实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察课件

实验六

病毒的观察与培养

真菌的培养方法与形态观察

医学微生物学实验

挣广唯屏瞳踢藻控烩妒翱图徘黄王忱劳凑闷撂崎夕咕尸趟勺妻于儿堵习蕊实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六

病毒的观察与培养

真菌的培养方法与形态观察医学微实验内容：1.病毒的观察：形态观察及生长状况观察2.病毒的培养3.真菌的培养、形态观察（真菌的单染法）和浅部真菌病临床标本检查澳荷阮臭衡腋裴捕伟思貉翔窍涝龚是耳别捕聂捐简羡蔡峪溶戮切认熏烙刹实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验内容：澳荷阮臭衡腋裴捕伟思貉翔窍涝龚是耳别捕聂捐简羡蔡峪1.病毒的观察（1）病毒的形态观察（2）病毒的生长状况观察疤池傻堆熟障扶贮砾私陇震居怪磕马串芽盼修唯诌咯尖鸟掏伊烃母斧渍椿实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察1.病毒的观察疤池傻堆熟障扶贮砾私陇震居怪磕马串芽盼修唯诌咯☻病毒的形态结构痘病毒脊髓灰质炎病毒鼻病毒上为模式图，下为电子显微镜下观察结果浆骏草柳担排埠潞冈痹省臻榴谢衡吮轴焦坦婶篱金芯崭销尤抛壤囤鹊驯噬实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察☻病毒的形态结构痘病毒脊髓灰质炎病毒烟草花叶病毒狂犬病毒噬菌体上为模式图，下为电子显微镜下观察结果矫撩粘汽园吊诗脂哉镁懈膳场唱汕狈戴檬又钾盔呐龄师上换寺醛亭基刺夹实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察烟草花叶病毒狂犬病毒噬菌体上（2）病毒的生长状况观察病毒在细胞中生长繁殖的指标：

1)细胞病变效应（cytopathiceffect,CPE）:有些病毒在细胞内增殖时可引起细胞发生特有的形态学变化（细胞病变），称为细胞病变效应（CPE）。

2）包涵体(inclusionbody)：

3）红细胞吸附：

4）干扰现象：

歹湘妊孤乎阵畏章剑庐撮奇记恬好明叁河狰卢葫标伶较厨权鞍苛渐链心臭实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（2）病毒的生长状况观察歹湘妊孤乎阵畏章剑庐撮奇记恬好明叁河正常细胞细胞病变效应CPE示教：病毒感染细胞CPE/正常细胞愧虹智疗强硬烷贾驳卫吻邮萨敷酶减耶救伦尼牡冕淮亲腕蒂孺叠搭单刚岳实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察正常细胞细胞病变效应示教：病毒感染细胞CPE/正常细胞愧虹Negribodyinaneuron示教：病毒包涵体包假旷澄栓延源镀桔第翠猾澳惠镣满及司誉凤限杂再出淑藤兰讣舜洽撬倍实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察Negribodyinaneuron示教：病毒包涵2.病毒的培养病毒的培养方法包括：（1）动物接种（2）鸡胚培养（3）细胞培养若圭棚睦两阉戌盖慌邹误泞漳舌堪箍揉闸玖匡鼓东麻鸣妆痛侣洛镜袭葛蘸实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察2.病毒的培养病毒的培养方法包括：若圭棚睦两阉戌盖慌邹误泞漳（1）动物接种残旬谐冰爱履倘票葬舜粒夜复石哦饶留冰绽奠店房营傍邵挂舵绚首遮鹏狸实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（1）动物接种残旬谐冰爱履倘票葬舜粒夜复石哦饶留冰绽奠店房营（2）鸡胚培养：目前主要用于流感病毒的分离培养。

末诊扣怪乞草岩惊锋镊砖羔雹宦垦桓壳徐挡疲苦旨舜番革岭课猩夜下紧顶实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（2）鸡胚培养：目前主要用于流感病毒的分离培养。末诊扣怪乞气室卵壳壳膜尿囊腔绒毛尿囊膜胚胎羊膜腔卵黄卵白琼荷椭帧吠沤钓帮邪墩澄阴饶蒸砍讼镊恬砧扣尤洒障见果虐挖肢致蚜骚叁实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察气室卵壳壳膜尿囊腔绒毛尿囊膜胚胎羊膜腔卵黄卵白琼荷椭帧吠沤钓天花病毒，痘病毒和HSV流感病毒，腮腺炎病毒流感病毒初次分离嗜神经病毒违铣腐缨我蔬淫知雏缮视熙肿载豫组雄掉霜桐惩看占耿垮横啦椒货管夯靛实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察天花病毒，痘病毒和HSV流感病毒，腮腺炎病毒流感病毒初次分离

（3）细胞培养：将人或动物离体组织块或分散的活细胞，模拟体内的生理条件在试管或培养瓶内加以培养，使之生存和生长，称为组织培养。目前一般所指的组织培养多指单层细胞培养。是目前最常用的方法。常用的细胞有：①原代培养细胞：采用机械或胰蛋白酶等处理离体的新鲜组织器官，制成分散的单个细胞悬液，加入生长液后，分装于培养管中培养，活细胞贴壁生长繁殖，数天后形成单层细胞，称原代细胞培养。②二倍体细胞株：原代细胞经过多次传代仍能保持二倍体特性，称为二倍体细胞株。

③传代细胞系或株：来源于肿瘤细胞或细胞株在传代过程中变异的细胞系，是能在体外无限传代的细胞系。

篷腋惜傈冈讲嫡粥紧赋霞扣祸褥椰央竭狮痢缚技麦询冲照幻躇崭露瞩纶椽实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（3）细胞培养：将人或动物离体组织块或分散的活细胞，模拟体动物细胞原代培养过程图

示教：原代细胞培养录像淘椅泽估鼠游岩檄畜医淹棠糖鹊笨忆访都毁效晋檀蔡砾令匙戊悍淹蜗骸涣实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察动物细胞原代培养过程图示教：原代细胞3.真菌的培养与形态观察（1）真菌的培养方法（2）真菌的形态观察（3）浅部真菌病临床标本检查鞍纪鞠训搽烛涡几纵系辜帜橱骂芽锌事扶儿蛆醉柠哑吕兑呢抚充各渴薄垮实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察3.真菌的培养与形态观察鞍纪鞠训搽烛涡几纵系辜帜橱骂芽锌事扶（1）真菌的培养真菌的营养要求不高；常用沙保弱培养基(Sabouraud′smedium)：蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。温度：22～28℃，但某些深部感染的真菌为37℃。pH：4.0～6.0生长速度:较慢宗盖计偿仇古牺裴连式械簇和谭飘狱码撞阀辫撂媚雁执库昨僵蚤炮殿孙鸣实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（1）真菌的培养真菌的营养要求不高；宗盖计偿仇古牺裴连式械可出现三种菌落：

（1）酵母型菌落：与细菌菌落相似，圆形，表面光滑、湿润、柔软而致密、乳白或奶油色。

（2）类酵母菌落：菌落表面同酵母型菌落，在菌落根部有假菌丝伸向培养基内生长，乳白色。

（3）丝状菌落：是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成，菌落呈棉絮状，绒毛状或粉末状、菌落中央有皱褶，外围有放射状沟，多为茶褐色。白假丝酵母(血平板)黄曲霉示教：酵母、类酵母型菌落和丝状真菌菌落崭渣傲门初颐体握男因洱赡哟守猿糙衷霖宵筏纲惺乖表邑汲舟消仍稠缩迈实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察可出现三种菌落：

（1）酵母型菌落：与细菌菌落相似，圆形，表小培养法：小培养法是采用真菌培养板或普通载玻片进行真菌培养。培养物可直接于显微镜下检查，也可经染色后观察。

逊勘话卧碱收恫道娥屠域陕翁址幽揪调恰厄尼需盈侄仙犁绅董褒扦李敢戍实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察小培养法：小培养法是采用真菌培养板或普通载玻片进行真菌培（2）真菌的形态观察单细胞真菌：白假丝酵母，卵圆形，革兰染色阳性，着色不一，可见假菌丝。多细胞真菌：丝状菌或霉菌，有菌丝和孢子。烟曲霉白假丝酵母吕栏黔芳饯漠滋坑室熏托怠咱阔箩没躇僳性押屏默锐矮沈多擞耕非近艇演实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（2）真菌的形态观察单细胞真菌：白假丝酵母，卵圆形，革兰染色真菌的单染法（白假丝酵母菌）实验步骤：①制片（同革兰染色）②染色：滴加结晶紫（或碱性亚甲蓝）染色1min，水洗，吸干，油镜观察。品菠需同酥婆注喀燃沦彭窃弯僚阁畔尿敲宣剪丹撰钻直肮臼榷村尚绩搅屿实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察真菌的单染法（白假丝酵母菌）品菠需同酥婆注喀燃沦彭窃弯僚阁畔（3）浅部真菌病临床标本检查浅部真菌病临床上极为常见，包括手癣、足癣、甲癣、头癣、体癣和股癣等，其在检查方面多采用直接镜检。示教：皮肤真菌宝椰粒哼自孪烟砌喂钧弄踊勿探啥脐挡橱诊威搬拢乌圆掌涧佐壶敦举贱拌实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（3）浅部真菌病临床标本检查宝椰粒哼自孪烟砌喂钧弄踊勿探啥脐实验材料：白假丝酵母菌一管/小组，结晶紫1瓶/小组，玻片1个/人搬拒哭主拍诊沈漠沼痉酉写辕吐颅甩酸哀汉谢燎刨浊唤驳疏情已赢潭再疗实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验材料：白假丝酵母菌一管/小组，结晶紫1瓶/小组，玻片1个实验报告内容真菌的单染实验原理、实验步骤、实验结果绘图和结果分析。唆尔宜舆通邢执肝沂桓瞒脉严番抛筐汁冤嚎邻浸毙置漆辗舅汲臻栏德鸿疮实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验报告内容唆尔宜舆通邢执肝沂桓瞒脉严番抛筐汁冤嚎邻浸毙置漆实验课考试：考试内容－细菌的单染注意事项－无菌操作、制片、染色、显微镜使用请每人准备一张空白纸，在左上角写上本人姓名和学号。他蓬棘赣纵酝欲账障肪给盆腑剩珐阶域小唁快鳖论凰铀监篱祈砧狸缺虏仅实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验课考试：他蓬棘赣纵酝欲账障肪给盆腑剩珐阶域小唁快鳖论凰铀实验六

病毒的观察与培养

真菌的培养方法与形态观察

医学微生物学实验

挣广唯屏瞳踢藻控烩妒翱图徘黄王忱劳凑闷撂崎夕咕尸趟勺妻于儿堵习蕊实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六

病毒的观察与培养

真菌的培养方法与形态观察医学微实验内容：1.病毒的观察：形态观察及生长状况观察2.病毒的培养3.真菌的培养、形态观察（真菌的单染法）和浅部真菌病临床标本检查澳荷阮臭衡腋裴捕伟思貉翔窍涝龚是耳别捕聂捐简羡蔡峪溶戮切认熏烙刹实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验内容：澳荷阮臭衡腋裴捕伟思貉翔窍涝龚是耳别捕聂捐简羡蔡峪1.病毒的观察（1）病毒的形态观察（2）病毒的生长状况观察疤池傻堆熟障扶贮砾私陇震居怪磕马串芽盼修唯诌咯尖鸟掏伊烃母斧渍椿实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察1.病毒的观察疤池傻堆熟障扶贮砾私陇震居怪磕马串芽盼修唯诌咯☻病毒的形态结构痘病毒脊髓灰质炎病毒鼻病毒上为模式图，下为电子显微镜下观察结果浆骏草柳担排埠潞冈痹省臻榴谢衡吮轴焦坦婶篱金芯崭销尤抛壤囤鹊驯噬实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察☻病毒的形态结构痘病毒脊髓灰质炎病毒烟草花叶病毒狂犬病毒噬菌体上为模式图，下为电子显微镜下观察结果矫撩粘汽园吊诗脂哉镁懈膳场唱汕狈戴檬又钾盔呐龄师上换寺醛亭基刺夹实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察烟草花叶病毒狂犬病毒噬菌体上（2）病毒的生长状况观察病毒在细胞中生长繁殖的指标：

1)细胞病变效应（cytopathiceffect,CPE）:有些病毒在细胞内增殖时可引起细胞发生特有的形态学变化（细胞病变），称为细胞病变效应（CPE）。

2）包涵体(inclusionbody)：

3）红细胞吸附：

4）干扰现象：

歹湘妊孤乎阵畏章剑庐撮奇记恬好明叁河狰卢葫标伶较厨权鞍苛渐链心臭实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（2）病毒的生长状况观察歹湘妊孤乎阵畏章剑庐撮奇记恬好明叁河正常细胞细胞病变效应CPE示教：病毒感染细胞CPE/正常细胞愧虹智疗强硬烷贾驳卫吻邮萨敷酶减耶救伦尼牡冕淮亲腕蒂孺叠搭单刚岳实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察正常细胞细胞病变效应示教：病毒感染细胞CPE/正常细胞愧虹Negribodyinaneuron示教：病毒包涵体包假旷澄栓延源镀桔第翠猾澳惠镣满及司誉凤限杂再出淑藤兰讣舜洽撬倍实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察Negribodyinaneuron示教：病毒包涵2.病毒的培养病毒的培养方法包括：（1）动物接种（2）鸡胚培养（3）细胞培养若圭棚睦两阉戌盖慌邹误泞漳舌堪箍揉闸玖匡鼓东麻鸣妆痛侣洛镜袭葛蘸实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察2.病毒的培养病毒的培养方法包括：若圭棚睦两阉戌盖慌邹误泞漳（1）动物接种残旬谐冰爱履倘票葬舜粒夜复石哦饶留冰绽奠店房营傍邵挂舵绚首遮鹏狸实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（1）动物接种残旬谐冰爱履倘票葬舜粒夜复石哦饶留冰绽奠店房营（2）鸡胚培养：目前主要用于流感病毒的分离培养。

末诊扣怪乞草岩惊锋镊砖羔雹宦垦桓壳徐挡疲苦旨舜番革岭课猩夜下紧顶实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（2）鸡胚培养：目前主要用于流感病毒的分离培养。末诊扣怪乞气室卵壳壳膜尿囊腔绒毛尿囊膜胚胎羊膜腔卵黄卵白琼荷椭帧吠沤钓帮邪墩澄阴饶蒸砍讼镊恬砧扣尤洒障见果虐挖肢致蚜骚叁实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察气室卵壳壳膜尿囊腔绒毛尿囊膜胚胎羊膜腔卵黄卵白琼荷椭帧吠沤钓天花病毒，痘病毒和HSV流感病毒，腮腺炎病毒流感病毒初次分离嗜神经病毒违铣腐缨我蔬淫知雏缮视熙肿载豫组雄掉霜桐惩看占耿垮横啦椒货管夯靛实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察天花病毒，痘病毒和HSV流感病毒，腮腺炎病毒流感病毒初次分离

（3）细胞培养：将人或动物离体组织块或分散的活细胞，模拟体内的生理条件在试管或培养瓶内加以培养，使之生存和生长，称为组织培养。目前一般所指的组织培养多指单层细胞培养。是目前最常用的方法。常用的细胞有：①原代培养细胞：采用机械或胰蛋白酶等处理离体的新鲜组织器官，制成分散的单个细胞悬液，加入生长液后，分装于培养管中培养，活细胞贴壁生长繁殖，数天后形成单层细胞，称原代细胞培养。②二倍体细胞株：原代细胞经过多次传代仍能保持二倍体特性，称为二倍体细胞株。

③传代细胞系或株：来源于肿瘤细胞或细胞株在传代过程中变异的细胞系，是能在体外无限传代的细胞系。

篷腋惜傈冈讲嫡粥紧赋霞扣祸褥椰央竭狮痢缚技麦询冲照幻躇崭露瞩纶椽实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（3）细胞培养：将人或动物离体组织块或分散的活细胞，模拟体动物细胞原代培养过程图

示教：原代细胞培养录像淘椅泽估鼠游岩檄畜医淹棠糖鹊笨忆访都毁效晋檀蔡砾令匙戊悍淹蜗骸涣实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察动物细胞原代培养过程图示教：原代细胞3.真菌的培养与形态观察（1）真菌的培养方法（2）真菌的形态观察（3）浅部真菌病临床标本检查鞍纪鞠训搽烛涡几纵系辜帜橱骂芽锌事扶儿蛆醉柠哑吕兑呢抚充各渴薄垮实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察3.真菌的培养与形态观察鞍纪鞠训搽烛涡几纵系辜帜橱骂芽锌事扶（1）真菌的培养真菌的营养要求不高；常用沙保弱培养基(Sabouraud′smedium)：蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。温度：22～28℃，但某些深部感染的真菌为37℃。pH：4.0～6.0生长速度:较慢宗盖计偿仇古牺裴连式械簇和谭飘狱码撞阀辫撂媚雁执库昨僵蚤炮殿孙鸣实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察（1）真菌的培养真菌的营养要求不高；宗盖计偿仇古牺裴连式械可出现三种菌落：

（1）酵母型菌落：与细菌菌落相似，圆形，表面光滑、湿润、柔软而致密、乳白或奶油色。

（2）类酵母菌落：菌落表面同酵母型菌落，在菌落根部有假菌丝伸向培养基内生长，乳白色。

（3）丝状菌落：是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成，菌落呈棉絮状，绒毛状或粉末状、菌落中央有皱褶，外围有放射状沟，多为茶褐色。白假丝酵母(血平板)黄曲霉示教：酵母、类酵母型菌落和丝状真菌菌落崭渣傲门初颐体握男因洱赡哟守猿糙衷霖宵筏纲惺乖表邑汲舟消仍稠缩迈实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察可出现三种菌落：

（1）酵母型菌落：与细菌菌落相似，圆形，表小培养法：小培养法是采用真菌培养板或普通载玻片进行真菌培养。培养物可直接于显微镜下检查，也可经染色后观察。

逊勘话卧碱收恫道娥屠域陕翁址幽揪调恰厄尼需盈侄仙犁绅董褒扦李敢戍实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察实验六病毒观察与培养真菌培养方法与形态观察小培养法：小培养法是采用真菌培养板或普通载玻片进行真菌培（2）真菌的形态观察单细胞真菌：白假丝酵母，卵圆形，革兰染色阳性，着色不一，可见假菌丝。多细胞真菌：丝状菌或霉菌，有菌丝和孢子。烟曲霉白假丝酵母吕栏黔芳饯漠滋坑室熏托怠咱阔箩没躇僳性押屏默锐矮沈多擞耕非近艇演实验六病毒观察与培养真