虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定

虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定

刘仁旺，滕增辉，张邦乐，宦梦蕾，杨茜，周四元

【摘要】目的：创立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的高效液相色谱法，优化虎杖中有用身分白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取工艺.要领：接纳梯度法创立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷的高效液相色谱要领，以白藜芦醇和白藜芦醇苷总量为观察指标，方案以乙醇浓度、溶剂倍数及醇提温度等为影响因素的4因素3程度的正交实行，确定虎杖中上述有用身分的最正确提取工艺.效果：在选定的色谱条件下，虎杖提取物中白藜芦醇和白藜芦醇苷可以到达基线分散.检测白藜芦醇及其苷的线性回归方程别离为Y=0.0006X-0.183〔r=0.9996〕，Y=0.0011X-0.478〔r=0.9993〕；线性范畴别离为0.48～38.4g/L和0.47～38.2g/L.日内、白天细密度都小于5%，接纳率在90%～105%之间，样品阐发时间小于7in.虎杖中有用身分白藜芦醇和白藜芦醇苷的最正确提取工艺为乙醇浓度80％，溶剂倍数15，醇提温度70℃，提取时间2h.结论：创立了正确可靠、阐发速率快可同时检测虎杖提取物中白藜芦醇和白藜芦醇苷的阐发要领，优化了质量可控的提取工艺.

【关键词】虎杖；白藜芦醇；白藜芦醇苷；高效液相色谱

0弁言

1质料和要领

1.1质料白藜芦醇苷和白藜芦醇的比较品均由中国药品生物成品检定所提供；虎杖的干药材购自西安市胡家庙药材市场.2695型高效液相色谱仪，2996型二极管阵列检测器(美国aters公司)；调温式电热套(北京科伟永兴仪器)；色谱纯乙腈，甲醇(美国TEDIA公司)，其他试剂均为国产阐发纯.

1.2要领

表1HPL活动相梯度表

时间(in)〖〗乙腈(％)〖〗水(％)〖〗流速(L/in)〖〗梯度范例0〖〗28〖〗72〖〗1.0〖〗67〖〗72〖〗28〖〗1.0〖〗69〖〗72〖〗28〖〗1.0〖〗620〖〗28〖〗72〖〗1.0〖〗1

取虎杖10g，按L9(34)正交表方案的挨次，各参加设定的乙醇量，加热煎煮规按时间和次数，滤过，归并滤液，将滤液用甲醇稀释10倍后取样20μL，用HPL法测定白藜芦醇及白藜芦醇苷的峰面积，带入回归方程中，盘算出白藜芦醇和白藜芦醇苷的总量.

2效果

2.2白藜芦醇苷及白藜芦醇尺度曲线回归方程以白藜芦醇和白藜芦醇苷的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标创立尺度曲线.应用Exel软件接纳最小二乘法得到白藜芦醇和白藜芦醇苷的事情曲线回归方程：Y=0.0006X-0.183〔r=0.9996〕，Y=0.0011X-0.478〔r=0.9993〕.效果表白，白藜芦醇及其苷别离在0.48～38.4g/L和0.47～38.2g/L范畴内呈精良的线性干系.

2.3细密度和正确度测定1，5，30g/L浓度的白藜芦醇苷的日内细密度别离为4.0%，2.6%和2.0%；白天细密度别离为4.2%，4.3%和2.6%；要领接纳率别离为〔101±3.4〕%，〔94±2.3〕%和〔95±1.3〕%.白藜芦醇的日内细密度别离为5.0%,3.0%和2.0%；白天细密度别离为4.8%，3.9%和1.1%；要领接纳率别离为〔96±5.1〕%，〔95±2.6〕%和〔95±1.6〕%.效果表现本要领正确、重复性好.

2.4虎杖有用身分提取工艺的优化将测得值举行方差阐发〔表2〕，因素B差异具有统计学意义〔P0.01).由表3中举行直不雅阐发可知，A因素中各程度试验效果的和比力为：K2K1K3，均匀含量以第2程度为高；B因素中各程度试验效果的和比力为：K1K2K3，均匀含量以第1程度为高；因素中各程度试验效果的和比力为：K3K1K2，均匀含量以第3程度为高；D因素中各程度试验效果的和比力为：K2K1K3，均匀含量以第2程度为高.选择最正确的提取工艺为提取时间2h，乙醇浓度为70%，醇提温度为70℃，溶剂倍数15.表2白藜芦醇及其苷含量方差阐发效果

3讨论

比年来有较多关于虎杖有用身分白藜芦醇和白藜芦醇苷提取及含量研究的报道，多接纳单因素、正交试验及大孔吸附树脂吸附法研究白藜芦醇的提取条件［3-4］；正交试验法及乙醇回流法优选白藜芦醇提取工艺［5-7］；以白藜芦醇苷为指标，研究虎杖的提取条件等［8］，这些要领均以白藜芦醇或白藜芦醇苷单个身分为指标.由于虎杖中的活性身分白藜芦醇和白藜芦醇苷都具有庇护心脏、抗血栓、落血脂等药理作用，因此我们在本实行中测定样品中的白藜芦醇和白藜芦醇苷的总量并以此作为评价指标是公正可行的.我们的实行效果表白，正交试验及方差阐发效果虎杖醇提取工艺最大影响因素为乙醇浓度B，其次为溶剂倍数D，再次为醇提温度和提取时间A.最正确工艺乙醇浓度为80％，溶剂倍数为15，醇提温度为70℃，提取时间为2h.

综上所述，本研究创立的虎杖提取液中白藜芦醇和白藜芦醇苷的HPL检测要领具有敏捷、正确、敏捷和工艺不变、经济等特点，可用于虎杖提取液中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量测定以及有用身分提取的质量操纵.

【参考文献】［1］肖凯,宣利江,徐亚明,等.虎杖的化学身分研究［J］.中国药学杂志，2022,38(1):12-15.［2］黄永洪,史假设飞.虎杖的活性身分及其在心血管方面的研究希望［J］.牡丹江医学院学报，2022,27(1):58-60.［3］朱立贤金征宇.虎杖中白藜芦醇提取分散工艺的研究［J］.安徽农业科学,2022,33(1):77-78.［4］许汉林,付宜和,高鹏,等.虎杖中白藜芦醇的提取与分散工艺研究［J］.时珍国医国药,2022,17(8):1424-1425.［5］余淑娴，郑湘娟，余祖兵，等.正交实行法优选虎杖中自藜芦醇的提取工艺［J］.时珍国医国药,2022,17(4):594-595.［6］江曙，朱蓉蓉，张芳,等.虎杖中白藜芦醇提取要领及工艺的优化［J］.南京中医药大学学报,2022,22(3):197-199.［7］耿艳辉，李梦青，刘桂敏,等.从虎杖中提取白藜芦醇的工艺研究［J］.应用化工,2022,34(11):708-710.［8］许汉林，孙芸，邵继征,等.正交法优化虎杖中白藜芦醇苷提取工艺的研究［J］.湖北中医学院学报,2022,8(2):29-30.［9］曾开国，候团章，张胜.高效液相色谱法测定虎杖提取物中白藜芦醇的含量［J］.中国中医药科技