怀孕第4周即可检出，8周后含量上升并稳定（7周建立胎儿胎盘循环）分娩后短时间内消失，平均半衰期为16min，分娩后2h就无法检胎儿游离DNA：cell-free

fetal

DNA(cffDNA)出，再次妊娠不影响检测存在个体差异NIPT:

Non-Invasive

PrenatalTesting无创产前基因检测抽取母体血液和分离游离DNA对游离DNA进行测序通过生物信息学分析评估胎儿患21三体综合征、18三体综合征、13三体综合征的风险NIPT：孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查，俗称无创产前基因检测，是应用高通量基因测序技术检测孕期母体外周血中胎儿游离DNA片段，以评估胎儿常见染色体非整倍体异常风险。根据目前技术发展水平，NIPT的目标疾病为3种常见胎儿染色体非整倍体异常，即21三体综合征、18三体综合征、13三体综合征。检测适宜孕周：12+0～22+6周。02NIPT开展规范解读NIPT项目开展规范NIPT项目开展机构/人员要求采血从事NIPT专业技术人员：经省级卫生行政部门批准，取得从事产前筛查/诊断的《母婴保健技术考核合格证书》备案采血本院检测或与第三方检测机构合作产前诊断机构（分子遗传资质）产前筛查机构产前诊断机构（无分子遗传资质）其余机构或个人不得开展孕妇外周血胎儿游离DNA采血、实验室检测、相关临床技术等服务。未经备案不得开展孕妇外周血胎儿游离DNA采血、实验室检测、相关临床技术等服务。签订合作协议NIPT违规开展处罚案例NIPT违规开展处罚案例NIPT违规开展处罚案例合法合规开展NIPTNIPT是一项好的技术更须合法合规开展避免医疗纠纷目标疾病/适宜时间适用/慎用/不适用人群检测前咨询及知情同意检测信息采集/标本采集/检测/报告发放检测后咨询/妊娠结局随访检测前咨询及知情同意

适用人群1、血清学筛查显示胎儿常见染色体非整倍体风险值介于高风险切割值与1/1000之间的孕妇。2、有介入性产前诊断禁忌证者（如先兆流产、发热、出血倾向、慢性病原体感染活动期、孕妇Rh阴性血型等）。3、孕20+6周以上，错过血清学筛查最佳时间，但要求评估21三体综合征、18三体综合征、13三体综合征风险者。孕妇在充分知情同意情况下，可选择孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测。慎用人群1、早、中孕期产前筛查高风险。2、预产期年龄≥35岁。3、重度肥胖（体重指数>40）。4、通过体外受精—胚胎移植方式受孕。5、有染色体异常胎儿分娩史，但除外夫妇染色体异常的情形。6、双胎及多胎妊娠。7、医师认为可能影响结果准确性的其他情形。有下列情形的孕妇进行检测时，检测准确性有一定程度下降，检出效果尚不明确；或按有关规定应建议其进行产前诊断的情形。在充分告知并知情同意的前提下仍自愿要求进行检测的孕妇，可选择孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测。检测前咨询及知情同意不适用人群1、孕周＜12+0周。2、夫妇一方有明确染色体异常。3、1年内接受过异体输血、移植手术、异体细胞治疗等。4、胎儿超声检查提示有结构异常须进行产前诊断。5、有基因遗传病家族史或提示胎儿罹患基因病高风险。6、孕期合并恶性肿瘤。7、医师认为有明显影响结果准确性的其他情形。检测前咨询及知情同意有下列情形的孕妇进行检测时，可能严重影响结果准确性。豫卫办[2018]84号文，相关机构和人员不得对“不适用人群”进行孕妇外周血胎儿游离DNA采血与检测。检测前咨询及知情同意对符合适用人群情形并自愿进行检测的，或符合慎用人群情形但在充分告知并知情同意的前提下仍自愿要求进行检测的孕妇，医师应当对孕妇本人及其家属详细告知该检测的目标疾病、目的、意义、准确率、局限性、风险以及其他筛查与诊断方案，与孕妇本人或其家属签署知情同意书并填写申请单。检出率T21检出率不低于95%T18检出率不低于85%T13检出率不低于70%假阳性率T21、T18、T13的复合假阳性率不高于0.5%检测失败率由于凝血、溶血、DNA质量控制不合格等标本原因造成的检测失败率不超过5%146958例孕妇NIPT筛查结果真阳性

假阳性假阴性 灵敏度（检出率）特异性阳性预测值阴性预测值检测前咨询及知情同意NIPT不能评估胎儿神经管缺陷风险！对未接受中孕期血清学筛查直接选择孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测的孕妇，应当在中孕期进行胎儿神经管缺陷风险评估。检测后咨询及报告解读010203低风险建议定期进行常规产前检查高风险遗传咨询，转诊至产前诊断机构进行产前诊断低风险，但存在影像学检查异常遗传咨询，转诊至产前诊断机构进行产前诊断90%100%妊娠结局随访1、随访率2、随访内容低风险孕妇 高风险孕妇随访应至少至分娩后12周，有条件的可随访至分娩后1年。后期流产、引产、早产或足月产、死产、死胎等妊娠结局，是否为21三体综合征、18三体综合征、13三体综合征患儿，有条件的可将后期流产、死胎的遗传学诊断纳入妊娠结局随访内容。03病例分享案例1

——NIPT低风险，超声提示异常，产前诊断为唐氏儿张芹,等.

无创产前检测胎儿染色体非整倍体假阴性两例[J].中华医学遗传学杂志,

2017,034(006):884-887.孕妇27岁，G1P0，孕18周血清学筛查：21三体高风险（1/55）NIPT：低风险孕24周B超检查：胎儿鼻骨发育不全、左肾窦分离产前诊断脐血穿刺：胎儿染色体核型分析为易位型21三体无创低风险不代表胎儿一定没问题！后续超声异常要做产前诊断，避免漏诊！案例2

——NIPT提示性染色体异常，产前诊断胎儿为15号染色体异常孕妇，36岁，G2P1，NT

2mm/CRL66mmNIPT：提示性染色体异常可能产前诊断羊水穿刺：胎儿染色体核型分析为未见异常（46,XN），基因芯片检测到胎儿15q13.3区段存在432.5kb重复孕妇基因芯片结果：

45,X[36%]/46,XX[64%]嵌合型携带者，15q13.3区段存在432.5kb重复无创高风险不代表胎儿一定有问题！也可能是孕妇本人的染色体异常导致！NIPT高风险一定要做产前诊断，避免误诊！案例3

——NIPT提示16号染色体异常，胎盘的问题孕妇，28岁NIPT：提示16号染色体异常产前诊断羊水穿刺：胎儿染色体核型分析、基因芯片未见异常孕32周B超：胎儿严重宫内生长受限，小于同孕龄4个标准差引产，经基因芯片检查，胎盘为16三体无创高风险不代表胎儿一定有问题！也可能是胎盘的染色体异常导致胎儿严重FGR！NIPT高风险一定要做产前诊断，并持续超声随访，避免误诊/漏诊！案例4

——NIPT低风险，产前诊断为18三体综合征北京协和医院病例唐筛低风险超声提示异常NIPT低风险产前诊断为18三体综合征引产胎盘染色体为正常--摘自北京协和医院蒋宇林摇椅足北京协和医院NIPT假阳性病例无创高风险不代表胎儿一定有问题！NIPT高风险一定要做产前诊断，避免误诊！--摘自北京协和医院蒋宇林造成NIPT假阳性或假阴性的原因胎儿游离DNA含量低孕周过早、孕妇体重过重、IVF-ET妊娠、双胎母体染色体CNV改变母体染色体异常、母体CNV异常、母体染色体嵌合胎儿/胎盘染色体不一致局限性胎盘嵌合、胎盘正常但胎儿异常外源性或特殊游离DNA干扰双胎之一停育、外源性输血、淋巴细胞免疫治疗、母体肿瘤、母体免疫系统疾病其他原因测序深度、数据分析、人为错误NIPT只是一种筛查方法，存在假阳性和假阴性，不能以NIPT