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文档简介
猪细小病毒病
(Porcineparvovirusinfection)
猪细小病毒病是一种由猪细小病毒(PPV)引起的母猪繁殖障碍性疾病。其特征是:怀孕母猪(尤其是头胎)发生死产、畸形胎、木乃伊胎、胚胎死亡、偶有流产,而母猪本身并不表现临诊症状。其他猪感染后也无明显的临诊症状。本病一般呈地方流行性或散发,有时也呈现流行性(或称为“爆发”),这种爆发多见于畜群初次感染的情况。第一页,共六十八页。一、病原
1.分类、形态及生物学:PPV属细小病毒科中的细小病毒属。PPV外观呈圆形或六角形、无囊膜,直径18-26nm。本病毒只有一个血清型。PPV
能凝集豚鼠、大鼠、猴、鸡、猫和人“O”型红细胞,不能凝集牛、绵羊、仓鼠和猪的红细胞,其中以豚鼠红细胞最好。第二页,共六十八页。病原形态第三页,共六十八页。2.培养:PPV能在猪原代或次代肾,睾丸细胞及猪传代细胞上培养、甚至牛肾原代细胞也能用于PPV培养,PPV在细胞培养物上能产生细胞拉网;聚集脱落、圆缩死亡等细胞病变(CPE)。接种病料时机,以细胞形成岛屿状阶段为宜,或制备细胞液时同步接毒,以利于病毒增殖。3.抵抗力:PPV对热具有强大的抵抗力,56℃
30min加热处理后,病毒的感染性和血凝(HA)性都无明显改变,现已确认
PPV能耐56℃
48h,70℃2h,但在
80℃经
5min加热后感染性和
HA活性均丧失。第四页,共六十八页。二、流行病学
PPV感染各种猪,包括:胚胎、仔猪、母猪、家(野)猪。不同的猪,PPV的阳性率不尽相同。经产母猪的阳性率高达80%-100%,初产母猪一般为60%-80%,公猪为30%一50%,后备猪约为40%一80%,肥育猪为60%。
第五页,共六十八页。本病的传染源主要来自感染PPV的母猪。PPV能通过胎盘垂直传播。感染PPV的母猪所产的死胎、仔猪及子宫内的排泄物中均含有很高滴度的病毒。感染母猪的粪、尿及其它分泌物也能排毒。感染PPV的种公猪也是该病最危险的传染源。公猪可在其精液、精索、附睾、副性腺中分离出PPV。因而,往往在配种时,公猪将PPV传染给易感母猪。第六页,共六十八页。传播途径:仔猪、胚胎、胎猪通过感染PPV母猪发生垂直感染;公猪、肥育猪和母猪主要是经污染的饲料、环境、经呼吸道消化道感染;初产母猪的感染多数是经与带PPV的公猪配种时发生的;鼠类也能传播PPV。
第七页,共六十八页。母猪怀孕早期感染时,胚胎、胎猪死亡率可高达
80%一100%。母猪在怀孕期的前30-40天最易感染,孕期不同时间感染分别会造成死胎、流产、木乃伊、产弱仔猪和母猪久配不孕等不同症状。第八页,共六十八页。PPV的感染率与动物年龄呈正比。5—
6月龄猪的抗体阳性率为8%-
29%,
7—
10月龄就上升到
4
6%一
6
7%,11—16月龄的阳性率就可高达84%一100%。感染l-2周后可通过粪便排毒,造成环境污染,感染7一9天可测出血凝抑制抗体(HI),2I天内抗体滴度可达1:15
000,且能持续数年。第九页,共六十八页。
三、临诊症状PPV感染猪主要临诊症状是怀孕母猪出现繁殖障碍。怀孕母猪可同时出现流产、死产、木乃伊、产后久配不孕等症状。其他猪感染后无任何明显的临诊症状。
第十页,共六十八页。妊娠30天内感染(早期):胚胎死亡、吸收使产仔数减少,胎猪、胚胎死亡率高达80—100%.
妊娠30—70天之间感染(中期):木乃伊化,有时出现大小不一的软死胎,有畸形胎(八字腿、唇裂)、产弱仔、死胎、
妊娠70天以上感染(中后期)胎儿能产生免疫力,产出时外观正常,这些仔猪带有病毒和抗体,可长期或终生带、排毒。母猪呈不规律发情周期。
公猪:性欲、受精率无明显影响。第十一页,共六十八页。四、病理变化
主要表现在怀孕母猪怀孕期在70天以前感染的胎儿,70天以后感染PPV的胎猪具有免疫能力时,其病变就不明显,甚至没有病变。
肉眼病变:母猪子宫内膜有轻微炎症,胎盘有部分钙化现象,胎儿在子宫胎盘内有被溶解、吸收的现象。感染胎儿还可看到充血、水肿、出血、体腔积液、木乃伊化(脱水)及坏死等病变。
第十二页,共六十八页。母猪感染后产下不同组合胎儿第十三页,共六十八页。母猪感染后产下不同木乃伊和死胎第十四页,共六十八页。母猪感染后产下不同死胎第十五页,共六十八页。木乃伊胎
第十六页,共六十八页。子宫内血块样的物质实际上是死亡的猪胎
第十七页,共六十八页。子宫中死亡胎儿和木乃伊胎儿
第十八页,共六十八页。子宫中的木乃伊胎儿
第十九页,共六十八页。五、诊断如果发现母猪有流产、死产、胎儿发育异常、木乃伊等情况,而没有其他临床症状,应考虑到PPV感染的可能性。可根据上述流行病学的特点,临床症状和病理变化作出初步诊断。但要作出肯定的诊断,则还需作进一步的实验室诊断。
实验室诊断主要分为病原检查和抗体检查,前者主要用于有流产、死产、木乃伊和急性感染期产生病毒血症时的病原学诊断。后者可用于可疑猪抗体的诊断及流行病学调查。第二十页,共六十八页。常用的PPV诊断方法有血凝试验(HA);血凝抑制试验(HI);免疫荧光抗体试验(FA);酶标试验(IEA);血清中和试验(SN);琼脂免疫扩散试验;免疫电泳试验;酶联免疫吸附试验;电镜检查;最新的诊断方法有:放射免疫测定;单克隆抗体诊断法;核酸探针法;SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE);内切酶分析诊断法。第二十一页,共六十八页。病原检查:1.病毒的分离
通常采取可疑流产、死产、木乃伊及同窝活产仔猪的肾、肺、肝、脾、脑、睾丸、胎盘和母猪予宫排泄物或公猪的精液。
将上述病料组织经研磨成5一10倍乳剂。母猪子宫排泄物和公猪精液只需离心取上清。每毫升乳剂或上清加入1000IU的青霉素、
1000ug链霉素,冻融3次,离心取上溶液,接种于单层原代或次代或传代猪源细胞中。病毒浓度较大时,于接种后24-72小时出现
CPE(传代细胞上不明显);48h后将林氏管中细胞片取出,用荧光抗体或酶标抗体染色镜检。当细胞瓶中大部分细胞出现圆缩、拉网、聚集、脱落等CPE时,收获培养液作HA,发现有血凝现象并用标准PPV阳性血清作HI特异性检查能抑制血凝现象即可确诊,或者用FA、IEA检查发现有特异性的核着染也可确诊。值得注意的是:不管用原代。次代或传代细胞培养物分离病毒时,都必须设立不接毒的细胞对照,其细胞核内无特异性着染,培养液无血凝现象才能确诊。第二十二页,共六十八页。2.病毒抗原的检查用FA或IEA对胎儿脏器组织切片进行特异性染色,以确定病毒抗原的存在。用
HA对其脏器组织悬液或接种后的组织培养液进行血凝试验后,再用
HI核对血凝反应的特异性,这两种方法是检查PPV抗原最常用、最可靠的方法。抗体检查:猪感染PPV后,7天左右就能查出血凝抑制抗体,其抗体可以保持4年以至于终身。因此,用HI来检查PPV感染情况和流行病学调查,无疑是非常有用的。此方法也是国际上检疫使用的常规方法。此外,血清中和试验(SNT),也常用于PPV抗体的检查。第二十三页,共六十八页。六、防制
1、引种:与注意隔离检疫(HI抗体低于256),不引阳性后备母猪。2、留种:不留那些发生有繁殖障碍的幸存者(同一窝猪)作为种用。3、配种:适当推迟配种,有利于母猪的免疫力提高,对预防初产母猪的繁殖障碍有一定作用。4、疫苗接种:控制PPV感染的重点在于对后备母猪进行免疫接种,使之产生免疫力;国内外均研制成功灭活与弱毒疫苗;一般后备种猪在6月龄接种一次,配种前3周再接种一次,其它种猪每年2次或配种前3周接种一次。5、在污染场,也可采取将后备母猪与经产母猪同居或放入老母猪居住过的舍内,使之在配种前自然感染,获得免疫力。第二十四页,共六十八页。猪繁殖与呼吸综合征
(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)
PRRS是近年来国内外引人注目的一种新的猪传染病,该病以母猪繁殖障碍、仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征,特别是感染本病后容易导致免疫抑制而继发其他疾病。1987年美国的北卡罗纳,衣阿华、明尼苏达等洲的猪群首次暴发一种以母猪繁殖障碍、仔猪严重呼吸困难为特征的传染病,随后很快扩展到北美和欧洲(德国是欧洲最先发生的国家,1990)据估计,仅90年到91年冬季,欧洲有百万头猪因此死亡
。第二十五页,共六十八页。一、病原
PRRSV
1、分类上为动脉炎病毒(Arterviridae)的成员,呈球形,大小45—83nm,有囊膜,基因组RNA,大小约14.5Kb。
2、培养:可用猪原代肺巨噬细胞(PAM,Porcine
alveolar
macrophages)或猴肾CL2621、Marc145中培养。一般说来,以PAM
最敏感,较多用分离野毒株,病毒生长快,CPE(1—4d),细胞病变为细胞圆缩,聚集,最后脱落。病毒滴度可达100,000TCID50.或更高。
第二十六页,共六十八页。3、
抵抗力:对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感。病毒在低温下能保持其稳定的感染性,但不耐热,深层组织中可存活数年,但
4
℃时存活一个月,37℃48小时,56
℃45分钟,病毒将彻底灭活。在PH<
或
>
7
的环境中,感染性损失90%以上。第二十七页,共六十八页。二、流行病学
1、仅猪易感并出现症状,不分年龄、品种、性别均可感染。其他:绿头鸭、珍珠鸡、杂交肉鸡人工饮水感染后,可在5——24
天后从粪便中分离到病毒。2、病猪和隐性感染的猪是本病的主要传染源。病猪可通过尿、粪、鼻液、精液等排毒,病猪排毒达60—99天之久,引入带毒的感染猪到易感猪群是该病流行的主要原因。
第二十八页,共六十八页。3、主要通过呼吸道接触感染,也可经精液、胎盘传播,易感猪可经口、鼻、肌肉、腹腔、子宫、接种等多种途径感染。
第二十九页,共六十八页。三、临床症状按症状可分为急性型、慢性型、亚临床型,以下按猪类别分别叙述:
母猪
:主要表现为流产、死胎、早产、木乃伊胎等繁殖障碍,产弱仔,间情期延长或不孕,产后无乳,胎衣不下等。发热,
40
—40.5℃(占猪群30%),昏睡,精神、食欲不振,(后者占50%),发绀(在病猪耳朵【蓝耳病】,阴门、尾巴、腹部、鼻孔等处),占30%左右。不同程度呼吸困难,(很少咳嗽),结膜炎、鼻炎。第三十页,共六十八页。
仔猪:新生仔猪呼吸困难,腹式呼吸(在哺乳与断奶猪亦可见);体温升高,40—41℃,部分猪耳部等处发绀,皮毛粗糙,挤集一堆,眼眶水肿,结膜炎;也可见顽固性腹泻.新生弱仔死亡率特别高。断奶后仔猪死亡率可达20-50%,以保育阶段猪最易感染和最为严重,特别是易于继发多种疾病,整个育成期发育不良,易于死亡。
第三十一页,共六十八页。育肥猪:临床症状不明显,有时厌食和轻度呼吸困难,部分猪出现发绀,易继发感染,生长缓慢,下降15%。公猪:厌食,精液质量下降,精子运动力下降,畸形精子比率上升。第三十二页,共六十八页。四、病变
单纯感染,以肺脏为主,肺有出血斑,或有肝变病灶(
暗红色),腹股沟、肺门等淋巴结肿大、出血,胸、腹腔积液,脑积液,如继发感染
,则病变复杂化,症状多样性。
组织病变:以弥漫性间质性肺炎为主第三十三页,共六十八页。病猪流产的死胎第三十四页,共六十八页。病猪卧地不起第三十五页,共六十八页。病猪耳部皮肤严重发绀,呈“蓝耳”症状第三十六页,共六十八页。仔猪呼吸困难第三十七页,共六十八页。木乃伊第三十八页,共六十八页。患猪两耳郁血、充血
第三十九页,共六十八页。体质衰弱
第四十页,共六十八页。眼睑肿胀
第四十一页,共六十八页。肺炎病变:显示出血性炎症第四十二页,共六十八页。间质性肺炎第四十三页,共六十八页。五、诊断本病因临床症状不典型,且差异性甚大,最后确诊须依靠实验室诊断。病毒分离:以猪血清和肺组织最好,其它检材:心、肝、脾、肾、淋、扁、骨髓、胸腺,细胞出现
CPE后荧抗或RT-PCR鉴定。
第四十四页,共六十八页。荧光抗体检测病猪细胞中的PRRSV抗原第四十五页,共六十八页。一、Ag与基因检查:包括免疫电镜,荧抗,RT-PCR。
二、血清学方法:主要有几种:间接荧光抗体法,ELISA,病毒中和,免疫过氧化物酶单层细胞试验,(1、4法敏感性相当)。SN法出现Ab较迟,但不如1、4法敏感,ELISA法适于大批检测,极其不一致,国内目前研究的阳性率过高,而国外试剂盒太贵,近六千元每KIT。第四十六页,共六十八页。三、临床病理学诊断:急性暴发时,流产或早产超过8%,死胎率大于20%,仔猪新生后第1周死亡率大于25%,这3项若有2项出现于14天内,则成立。发病仔猪出现间质性肺炎是特征性组织病理学变化。
六、防制1.阳性场控制措施:早期病畜断奶,分地饲养,生产环节均全进全出。两处或三处饲养:配种、妊娠、分娩在一处,保育与育肥在另一处或两处,各处间距0、5—1km;10日龄断奶转入保育舍,保育舍饲养7周转育成舍(三处饲养时)。第四十七页,共六十八页。2
、保育舍空栏法:所有猪只清出猪舍,用盐水和消毒剂(甲醛和苯酚)彻底清洗和消毒,封闭空闲14天,再接收仔猪。每批猪清出后均应进行此项工作。3、免疫接种:对是否需要进行免疫,目前在学术上有不同意见。主要是灭活疫苗的免疫效果欠佳,但弱毒苗有恐不安全。
第四十八页,共六十八页。(1)用分娩母猪的胎盘、粪便混饲给配种前四周或产前四周的母猪。(2)国内外已有活、死苗问世,初产母猪在产前四周接种一剂疫苗,经产母猪可在配种前每1-2年补免一次;公猪每窝免一次,仔猪4-6周龄打一剂;(3-4M阳性率达80%)或生产时用一剂,10-19日龄用0.5剂。
药物预防:控制继发性细菌感染,但不能阻止PRRS从母体传给后代。第四十九页,共六十八页。猪传染性胃肠炎(TransmissiblegastraentenitisofpigsTGE)
猪传染性胃肠炎是猪的一种高度接触性肠道疾病,以两周龄以下仔猪呕吐、严重腹泻和高死亡率为特征。不同年龄猪对TGEV均易感,但5周龄以上的猪死亡率则很低。在养猪密集地区,TGEV被认为是仔猪发病和死亡的主要原因之一。
第五十页,共六十八页。TGEV属冠状病毒科、冠状病毒尿、单股RNA病毒,直径60-160nm。TGEV只有一个血清型。培养:猪肾、睾丸、甲状腺、唾液腺等细胞繁殖继代。TGEV在猪主要存在于空肠和12指肠。病原学猪传染性胃肠炎第五十一页,共六十八页。猪传染性胃肠炎第五十二页,共六十八页。猪传染性胃肠炎第五十三页,共六十八页。传染源:病猪、带毒猪为主要传染源。可从粪便、呕吐物、乳汁、鼻液及呼出气体排毒,50%的康复猪带毒排毒达2-8周。传播途径:
消化道:污染饲料、饮水、用具等。呼吸道:流行病学猪传染性胃肠炎第五十四页,共六十八页。流行病学易感动物:猪,2周以内仔猪死亡率高,架子猪、成猪一般的良性经过。犬、猫可发病。发病季节:呈季节性,冬天(11中旬~4月中旬)易发。猪传染性胃肠炎第五十五页,共六十八页。流行病学流行形式:
流行性TGE:新疫区,所年龄猪感染发病、并不同程度厌食、呕吐、腹泻。
地方流行性TGE:本病毒在一个猪场持续存在,局限在常有仔猪出生的阳性猪场。猪传染性胃肠炎第五十六页,共六十八页。潜伏期:一般15-18小时,有的2-3天。流行性TGE:
仔猪:典型症状是短暂呕吐、伴有或继而水样、通常黄色腹泻、体重减轻、脱水以及2周龄以下猪的发病率和高死亡率。死亡与年龄负相关。
幼猪、肥猪、母猪:常只限厌食和腹泻1至数天,偶尔伴有呕吐。极少死亡(因多种因素如应激或混合感染。地方流行性TGE:与同龄易感猪相似,但较轻微、死亡率低。主要为断奶仔猪,可能和E.coli、球虫或RV感染混淆
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