生物选修三复习

1、基因工程的概念（又叫做DNA重组技术）操作：生物体外DNA分子水平

优点：目的性强，定向改造生物的性状。专题1基因工程2、基因工程的原理：基因重组3、基因工程的基本工具限制酶

DNA连接酶载体①分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）来源：主要是从原核生物中分离

功能：识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。结果：黏性末端和平末端。一种限制酶识别一种序列，不同的限制酶识别不同序列。②.“分子缝合针”——DNA连接酶

E·coliDNA连接酶来源：大肠杆菌作用：黏性末端之间的磷酸二酯键T4DNA连接酶

来源：T4噬菌体作用：能缝合两种末端，但连接平末端的效率较低。DNA聚合酶：只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶：是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。③.“分子运输车”——载体载体具备的条件：A.能在受体细胞中复制并稳定保存。B.具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。C.具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。最常用的载体：质粒,

结构简单的、具有自我复制能力的双链环状DNA分子。载体种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒4、基因工程的基本操作程序（1）目的基因的获取目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。基因文库中获取（基因组文库，cDNA文库）目的基因转录的mRNA----单链DNA----双链DNA反转录酶蛋白质的氨基酸序列----mRNA序列-----结构基因的核苷酸序列------目的基因推测化学合成推测PCR技术扩增——原理：双链DNA复制条件：引物模板DNA四种脱氧核苷酸热稳定DNA聚合酶过程：第一步：加热90～95℃氢键断裂，DNA解链；第二步：冷却55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热70～75℃，DNA聚合酶从引物起合成互补链。化学合成法（基因小、核酸序列已知）（2）基因表达载体的构建（核心）目的：使目的基因能够表达和发挥作用。组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因

启动子：DNA片段，能驱动基因转录出mRNA终止子：DNA片段，位于基因的尾端。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因常用的标记基因是抗生素基因。（3）将目的基因导入受体细胞转化的概念：

导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，基因枪法和花粉管通道法等。导入动物细胞：显微注射技术。受体细胞多是受精卵。导入微生物细胞：Ca2+处理法（4）目的基因的检测和表达转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法DNA分子杂交技术。

目的基因是否转录出了mRNA，分子杂交技术.

目的基因是否翻译成蛋白质，抗原－抗体杂交。有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如：是否出现抗虫，抗病性状。5、基因工程的应用植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用6、蛋白质工程①概念

对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质

②蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质③蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。④基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因人工合成法

）1．科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。(1)过程①表示的是采取

的方法来获取目的基因。其过程可表示为：___________________________反转录法将其涂布含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入，反之则没有导入普通质粒A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因有的能生长，有的不能生长(3)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生的现象是

，原因是：

。（2）检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是_____________________________，理由是：_____________________。

导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒A上有四环素抗性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能。(4)人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子能进行重组说明_____________________________________它们的DNA具有相同的结构和组成成分三、（1）将含有目的基因的DNA与质粒分别用__限制酶___切割，酶切产物需用__DNA连接酶____进行连接，其作用部位是_磷酸二酯键_____其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有

目的基因—载体连接物、载体--载体连接物、目的基因--目的基因连接物三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行

分离纯化

。（2）培养转基因植物时，常用

质粒

做运载体。它具备运载体的哪些条件？①

；②

③