2019教育高考生物选修三知识点总结

第第5页高考生物选修三知识点总结

高考生物选修三知识点（一）

基因工程概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，通

过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物新的遗传特性，创

造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程基本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达。基因工程理论基础：DNA是生物遗传物质的发现，DNA双螺旋结构，遗传信息传递方式基因工程核心：构建重组DNA分子植物体细胞：农杆菌转化法（插入Ti质粒上的T-DNA），基因枪法、花粉管通道法——导入叶绿体DNA中，由于细胞质/器DNA的遗传与性别相关联，故可避免因花粉传播而造成基因污染（目的基因传播到非转基因生物中）动物受精卵：显微注射技术用（如显微注射）技术/方法将目的基因导入cf转基因/基因工程技术原核细胞：CaCI2/Ca2+处理法（先用Ca2+处理增加细胞壁通透性，使之成为感受态细胞，再将重组质粒与感受态细胞混合，在一定温度下感受态细胞吸收DNA分子）——原核生物作为受体细胞的原因：①繁殖快②体积小新陈代谢旺盛（目的产物合成效率高）③遗传物质少（便于操作）、④单细胞（容易培养）高考生物选修三知识点（二）限制性核酸内切酶（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的（不切割自身DNA的原因：原核生物中无该限制酶的识别序列或其已被修饰）（2）功能：识别和切割DNA分子内一小段特殊的脱氧核苷酸序列（偶数碱基对回文序列）特异性表现：识别特定片段、切割该片段中的特定位点、形成一种末端Cf—G↓GATCC—&—↓GATC—（3）结果：DNA片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端DNA连接酶（1）功能：连接具有末端碱基互补的2个DNA片段，形成重组DNA分子CfDNA聚合酶：只能将单个脱氧核苷酸逐个添加到已有的脱氧核苷酸链之后，需模板DNA，连接磷酸二酯键载体（1）条件：①能在受体细胞中稳定保存并大量复制，基本不影响受体细胞正常生命活动②一至多个限制酶酶切位点（必须在所需标记基因外），供外源DNA片段插入③标记基因，便于筛选含有重组DNA分子的受体细胞——往往需要根据需求改造天然载体。功能：①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内——载体选质粒的原因：具有环状结构，能够携带目的基因②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制和转录/表达质粒(最常用的载体)一种能够自主复制，在细菌(或酵母菌)中独立于染色体之外存在的双链环状DNA分子其它载体：噬菌体、动植物病毒高考生物选修三知识点(三)获取目的基因目的基因：人们所需要的编码蛋白质的结构基因方法：(1)序列已知、(2)序列未知：(1)序列已知：①化学合成法——较长DNA单链合成过程中容易出现碱基缺失如反转录法(e.g获取mRNA逆转录成cDNA再用DNA聚合酶生成双链)②聚合酶链式反应(PCR)扩增原料：水、缓冲液、4种游离脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶、模板DNA(……基因)、对…基因特异的2段DNA引物(防止相互或自身折叠)过程：第一步：加热至90〜95°C,DNA在高温下变性解链第二步：冷却到55〜60C，引物结合到互补DNA链(退火）第三步：加热至70〜75°C,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成能量来源于dNTP（2）序列未知：建立基因文库：建立一个包括目的基因在内的基因文库（保存在受体菌中），再从基因文库中获取目的基因大量扩增/分子水平的克隆利用受体细胞（如E.coli）无性繁殖，利用基因探针钓取，再导入最终受体细胞e.g目的基因→大肠杆菌→农杆菌→植物细胞→植物（主要在细菌分裂时几何级扩增，尽管质粒独立于拟核，可在分裂时发生自我复制，但由于多数细菌对胞内质粒数量有限制，故该种复制对扩增效果不大）PCR技术形成重组DNA分子（基因表达载体：启动子+目的基因+终止子+标记基因）目的：转运目的基因，并使在受体内稳定存在、复制、表达/转录并稳定遗传（基因型X0）过程：（1）单酶切：用同种限制酶分别切割目的基因和载体从而形成相同的粘性末端，然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来——有时用不同限制酶也可以形成相同的粘性末端(2)双酶切：用两种限制酶切割使目的基因和载体两端各形成两种粘性末端，防止载体和目的基因自身环化。看了&It;高考生物选修