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文档简介
食品化学实验指引实验一蛋白质功能性质(一)一、引言能性质与蛋白质在食品体系中用途有着十分密切关系,是开发和有效运用蛋白质资源重要根据。重要波及有吸水性、溶解性、保水性、分散性、粘度和粘着性、乳化性、起泡性、凝胶作用等。本实验以卵蛋白、大豆蛋白为代表,通过某些定性实验理解它们重要功能性质。二、实验材料和试剂蛋清蛋白;2%蛋清蛋白溶液:取2g蛋清加98g蒸馏水稀释,过滤取清液;卵黄蛋白:鸡蛋除蛋清后剩余蛋黄捣碎。分离大豆蛋白粉;1M盐酸;1M氢氧化钠;饱和氯化钠溶液;饱和硫酸铵溶液;酒石酸;硫酸铵;氯化钠;δ—葡萄糖酸内酯;氯化钙饱和溶液;水溶性红色素;明胶。三、实验环节(一)蛋白质水溶性50ml0.5ml5ml生。在溶液中逐滴加入饱和氯化钠溶液,摇匀,得到澄清蛋白质氯化钠溶液。取上述蛋白质氯化钠溶液3ml,加入3ml硫酸铵至饱和,摇匀,观测清蛋白从溶液中析出,解释蛋清蛋白质在水中及氯化钠溶液中溶解度以及蛋白质沉淀因素。0.1-0.2g5ml1M1M在第一、第二支试管中加入饱和硫酸铵溶液3ml1M1M氢氧化钠中和至pH4-4.5,观测沉淀生成,解释大豆蛋白溶解性以及pH白溶解性影响。(二)蛋白质乳化性取5g250ml烧杯中,加入95ml10ml510分钟,待泡沫大某些消除后,取出10ml状液在显微镜下仔细观测,被染色某些为水相,未被染色某些为油相,根据显微镜下观测所得到染料分布,拟定该乳状液是属于水包油型还是油包水型。0.5g10ml植物油进行乳化。静止10分钟后,观测其乳状液稳定性,同样在显微镜下观测乳状液类型。(三)蛋白质起泡性250ml2%1-21-21-2250ml10℃,一份保持常温30-3℃,同步以相似方式搅打1-2取三个250ml烧杯各加入50ml,其中一份加入酒石酸0.5g0.1g1-2分钟,观测泡沫产生多少及泡沫稳定性有何不同。用2%大豆蛋白溶液进行以上同样实验,比较蛋清蛋白与大豆蛋白起泡性。(四)蛋白质凝胶作用1ml1ml半晌观测凝胶形成。100ml2g50.1-0.2gδ—葡萄糖酸内酯,放置温水浴中数分钟,观测凝胶生成。0.5g明胶,5ml解释在不同状况下凝胶形成因素。实验二美拉德反映初始阶段测定一、原理美拉德反映即蛋白质、氨基酸或胺与碳水化合物之间互相作用。美拉德起始反映,以无紫外吸步尚有少量糖脱水变成5羟甲基糠醛(HM,以及发生健断裂形成二羰基化合物和色素初产物,最后生成类黑精色素。本实验运用模仿实验:即葡萄糖与赖氨酸在一定pH定期间后测定HMF285nm(。HMF大吸取波长550nm时要注意。二、仪器与试剂(一)仪器:分光光度计、水浴锅、试管、碱性pH(测pH9.0样品等。(二)试剂500mg,加约70ml100ml容量瓶中,定容。)10.0g50ml异丙醇,在水浴上慢慢加热使之溶解,冷却后移入100ml容量瓶中,加冰醋酸244-5天后,如呈色度增长,应重新配制。3.1mol/L葡萄糖溶液。4.0.1mol/L赖氨酸溶液。5.2mol/L亚硫酸钠溶液三、操作环节11 2 2 3 4 5 2 4 (一)55ml1.0mol/L0.1mol/L赖氨酸溶液,编号为A,AAAA。A、A调pH到9.(0.1mol/LNaOH调节pA加亚硫酸钠溶液2m5支试901hA,A,A285nm(以现)11 2 2 3 4 5 2 4 1 2 (二)HMF测定:A,A,A2.0ml。然后分1ml,另取一支试管加A12ml5ml对一氨基甲苯溶液,但不加巴比妥酸液而加1ml蒸馏水,将试管充足振摇。试剂添加要持续进行,在1-2min1 2 编号901小时1h后反映条件(1-2min内迅速加完)对照迅速测定A1编号901小时1h后反映条件(1-2min内迅速加完)对照迅速测定A1加热测285nm吸光值 取2.0ml,加对氨基甲苯,巴比妥酸550nm吸光值A2
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