动植物细胞培养制药技术课件

生物技术10级（2）班小组成员：xxxxxxxxxxxx

动物细胞培养制药技术细胞培养工程概述动物细胞培养工程是以动物细胞培养技术为主要手段，对动物细胞在离体条件下的细胞形态、结构、生理功能进行研究，在此基础上，采用工程技术手段对细胞的遗传或生理特性进行改造，以获得有价值的细胞产物、器官或个体的生物技术。

动物细胞培养工程主要包括动物细胞培养、细胞杂交（融合）技术、胚胎培养、细胞核移植、干细胞培养等。

基本培养技术的建立1907年，实验胚胎学家Harrison（哈里森）采用盖片悬滴培养法，将神经组织培养了数周，并观察到神经突起的生长。这项工作标志着体外培养技术的创立。1912年，外科医生AlexisCarrel将外科手术的无菌操作观念带入体外培养技术。1923年，Carrel又设计出卡氏瓶培养法，进一步扩大了组织的培养空间。卡氏瓶已成为体外培养的重要器皿。体外培养技术的发展史1950年，JFMorgan等人提出了199培养基。1951年Pomerat设计出灌流小室，实现了培养液的不断更新。1954年，Earle等建立了悬浮培养法。1955年，HEagle提出了著名的Eagle培养基。1957年，Dulbecco采用胰蛋白酶消化法分离细胞，创造了单层细胞培养法，以后的学者采用该方法建立了许多细胞系（cellline）。1959年，Lovelock等人发现了一种新的化学冷冻保护剂——二甲基亚砜（DMSO）1960年，Baski观察到两种不同细胞混合培养所产生的细胞自发融合现象。体外培养技术的应用在组织学与胚胎学上的应用在细胞学上的应用在肿瘤学方面的应用在微生物领域的应用在免疫学方面的应用在药理学领域的应用在生物制药及现代医学上的应用

动物细胞生产生物药品历程大规模动物细胞制药品大约始于20世纪50年代，Earle等开发出培养基之后，主要用于生产病毒疫苗1967年，VanWazel开发了适合贴壁细胞生长的微载体，使得动物细胞的培养能够在搅拌釜式反应器中进行，极大地提高生产率1975年，Kohlor和Mnazek开发了中空纤维反应器，使细胞密度大幅度提高1978年，Lim开发了细胞微囊化技术动物细胞生产生物制品的分类病毒疫苗如口蹄疫（FMD）、狂犬（Rabies）、小儿麻痹症（Polio）、乙型肝炎（Hb-sAg）疫苗等非抗体免疫调节剂如干扰素（IFN）、白介素（IL）、集落刺激因子（CSF）、B细胞生长因子（BCGF）等多肽生长因子如神经生长因子（NGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、血清扩展因子（SF）等酶如组织血纤维溶酶原激活剂（tPA）等激素如红细胞生成素（EPO）、促黄体生成素（LH）、促滤泡素（FSH）等病毒杀虫剂如杆状病毒肿瘤特异性抗原如癌症胚抗原、单克隆抗体、细胞本身、皮肤重植动物细胞培养特性细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差需氧少，不耐受强力通风与搅拌群体生长效应（集群），贴壁生长培养过程产品分布细胞内外，成本高大规模培养时，不可套用微生物反应的经验原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡细胞培养过程的检测细胞计数细胞常规检查细胞生物学检查和鉴定细胞培养中支原体的污染检查

动物细胞培养基本流程动物细胞培养制药工艺实例组织纤溶酶原激活剂生产工艺：细胞单层细胞悬浮液细胞培养物培养液提取液层析液浓缩液层析液tPA成品分散培养分离提取层析纯化浓缩层析精制冻干生物制药工艺过程，可分为上游工程和下游工程。对于纯度要求高的产品，分离纯化工序很复杂，生物药品下游工程的主要技术要求是根据产品的特性，尽可能提高产品的的收率和纯度，因此，对下游工程的投资往往大于上游工程。动物细胞培养技术发展前景动物细胞基因工程技术和杂交技术新型细胞培养反应器及其培养技术无血清、低蛋白或无蛋白培养基新型微载体研制技术