生物土壤中分离尿素的细菌的分离及计数课程新人教选修

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与记数一、背景知识测定微生物数量的方法：直接计数法：最常用的显微镜直接计数法。先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。缺点：难以计数微小的细菌。一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。

间接计数法：最常用稀释平板计数法。含菌数较少的情形下，也可以完成计数。实践案例

土壤中好气性细菌的计数测定土壤中的含菌量可以作为判定土壤肥力的一个重要指标。活动程序：

1、制备土壤稀释液

①取土壤表层土样②称取1g土样，放入99ml无菌水锥形瓶中，振荡20min，即成100倍稀释液。③移液、稀释

1ml无菌移液管吸取100倍稀释液0.5，移入装有4.5ml无菌水试管中，配制成1000倍稀释液。用同样方法可制成的系列稀释菌液。2、取样及倒平板①培养皿编号：各编号三个培养皿。②培养皿中加入土壤稀释液：用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤稀释液各0.2ml。③每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15ml，转动培养皿，使土壤稀释液与培养基混合均匀。

3、培养

将平板冷却倒置放入28~30摄氏度的恒温培养箱中培养。

4、观察记录

每个培养皿内菌落数不能太多或太少。细菌、放线菌每个培养皿30~300个菌落为宜，霉菌10~100个为宜。

练一练测定土壤中细菌数量一般选倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量，一般选用100、1000、倍稀释，其原因是（）

A细菌个体小，真菌个体大

B细菌易稀释真菌不易稀释

C细菌在土壤中含量比真菌高

D随机的，没有原因

C每克土壤样品菌数=某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数÷细菌培养时所用的稀释液体积

练一练

某同学在稀释倍数为的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）()

A.2.34××

B

练一练

用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）

A.比实际值高

B.比实际值低

C.和实际值一致

D.比实际值可能高也可能低B探究活动

测定特定样品中的微生物数量1.检测天然水源中细菌总数和大肠菌群数人的粪便中含有致病菌，但是因数量少而不易检测。大肠杆菌是生存于人体肠道中的正常菌群，且能够与致病菌混杂生长。如果食品和饮用水中出现大肠杆菌，就意味着食物可能被粪便污染而带上致病菌。因而常将大肠杆菌数量作为食品卫生的检测指标之一。大肠菌群是指在37摄氏度条件下，24小时内能发酵乳糖，产酸产气的一类兼性厌氧型革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称。大肠菌群数的检测，使用乳糖胆盐蛋白胨培养基、EMB培养基、乳糖发酵管。活动背景EMB培养基与大肠杆菌代谢产物产生紫色带金属光边的菌落2.土壤中分解尿素细菌的计数有些细菌含有尿素分解酶，能将尿素琼脂培养基中的尿素分解生成氨，氨溶于水变成氢氧化铵，导致培养基变成碱性，使酚红指示剂呈现红色。下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()

A.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水

C.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水

D.

KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水练一练A；

申博创赢会wrf39xuz凌娢心里这样想，她还想知道笑点在哪里呢。“你放心的笑，我保证不打死你。”说完这句话，她突然感觉自己好作死。“哈哈哈……谈人生还是谈理想……亏你想得出来……谁会找你谈那种东西啊……”好想打他啊……真的好想打他……慕容凌娢感觉自己此时已经石化，尴尬癌都犯了。“那个……”慕容凌娢皱了皱眉，强壮镇定的问道，“你到底想干什么？”“想你了，过来看看。”“装，你继续装！”慕容凌娢轻蔑的看着韩哲轩。我就不信情节能发展的那么快。“骚年啊～好说咱们认识那么久了，我已经彻底明白你的套路了。”抿了一口茶，慕容凌娢一副老谋深算的样子，“你看似是为了刷存在感而出现，其实每一次的出现都能引起一系列的连锁反应。比如说我第一次遇到你……”“等等，这里不需要回忆杀！”韩哲轩急忙拦住了她，“本来每一章的内容已经很短小了，你在这个样子回忆下去，岂不是又要水好几章了吗。我知道你要表达什么，是不是蝴蝶效应啊……”“错！都什么年代了……”“晴朝焘禄年间。”“你还能想出‘蝴蝶效应’这么难听的命名词……”“也可以叫‘拓扑学连锁反应’。”“嗯嗯……这个听起来很有水平。不过……”慕容凌娢沉思了片刻，“它应该有一个更霸气的名称，就叫--慕容凌娢定律，又名--配角光环论。”“哦……呵呵……那……你就当什么也没听见就好了。”停顿时间累计达到九秒，韩哲轩才回过神来，“我想让你帮个忙。”“杀人放火之事我绝对不干，我可是大天朝的一等良民。”“当然不是那种事情。”要是找你办那种事情，除非我脑子里进水银了。韩哲轩换上了关怀备至的笑容，这表情让慕容凌娢有些心虚，不会是什么丧尽天良的行为吧……只间韩哲轩慢慢把手从身后拿出，笑容更加和蔼，把一个圆饼型的东西按在了桌子上。他难不成穿越的时候带了炸弹！慕容凌娢第一反应就是往后退，随时可以从二楼跳下去。“你干什么啊。”韩哲轩很奇怪的看着已经溜到窗边的慕容凌娢，“放心吧，这只是一个充电宝，绝对没有辐射。”“充电宝？怎么不早说。”一听没有危险，慕容凌娢马上又凑了过来。这真的只是一个普通的充电宝，呈盾牌状，正面有红白蓝三色的圆环，正中间还有一颗白色的五角星。“这充电宝还真是特别啊(居然专门给了它整整41字的特写)。”想到自己从出场到现在，似