细胞生物学第七章细胞基质课件

INTRACELLULAR

COMPARTMENTANDPROTEINSSORTING第7章

细胞质基质

与细胞内膜系统第一节细胞质基质一、含义和功能第二节内质网一、形态与组成二、RER的功能三、ER的其它功能第三节高尔基体一、形态与组成二、功能区隔三、主要功能第四节溶酶体与过氧化物酶体内容提要细胞质基质：指存在于细胞质内，填充于核膜、网质体、高尔基体等液泡系统与线粒体、叶绿体等膜状构造之间的连续性结构。在电子显微镜下呈无结构的部分，细胞质基质在细胞分区法方面，它是与除微粒体分区以外的上清分区相对应的部分，它含有各种可溶性蛋白质（例如构成微管的蛋白质的单量体）和酶（例如有关分解糖的各种酶）或核酸（例如转移RNA）等。另外，一般认为细胞质或原生质的物理特性主要表现为这种细胞质基质的性质。

第一节细胞质基质细胞质基质的功能完成各种中间代谢过程：如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖醛酸途径等。

与细胞质骨架相关的功能：维持细胞形态、细胞运动、胞内物质运输及能量传递等。

蛋白质的修饰、蛋白质选择性的降解：

①蛋白质的修饰；②控制蛋白质的寿命；③降解变性和错误折叠的蛋白质；④帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠，形成正确的分子构象。

细胞内膜系统：结构、功能和发生上相关的内膜形成的细胞结构：如核被膜、内质网、高尔基体等。功能：区隔化；增加内表面积，提高代谢和调节能力。从系统发生来看内膜系统起源于质膜的内陷和内共生。从个体发生来看新细胞的内膜系统来源于原有内膜系统的分裂，具有核外遗传的特性。当细胞进行膜合成需要胆固醇时，细胞即合成LDL跨膜受体蛋白，并将其嵌插到质膜中。受体与LDL颗粒受体结合后，形成衣被小泡；进入细胞质的衣被小泡随即脱掉成笼蛋白衣被，成为平滑小泡，同早期内体融合，内体中PH值低，使受体与LDL颗粒分离；再经晚期内体将LDL送人溶酶体。在溶酶体中，LDL颗粒中的胆固醇酯被水解成游离的胆固醇而被利用。第二节内质网K.R.Porter等于1945年发现于培养的小鼠成纤维细胞，因最初看到的是位于细胞质内部的网状结构，故名内质网（endoplasmicreticulum，ER）。ERSER二、ER的功能（一）、蛋白质合成蛋白质都是在核糖体上合成的，并且起始于细胞质基质，但是有些蛋白质在合成开始不久后便转在内质网上合成，这些蛋白主要有：向细胞外分泌的蛋白、如抗体、激素；膜的整合蛋白；需要与其它细胞组合严格分开的酶，如溶酶体的各种水解酶；需要进行修饰的蛋白，如糖蛋白。G.Blobel等1975年提出了信号假说(Signalhypothesis)，认为：蛋白质N端的信号肽，指导蛋白质转至内质网上合成，并因此获1999年诺贝尔生理医学奖。蛋白质转移到内质网合成涉及以下成分：信号肽（signalpeptide），位于新合成肽链的N端，一般16~30个氨基酸残基，含有6-15个连续排列的带正电荷的非极性氨基酸，由于信号肽又是引导肽链进入内质网腔的一段序列，又称开始转移序列（starttransfersequence）；AASequencesofERSignalPeptides信号识别颗粒（分子伴侣）（signalrecognitionparticle，SRP），由6种多肽组成，结合一个7SRNA，属于一种RNP(ribonucleoprotein)。能与信号序列结合，导致蛋白质合成暂停。SRP受体（SPRreceptor），内质网膜的整合蛋白，异二聚体，可与SRP特异结合。停止转移序列（stoptransfersequence），与内质网膜的亲合力很高，阻止肽链继续进入网腔，成为跨膜Pr。转位因子（translocator，translocon），由3-4个Sec61蛋白构成的通道，每个Sec61由3条肽链组成。TranslocationofsolubleproteinsacrossERInsertionofaMultipassTransmembraneproteinintotheERmembrane（二）、蛋白质的修饰与加工包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等，其中最主要的是糖基化，几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。糖基化的作用：①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用；②赋予蛋白质传导信号的功能；③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。内质网上进行N-连接的糖基化。糖的供体为核苷糖，如CMP-唾液酸、GDP-甘露糖、UDP-N-乙酰葡糖胺。糖分子首先被糖基转移酶转移到膜上的磷酸长醇（dolicholphosphate）分子上，装配成寡糖链。再被寡糖转移酶转到新合成肽链特定序列（Asn-X-Ser或Asn-X-Thr）的天冬酰胺残基上。….（四）、内质网的其它作用合成磷脂、胆固醇等膜脂，合成后以出芽的方式转运至高尔基体，溶酶体和质膜上，或借磷脂转移蛋白（PTP）形成水溶性复合物，转至其他膜上。解毒，如肝细胞的细胞色素P450酶系。参与甾体类激素的合成。使葡糖6-磷酸水解，释放糖至血液中。储存钙离子，作为细胞内信号物质，如肌质网。提供酶附着的位点和机械支撑作用。第三节高尔基体最早发现于1855年，1889年，Golgi用银染法，在猫头鹰的神经细胞内观察到了清晰的结构，因此定名为高尔基体。20世纪50年代以后才正确认识它的存在和结构。一、形态与组成是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器,常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形。凸出的一面对着内质网称为形成面或顺面（cisface）。凹进的一面对着质膜称为成熟面或反面（transface）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡。扁平囊直径约1um，单层膜构成，中间为囊腔，周缘多呈泡状，4~8个扁平囊在一起(某些藻类可达一二十个)，构成高尔基体的主体(Golgistack)。高尔基体膜含有大约60%的蛋白和40%的脂类，具有一些和ER共同的蛋白成分。磷脂酰胆碱的含量介于ER和质膜之间，中性脂类主要包括胆固醇，胆固醇酯和甘油三酯。高尔基体中的酶：糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。标志酶为糖基转移酶。二、功能区隔顺面的网络结构（cis

Golginetwork，CGN），高尔基体的入口区域。中间膜囊（medialGolgi），多数糖基修饰，糖脂的形成以及与高尔基体有关的糖合成均发生此处。反面的网络结构（transGolginetwork，TGN），高尔基体的出口区域，功能：参与蛋白质的分类与包装，最后输出。高尔基体各部分膜囊具有不同的细胞化学反应：①嗜锇反应：cis面膜囊被特异地染色；②焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)：可特异显示高尔基体的trans面的1～2层膜囊；③烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)：可显示高尔基体中间几层扁平囊；④胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)：可显示靠近trans面上的一些膜囊状和管状结构，CMP酶也是溶酶体的标志酶。三、主要功能1、参与细胞分泌活动RER上合成蛋白质→进入ER腔→COPII运输泡→进入CGN→在medialGdgi中加工→在TGN形成运输泡→运输与质膜融合、排出。高尔基体对蛋白质的分类，依据的是蛋白质上的信号肽或信号斑。2、蛋白质的糖基化O-连接的糖基化在高尔基体中进行，糖的供体为核苷糖。3、进行膜的转化功能内质网上合成的新膜脂转移至高尔基体后，经过修饰和加工，形成运输泡与质膜融合。4、将蛋白水解为活性物质如将蛋白质N端或C端切除，成为有活性的物质，如胰岛素（C端）；或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽，如神经肽。5、参与形成溶酶体。6、参与植物细胞壁的形成，合成纤维素和果胶质。高尔基体分泌功能示意图第四节溶酶体与过氧化物酶体一、溶酶体的结构溶酶体（lysosome）为C.deDuve与B.Novikoff1955年首次发现。是单层膜围绕、内含多种酸性水解酶类的囊泡状细胞器，其主要功能是进行细胞内消化。具有异质性，形态大小及内含的水解酶种类都可能有很大的不同。酸性磷酸酶是标志酶。膜有质子泵，将H+泵入溶酶体，使其PH值降低。膜蛋白高度糖基化，可能有利于防止自身膜蛋白降解1、初级溶酶体（primarylysosome）直径约0.2~0.5um，有多种酸性水解酶，但没有活性，包括蛋白酶，核酸酶、脂酶、磷酶酶等60余种，反应的最适PH值为5左右。2、次级溶酶体（secondarylysosome）是正在进行或完成消化作用的溶酶体，内含水解酶和相应的底物，可分为自噬溶酶体（autophagolysosome）和异噬溶酶体(phagolysosome)。3、残体（residualbody）又称后溶酶体（post-lysosome）已失去酶活性，仅留未消化的残渣，故名。残体可通过外排作用排出细胞，也可能留在细胞内逐年增多，如表皮细胞的老年斑，肝细胞的脂褐质。Secondarylysosome肝细胞脂褐质二、溶酶体的功能细胞内消化：如高等动物内吞低密脂蛋白获得胆固醇，单细胞真核生物利用溶酶体的消化食物。自体吞噬：清除无用的生物大分子、衰老细胞、细胞器、个体发育中多余的细胞。许多生物大分子的半衰期只有几小时至几天，肝细胞中线粒体的平均寿命约10天左右。防御作用：如巨噬细胞杀死病原体。参与分泌过程的调节：如将甲状腺球蛋白降解成有活性的甲状腺素。形成精子的顶体。三、溶酶体的发生初级溶酶体是在高尔基体的反面以出芽的形式形成，形成过程：内质网上核糖体合成溶酶体蛋白→进入内质网腔进行N-连接的糖基化修饰→进入高尔基体cis面膜囊→磷酸转移酶识别溶酶体水解酶的信号斑→将乙酰葡糖胺磷酸转移在1~2个甘露糖残基上→在中间膜囊切去N-乙酰葡糖胺形成M6P配体→与trans膜囊上的受体结合→通过clathrin衣被包装成初级溶酶体。TherecognitionofalysosomalhydrolaseinGolgiandmannosephosphorylation

Transportofnewlysynthesizedhydrolasestolysosomes矽肺：二氧化硅尘粒（矽尘）吸入肺泡后被巨噬细内吞噬，导致吞噬细胞溶酶体破裂，水解酶释放，细胞崩解，矽尘释出，如此反复进行。激活成纤维细胞，导致胶原纤维沉积，肺组织纤维化。肺结核：结核杆菌不产生内、外毒素,也无荚膜和侵袭性酶。但是菌体成分硫酸脑苷脂能抵抗溶酶体的杀伤作用,使结核杆菌在肺泡内大量生长繁殖,导致巨噬细胞裂解,释放出的结核杆菌再被吞噬而重复上述过程，引起肺组织钙化和纤维化。类风湿性关节炎：溶酶体膜很易脆裂。四、溶酶体与疾病4．各类贮积症台-萨氏综合征（Tay-Sachsdiesease）：溶酶体缺少氨基已糖酯酶A，导致神经节甘脂GM2积累。II型糖原累积病（Pompe病）：缺乏α-1,4-葡萄糖苷酶，糖原在溶酶体中积累。Gaucher病：缺乏β-葡萄糖苷酶，葡糖脑苷脂沉积。细胞内含物病（inclusion-celldisease）：N-乙酰葡糖胺磷酸转移酶单基因突变。高尔基体中加工的溶酶体前酶上不能形成M6P分选信号，病人成纤维细胞的溶酶体中没有水解酶，底物在溶酶体中贮积，形成“包涵体”台-萨氏综合症溶酶体的同心圆结构五、过氧化物酶体是一种具有异质性的细胞器。直径通常0.5um，呈圆形，椭圆形或哑呤形不等，由单层膜围绕而成。特点：含过氧化氢酶（标志酶）和一至多种依赖黄素（flavin）的氧化酶，已发现40种氧化酶，各类氧化酶的共性是将底物氧化后生成过氧化氢。而过氧化氢酶又利用H2O2去氧化其它底物。RH2+O2→R+H2O2Peroxisomeofhepatocyte水仙叶肉细胞微体烟草叶肉细胞的过氧化物酶体（中央具有尿酸氧化酶形成的晶体状核心）

在动物中：①参与脂肪酸的β-氧化；②具有解毒作用，过氧化氢酶利用H2O2将酚、甲醛、甲酸和醇等有害物质氧化，饮入的酒精1/4