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文档简介

4/4PCR分子诊断POCT需要具备哪些基本要素？分子诊断POCT是近几年的热门话题。作为未来分子诊断发展的热门方向，分子诊断POCT集合了小巧、灵活、方便、快速、精准等特点，在应用场景和应用领域上比传统的分子诊断更多更广。这也是目前国内外诊断企业纷纷布局这一领域原因。那么实现PCR分子诊断POCT一般需要具备哪些基本要素？

01多重PCR技术

一般来讲，分子POCT的扩增管比较少，所以掌握多重PCR技术能够让你在有限空间实现更多的位点检测。

02

试剂常温技术

分子诊断POCT能够在应用场景上拓展，试剂常温技术尤为关键。试剂常温运输储存即降低冷链运输的成本又带来使用上的便捷。

试剂常温技术一般分为两种：液体试剂常温技术和干式试剂常温技术。

液体常温技术：

是通过对PCR体系中的酶做一些化学修饰，来实现酶在体系在短时间的常温稳定，以此实现常温运输，0-10℃或-20℃储存。目前Taq酶的化学修饰已经得到实现，但对于体系中的其他酶（如逆转录酶）的修饰还需更多的研究投入。

干式试剂常温技术：

是通过对PCR体系（包含酶等活性成分）的冷冻干燥，实现常温运输常温存储或常温运输0-10℃储存。国外厂家早在几年前就掌握了干式试剂常温技术，国内目前也有不少厂家实现了这一技术。只是国内厂家目前绝大部分实现的是干式粉末技术，对于干式球形技术掌握的极少。干式球形技术是实现批量化生产，降低成本的关键。

03快速提取纯化技术

经典的分子诊断POCT即要快速也要精准，所以核酸的提取纯化是精准的要素。

直扩的方法如果从体系和释放剂的配方上深入研究，达到与提取纯化后扩增的灵敏度也是有可能的，但从样本的普适性上来讲，直扩的方法范围更窄，只能适用部分项目的某一类样本的检测。

核酸提取纯化也不能像传统的提取（提取时间一般20-30分钟）一样，要在提取效果和提取时间上找到平衡点，实现核酸快速提取纯化。

04封闭式卡盒的设计

分子诊断POCT的关键之一，在于封闭式卡盒的设计。“核酸的提取、加样及扩增全过程在封闭式的小卡盒在完成。”简单的一句话，难倒了众多开发设计者。

难点在于快速提取过程如何移液、纯化后的核酸如何加入到体系中、卡盒需要预留什么样的机构与仪器设备配合。

突破这些难点以后，你还需要考虑如何低成本制造，试剂如何批量化生产。

因此设计一个可产业化的封闭式卡盒是实现分子诊断POCT的基本要素也是关键。

05配套的分子诊断POCT仪器

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