清燥润肺合剂质量标准研究

清燥润肺合剂质量尺度研究周娟娟,潘金火,卢欢,朱宁静,潘文【摘要】目的创立清燥润肺合剂的质量尺度。要领接纳薄层色谱法对制剂中桑叶、甘草、北沙参、麦冬、枇杷叶举行定性区分；接纳高效液相色谱法对制剂中甘草酸含量举行测定。结果薄层色谱中阴性无滋扰,专属性强；甘草酸在0.2031～1.6921μg范畴内线性干系精良,r＝0.9998,均匀接纳率为98.24%,rsd＝2.62%。结论本试验创立的要领轻便、快捷,重复性好,可用于清燥润肺合剂的质量操纵。【关键词】清燥润肺合剂；质量尺度；甘草酸；高效液相色谱法；薄层色谱法keyrds：qingzarunfeiixture；qualitystandard；glyyrrhiziaid；hpl；tl清燥润肺合剂由桑叶、石膏、甘草、黑芝麻、北沙参、麦冬、枇杷叶等9味药材构成。具有清燥润肺之效,用于燥气伤肺、干咳无痰、气逆而喘、咽干鼻燥、心烦口渴等病症。笔者按照处方构成药物的理化性子[1]及重复试验,对桑叶、甘草、北沙参、麦冬、枇杷叶举行了区分,同时,接纳高效液相色谱法测定了制剂中甘草酸的含量,创立了可靠、不变、简朴的质量操纵要领。1仪器与试药agilent1100高效液相色谱仪,agilent1100紫外检测器,hphestatins事情站。清燥润肺合剂10批样品由扬州市三药制药消费并提供(批号为061101、061102、061103、061104、061105、061106、061107、061126、061128、061130)；甘草药材购自扬州市药材公司(由扬州市三药制药提供,批号为060912、060920、060928),经南京中医药大学王春根传授断定为豆科植物甘草的枯燥根及根茎；甘草酸铵比较品购自中国药品生物成品检定所(批号110731-202211)。硅胶g由青岛海洋化工场消费；全部试剂由上海久亿化学试剂消费,均为阐发纯或色谱纯。2定性区分2.1桑叶取桑叶比较药材2g,加石油醚(60～90℃)20l,超声处置惩罚20in,弃去石油醚液,药渣挥干,加无水乙醇30l,超声处置惩罚20in,滤过,滤液蒸干,残渣加水30l使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为比较药材溶液。取本品20l,蒸干,残渣加80%乙醇50l,超声处置惩罚20in,滤过,滤液蒸干,残渣加水30l使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为供试品溶液。取除桑叶以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品20l,用与供试品溶液制备雷同的要领制得阴性比较液。汲取上述3种溶液各5μl,别离点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶g薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)的上层溶液为睁开剂,置于睁开剂预饱和20in的睁开缸内,睁开,取出,晾干,置紫外光灯(365n)下检视。供试品色谱中,在与比较药材色谱对应的位置上,表现雷同颜色的荧光斑点,而阴性比较液无此斑点。2.2甘草[2]取甘草比较药材1g,加乙醚30l,超声处置惩罚20in,滤过,药渣挥干,加甲醇30l,超声处置惩罚20in,滤过,滤液挥干,残渣加水30l使溶解,滤过,用水饱和的正丁醇萃取2次,每次20l,归并正丁醇液,用水洗涤2次,每次20l,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为比较药材溶液。取本品10l,加乙醚30l,超声处置惩罚20in,静置分层,置分液漏斗中,分出水层,用水饱和的正丁醇提取2次,每次20l,归并正丁醇液,用水洗涤2次,每次20l,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为供试品溶液。取除甘草以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品10l,按供试品溶液制备要领制得阴性比较液。汲取上述3种溶液各5μl,别离点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15∶1∶1∶2)为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清楚。供试品色谱中,在与比较药材色谱相应位置上,显雷同颜色的斑点,阴性比较液无滋扰。2.3北沙参取北沙参比较药材5g,加乙醚30l,加热回流1h,滤过,滤液挥干,残渣加乙醇1l使溶解,作为比较药材溶液。取本品10l,蒸干,残渣加乙醇20l使溶解,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1l使溶解,作为供试品溶液。取除北沙参以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品10l,按供试品溶液制备要领制得阴性比较液。汲取上述3种溶液各10μl,别离点于同一硅胶g薄层板上,以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(1∶1)为睁开剂,睁开,取出,晾干,置氨缸内熏40in,紫外光灯(365n)下检视。供试品色谱中,在与比较药材色谱对应的位置上,表现雷同颜色的荧光斑点,阴性比较液无滋扰。2.4麦冬取麦冬比较药材2g,加水20l,加盐酸2l,煮沸2in,放冷,滤过,滤液用三氯甲烷10l萃取,取三氯甲烷液,蒸干,残渣加三氯甲烷0.5l溶解,作为比较药材溶液。取本品10l,加盐酸1l,煮沸2in,放冷,滤过,滤液用三氯甲烷10l萃取1次,取三氯甲烷液,蒸干,残渣加三氯甲烷0.5l使溶解,作为供试品溶液。取除麦冬以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品10l,按供试品溶液制备要领制得阴性比较液。汲取上述溶液各约5μl,别离点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(20∶1)为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清楚。供试品色谱中,在与比较药材色谱相应位置上,显雷同颜色的斑点,阴性比较液无滋扰。2.5枇杷叶取枇杷叶比较药材5g,加水200l煎煮2h,滤过,滤液用5%的氢氧化钠溶液调ph值至10,用乙酸乙酯40l萃取,浓缩,残渣加1l甲醇溶解,作为比较药材溶液。取本品10l,加水20l稀释,摇匀,滤过,用5%的氢氧化钠溶液调ph值至10,用乙酸乙酯40l萃取,浓缩,残渣加1l甲醇溶解,作为供试品溶液[3]。取除枇杷叶以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品10l,按供试品溶液制备要领制得阴性比较液。汲取上述溶液各约10μl,别离点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(8∶4∶1)为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清楚。供试品色谱中,在与比较药材色谱相应位置上,显雷同颜色的斑点,阴性比较液无滋扰。3含量测定3.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为添补剂；以甲醇-水-冰醋酸(63∶36.6∶0.4)为活动相；检测波长为250n；柱温30℃。理论塔板数按甘草酸峰盘算应不低于3000。3.2比较品溶液的制备细密称取甘草酸铵比较品,加甲醇制成0.2073g/l的溶液。细密量取5l,置10l量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得0.10365g/l的比较品溶液。3.3供试品溶液的制备取10个批号的样品,每批取2份,别离细密量取20l,加水饱和的正丁醇20l,超声30in,置分液漏斗中取正丁醇液。下层加水饱和的正丁醇20l萃取,归并正丁醇液,蒸干,残渣用甲醇定量转移至10l量瓶中,定容,摇匀,即得。3.4空缺试验取除甘草以外的别的8味药材,按处方比例制得阴性样品,按供试品溶液的制备要领制得阴性比较液。细密汲取10μl,一连进样3次。结果表白,空缺比较液未检出与甘草酸铵比较液对应的色谱峰,视为空缺无滋扰。色谱图见图1。3.5线性干系观察别离汲取浓度为0.10365g/l的甘草酸铵比较品溶液(折合甘草酸为0.10153g/l)2、4、6、8、10l,用甲醇定容至10l,各进样10μl。以甘草酸铵均匀峰面积为纵坐标,进样量(μg)为横坐标举行线性回归,得回归方程：y＝721.62x－16,r＝0.9998,指标身分甘草酸的线性范畴为0.2031～1.6921μg。3.6细密度试验细密汲取同一比较品溶液10μl,一连进样5次,结果测得甘草酸铵峰面积值的rsd＝0.71%。3.7不变性试验细密汲取批号为061105的样品溶液10μl,每隔断2h进样1次,一连观察10h,峰面积的rsd＝0.74%,表白指标身分在10h内比力不变。3.8重复性试验取同一批号(061105)的样品5份,按“样品测定〞项下要领测得样品中甘草酸铵的含量,rsd＝2.11%,表白重复性精良。3.9加样接纳率试验取含量同一批号(061105)的样品6份,细密量取10l,别离细密参加浓度为0.10365g/l的甘草酸铵比较液4l,按供试品溶液的制备要领制得供试液。照“样品测定〞项下要领测定,盘算样品中甘草酸铵含量及加样接纳率,结果见表1。表1加样接纳率试验结果〔略〕3.10样品测定取10个批号的样品适量,按供试品溶液的制备要领制成供试品溶液。按上述色谱条件,别离进样10μl,各进2针,用尺度曲线法盘算含量。10个批号样品甘草酸含量测定结果依次为0.0318、0.0383、0.0393、0.0371、0.0389、0.0386、0.0385、0.0389、0.0391、0.0391g/l。4讨论在定性区分的拔取上,由于苦杏仁中的重要身分是苦杏仁苷,且其他身分的含量很少,而枇杷叶中也同样含有苦杏仁苷,故未对苦杏仁举行试验；而阿胶、黑芝麻的区分,颠末试验,阴性均有滋扰；故暂未创立此3味药的区分要领。试验表白,上述桑叶、甘草、北沙参、麦冬、枇杷叶的区分专属性强,重复性好,操纵轻便。本试验曾以甲醇为活动相a,水相为活动相b,此中水相由水-冰醋酸(100∶1)构成,a∶b＝66∶34,试验结果表现,甘草酸铵峰