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文档简介

电化学发光免疫分析法介绍

亚洲心脏病医院检验科刘泽金免疫学基本概念免疫标记技术用放射性元素、荧光素、酶、发光底物标记抗原或抗体,与标本中的相应抗体或抗原反应,通过测定带有标记物的抗原抗体复合物,来间接测定标本中的抗体或抗原。标记物的放大效应可以极大提高反应的灵敏度。AgAb标记物免疫学检验三大历程碑

70年代酶联免疫吸附测定方法(ELISA)基本原理:

缺点

包被不均一操作步骤复杂,耗时长,难以自动化结果重复性不好线性范围窄80年代

化学发光免疫测定法(CLIA)是以化学发光剂、催化发光酶或间接物质标记抗体或抗原,当标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体结合后,加入氧化剂或者发光底物,使反应体系发光,用发光光度计进行检测。缺点标记物易裂变,试剂不稳定闪烁性发光,光信号不稳定

90年代最新技术电化学发光免疫测定(ECL)技术原理:

用二价的三氯联吡啶钌[Rubpy3]2+标记抗原或抗体,与标本中的抗体或抗原结合,然后在电场的作用下发生电化学发光反应,产生的光强度与标本中代测物质的浓度成线性关系。

试剂盒实样分子结构简单,分子量小,易标记可标记任何抗原,半抗原,抗体,甚至核酸稳定性强水溶性强无本底噪音干扰可重复发光标记物—三联吡啶钌适用于包被各种化合物,如多肽、脂多糖等。亲和素包被微粒子高效、均一、稳定、通用。链霉亲和素-生物素间接包被的优势生物素结合物与标本液相反应。生物素-亲和素反应亲和力强。磁性微粒载体技术直径为2.8微米的磁性微粒作为载体凹凸不平的表面积可最大量地包被链霉亲和素载体悬浮在反应体系中,360度全方位参与反应,极大提高了反应速度测量过程动画演示ECLIA第一步:

Whathappened?第一个九分钟ECLIA第二步:

Next第二个九分钟ECLIA第四步:

LOOKIt!测量室里的ECL反应最后:

Finally电化学发光临床应用甲状腺

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