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2020ICU2020ICU患者支气管肺泡灌洗液采集、送检、检测及结果解读规范与普通病房及病情相对稳定的患者相比。ICU环境微生态更为复杂,标本采集和送检污染机会多,危重症患者接受气管镜检查和支气管肺泡灌洗要求也更为苛刻,标本检测程序和结果解读需要精细准确。因此,ICU危重症患者合格的BALF获取、及时送检、规范检测和结果的正确判读直接影响到患者的诊治,直接决定患者预后。因而有必要制定针对ICU危重症患者的BALF标本留取、送检、检测及结果解读规范。由中华医学会呼吸病与普通病房及病情相对稳定的患者相比。ICU环境微生态更为复杂,标本采集和送检污染机会多,危重症患者接受气管镜检查和支气管肺泡灌洗要求也更为苛刻,标本检测程序和结果解读需要精细准确。因此,ICU危重症患者合格的BALF获取、及时送检、规范检测和结果的正确判读直接影响到患者的诊治,直接决定患者预后。因而有必要制定针对ICU危重症患者的BALF标本留取、送检、检测及结果解读规范。由中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组和中国医师协会呼吸医师分会危重症医学工作委员会牵头撰写ICU中BALF的操作规范,对提高BALF的诊断价值有积极意义。(bronch(bronchoalveovageALF)BALF结果的前提,而通过不恰当的操作方式获得的结果易误导临床诊1999[1012"BALF[2017年[3(tensivecareunICU)BALF标本留取、送检及临床应用的操作规范。为此,中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组了本规范,以期为操作规范。为此,中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组了本规范,以期为UBALF采集、送检及临床应用提供()12()123.明确支气管-肺部疾病的病因、发病机制等需要获取标本者。4()[45]。()()11(F)0.9~1.0>90>15cmH2O(1cmH2O=0.098kPa35cmH2O或P或PaO2/2<80mmHg(1mmHg=0.133kPa(<7mm)[67,8,9,1024常、急性心力衰竭、血液动力学不稳定(尽管应用血管活性药物24常、急性心力衰竭、血液动力学不稳定(尽管应用血管活性药物<55>0.15gkg-1mn1>5gkg1mn-1)[6]。以上情况原则上应推迟支气管镜操作。3.凝血功能紊乱:血小板计数<203.凝血功能紊乱:血小板计数<2009/L(R)>3(PT)(APTT)1.5[36,7,11124>204>20mmHg[131455))1400~700mg/L30m2.物品消毒:物体表面使用42.物品消毒:物体表面使用400~700mg/L1000~2000mg/L3(3(N9522))1无菌隔离衣、无菌手套、无菌治疗巾;无菌石蜡油、灭菌注)1无菌隔离衣、无菌手套、无菌治疗巾;无菌石蜡油、灭菌注500m、酶洗液;注射用盐酸丁卡因50mg22药物(如右美托咪定、丙泊酚等);0.9100m、0.12洗必泰洗必泰(或无菌生理盐水、0.12%氯已定溶液)、10ml20ml注射器、负压吸引器、一次性无菌集痰器、一次性使用牙垫、一5注射器、负压吸引器、一次性无菌集痰器、一次性使用牙垫、一500mg/L或1000mg/L()22())1)12(1)消化道准备:自主进食者需术前2(1)消化道准备:自主进食者需术前4~6h禁食,留置鼻4h0.5h(hmondagitansedatnscaleRASS-3)8h2h[15或胃潴留,适当延长禁食水时间;如有活动义齿,于检查前取下(RASS)(2)疗(hwnasalcannuHFNC)及普通氧疗者选取仰卧位;无创、有创正压通气者选取30~4530[16(3)检查结束后,浅镇静(RASS评)2h6h302h[1718];应在检查中及结束后2h(1)无人工气道:口鼻腔护理,推荐使用0.12()(2)5~30cmH2O0.12[16(1)HFNC及普通氧疗:雾化+局部麻醉。①雾化:将25mlICU7.5ml50mg喷雾器内,行分段黏膜表面喷雾麻醉,先咽部后鼻腔,间隔喷雾器内,行分段黏膜表面喷雾麻醉,先咽部后鼻腔,间隔4~5m32(3~5mm32(3~5m)(2)/镇25mlT/HFNC及普通氧疗;③镇静镇痛:无人工气道患者行支气管镜检查时,应用镇静药物需进行(RASS0~-3的抑制作用。镇静药物推荐短效类镇静剂(如右美托咪定,丙泊酚等),个别患者可以联合应用阿片类药物(如舒芬太尼、瑞芬)[1920)(3)有创正压通气(气管插管/)静镇痛。①雾化:同无创正压通气的雾化,注意雾化器应连接在()(四)注意事项15m.低氧血症高危风险患者建议在现有呼吸支持条件下检查:HFNC/HE全脸罩(1)进行无创正压通气保证[21图图1(A)和全脸罩(BB)3.HFNC:初始参数设置:流速≥3.HFNC:初始参数设置:流速≥0L/m、给予最高浓度氧,并根据SpO2≥02234FiO2为0.5~1.0,呼气末正压(EPAP)5H2O,吸气末正压(AP)30cmH2O8~10mSpO2≥90[24255FiO2为1.05FiO2为1.0PEEP为0~2cmH2O(ARDS)/[20束后,应调回原有参数设置,ARDSPEEP66/(ET)()[26)2图2支气管镜操作前准备流程图三、支气管肺泡灌洗的操作流程(一)支气管镜进入流程进入方式分为经鼻、口或人工气道(一)支气管镜进入流程进入方式分为经鼻、口或人工气道进入1(7进入1(721~2ml21~2ml21~2ml[285mg/kg512mg[2922(),3用鼻罩者,经口进入(3用鼻罩者,经口进入(带咬嘴或牙垫)。必要时轻度镇静,通气[2530],可选间歇正压通气//(FiO2)0.5~1.0(BAL前前FiO2设为1.05~15m),调整呼吸机参数())SpO290[3132前。41.5~2mm差值341.5~2mm差值3模式(优先选择容量控制通气模式[34F1.0(FiO2设为1.05~15m)(10~12/m)ARDS或氧合较好者,将PEEP0cmH2OARDS,肺泡萎陷风险高者,PEEP50TFiO2设为1.010m[243536()1()1[363738(1)病变部位,新出现或逐渐进展的浸润性病灶;(2)BBALF2[32[390.937℃(也可使用室温无菌生理盐水),用注射器经支气20~50m,常规灌洗3~560~120m4032325~100mmHgBALF[41>305m[384B4BALF21管BALF影响检测结果,建议单独处理作为临床参考依据,第2管送检病原微生物检验,第原微生物检验,第3[34243()1()1行快速检查,再进入目标肺段进行灌洗操作;而病变位置明确或病情危重者,直接进入目标肺段进行灌洗[28]。尽量减少在未到染。2.支气管镜进入目标肺段灌洗时嵌顿要适度,若嵌顿不佳,B2.支气管镜进入目标肺段灌洗时嵌顿要适度,若嵌顿不佳,BALF回收量减少;若嵌顿过度,3BALF3BALF的[44(3)洗操作如下:当支气管镜送达目标支气管段开口后,经操作孔道()1.5~2ml生理盐水,冲掉导管头部的可溶性管塞,用20ml3710~20mlBALF5图3(A),支气管镜前端在目(B)4.操作过程严密监测患者生命体征、SpO2、呼吸机参数指标;动作轻柔,充分麻醉,避免剧烈咳嗽或负压过大损伤支气管引起黏膜出血,导致BALF100mmHg1(()1(1面罩吸氧和高流量氧疗患者:p1(1面罩吸氧和高流量氧疗患者:pO2<90F为1.0SpO2>9030s[2223SpO290(2)pO2<90F1.0EPAP2~4cmH2O[30若SpO2<801m[46SpO2<85[25(3)有创机械通气患者:pO2<90时,保证FiO2为1.0PEEP[47SpO2<801m[462(1)无人工气道患者:①少量出血(2(1)无人工气道患者:①少量出血(<30m:减小回抽负压(<100mmHg,以调整到在吸引时管腔不塌陷为宜[23]),(110000或100000.6mg[48(30~100m4(50m[49上腺素,必要时局部注入凝血酶(1000U/m~10m0③大量出血(>100m:头低位并出血侧卧位,经支气管镜注入冰盐水、肾上腺素或凝血酶,快速吸引,清除血凝块,垂体后00(2)[51]:①少量或中等量出血:处理同无人工气道患者。②大量清除凝血块,药物止血。出血仍未停止者球囊填塞止血、支气管3(1)FiO2调至1.03(1)FiO2调至1.0[3952]:雾化吸入沙丁胺醇2.5mg0.5mg1~2mg40~80mg160~320mg/d[53SpO285压通气。(2)有创机械通气患者:首选P-SIMVPSV模式,参[3952FiO21.0136~12/mn6~10mPEEP为0cmH2OSpO2为90%~95[39445(1)()5(1)()FiO21.03m补液,静脉予去甲肾上腺素(起始剂量<0.15gkg-1mn-1)、(<5gkg1mn-1)[54([47(极其罕见)(2)者:退镜中止操作,心律失常处理同非有创机械通气患者。低血PEEP[2425PEEP[2425()()主要为发热,常见原因为肺炎和血流感染[47],亦可见于吸收热。完善床旁X线胸片、血细菌真菌培养、血常规、CRPPCTX大,提示可能有新的感染,根据B大,提示可能有新的感染,根据BALF抗感染方案。血培养阳性提示为血流感染,根据BALF()BALF()BALF的标本,可用无菌纱布过滤或使用0.1[2溶解方法:一般选择0.5ml0.12mlBALF混合(配制比例约为1),灌洗液黏液成分较多,可适当提高375~10m30m生物含量少,如需观察细胞、细菌形态及含量可应用离心机进行1600g10m(g=r1.180-6m2)0.3mlBALF20的中央,以画圈的方式涂出面积大小约1225]。涂片应在生物安全柜[56(4)图4BALF()1(Diukstain)革兰染色(Gram);特殊染色包括六胺银染色(Hexamerstaing)(Indiakstag)(1)迪夫快速染色:①迪夫A(DiquA)溶液,主要成分为曙红、B(DquB)AB溶液、磷酸盐缓冲溶液适量倒于带盖的染缸中;把干燥后的玻片A20~30;于磷酸盐缓冲溶液中洗掉迪夫AB20~30s;(2)媒染、脱色、复染等4个步骤,具体操作方法是:①涂片、干燥同上,固定方法:常用高温进行固定。即手持载玻片一端,标本面朝上,将涂有标本的载玻片快速来回通过酒精灯外焰3~4次,3~4,冷却后进行染色。要求玻片温度不超过601m1m1m95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30s()30s()1()1BALF(包括红细胞)<1%,柱状上皮细胞<5%时,红细胞<10(/)[3555%,表明标本包含上呼吸道(结果仅供参考。2BA2BALF>8510~15%,中性粒细胞≤[2BALF3~5倍,[4257()()1固定,细胞损失少。染色过程简单、快速,且更容易识别细胞质[581)(1)淋巴细胞>15>25()>50(2>25()>50(2)胞>3%:提示胶原血管病、特发性肺纤维化、吸入性肺炎、细菌或真菌感染、支气管炎、石棉肺、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、>50急性肺损伤、吸入性肺炎或化脓性感染。(3)嗜酸粒细胞>1%:(真菌、蠕虫、肺孢子虫)、霍奇金病。另外,嗜酸粒细胞计数是>25(4)>150>3%时,强烈提示急性过[3(5)如见中性粒细胞或巨噬细胞吞噬病原微生物52.微生物学评价可使用革兰染色或迪夫快速染色2.微生物学评价可使用革兰染色或迪夫快速染色(5)图5BALFAC()BD()3.采用二步法观察涂片:先用低倍镜(40或100倍)全片,观察是否存在可疑细胞、粗大菌丝,再用高倍镜(400或1000倍)作细胞分类、鉴定细胞性质、观察微生物形态、判断(5A5D)()BALFBBALFALF12125.9U/L125U/LBAL72h[59BALBALFBALF标本,建议使用有机硅涂层玻璃或聚m10~20mBALF500~1000mg/L15m()1()1BALF>1mh2h4℃保存≤4h运时间≥h02()333030m4h4℃保存≤d5d-70[6154℃保存≤h[61()[611℃()[611℃d5d-702(1-3)(G)h4℃保存≤d5d-703.曲霉半乳甘露聚糖抗原(gactomannanGM)室温保存≤h4℃保存≤4h24h-2011[361624h4℃保存≤2h54℃保存≤~14d6h4℃保存≤7d。()(metagenomsnext-generansequencingmNGS)11BALFDNA/RNA3m。2DNA/RNA3m。24℃保存≤4h。如进行核糖核苷酸(RNA)-706糖核苷酸(DNA)20℃保存≤-70℃0m4h4h-703-70干冰(干冰温度为-78.5)在医用冷藏加厚泡沫箱里进行密封运输,且需保证标本在送至检测单位时仍有干冰覆盖(防止优势RNA)[634()BA()BALFT测0m30~60m后到达实验室,4℃()保存运输。如果标本超过60m室,建议先250~300g10m()4℃保存≤4hBALF24h[2BALF()()BALF10~20ml5m3()1.标本送至实验室后,需立即处理。先观察灌洗液的性状、()1.标本送至实验室后,需立即处理。先观察灌洗液的性状、颜色和总量,并记录。如果含有黏液成分的标本,可用无菌纱布0.124224250~300g10m3~5mlMEM125mmoHEPES或RPMI1640125mmoHEPES(Ca2Mg2Hanks554-703B3BALF106/ml表示。如果细胞数过高时,再用细胞重悬液稀释,调整细胞数为506/m[55(506/m004(250~30010mBALF(Wt-Giemsastag)(hematoxy-eostaingHE)41556465.先在低倍光学显微镜(40)下观察整张片子的情况,(0)400[26图6常见支气管灌洗液中各类细胞的形态(HE 高倍放大)。图A~G分别为肺泡巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞嗜酸粒细胞、不合格标本、尘细胞、肺泡蛋白沉积症患者灌洗液()11h1h(250~300)10m后,在细胞培养基中重424h44℃下可保留12h[2221BALBALF()122334455667788()()1BALF1mBALF(1500~1800)g15~20m。细菌培养接种于血平板及麦康凯()平板,置普通培养箱3平板,置普通培养箱35~375CO23535~37℃培养。真菌培养接种于沙保弱培养基(培养基于25℃培养。普通细菌培养至少2
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