临床免疫学和免疫检验2014讲义-第六章_第1页
临床免疫学和免疫检验2014讲义-第六章_第2页
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文档简介

第六淀第一节沉淀反应的特沉淀反应中的抗原多为蛋白质、多糖、、毒素等可溶性物质。第二节液体内沉淀试一、絮状沉淀试(一)(二)(阵滴定抗原进行一系列稀释与恒定浓度抗反应。二、免疫浊度测(一)当反应液中抗体过量时,IC的形成随着抗原递增而增加,至抗原、抗体最适比例处达最,这就是其作用是消除蛋白质(抗原或抗体)(二)第三节凝胶内沉淀试一、单向扩散试单向扩散试验是在琼脂内混入抗体,待测抗原从局部向琼脂内扩散,如抗原和相应抗体结合,则(一)(二)1、Mancini(>48)的结果,沉淀环直径的平方与抗原浓度2、Fahey(三)1、抗必须特异性强、效价高、亲和力强,在良好条件下保存3、每次测定时必须用质控作质控4、注意双环现象(出现了两种抗原性相同成分)二、双向扩散试双向扩散试验是让抗原和抗体双方都在琼脂中各自方扩散,在比例恰当之处形成抗原抗体沉淀线,(一)(二)37℃18~24抗原或抗体在琼脂内扩散,其速度受分子量的影响。双向扩散试验是抗抗体效价滴定的常规方法。或者抗原和抗体双方皆作不同的稀释,经过扩散,形成沉淀线,以出现沉淀线最高的抗体稀释度第四节免疫电泳技术一、对流免疫电而作为抗体的IgG,等电点偏高(约为pH6~7),在pH8.6时带负电荷较少,再加上分子量较大,移动实验时在琼脂板上打两排孔,标记上正极与负极,将抗原溶液放入负极侧的,相应抗体放入正极侧的,通电后,带负电荷的抗原向正极泳动,而抗体借电渗作用向负极泳动,在两者之间或抗体的另二、火箭免疫电实验时,将抗体混合于琼脂中,样品孔中的抗原置于负,电泳时抗体不移动,抗原向正极泳动三、免疫电检测原理是先用区带电泳技术将蛋白质抗原按其所带电荷、分子量和构型不同在凝胶中电泳,分成肉眼不可见的若干区带,电泳停止后,沿电泳方向挖一与之平行的抗体槽,加入相应抗,置室温37作184形沉淀线。鉴定方面,例如多发性骨髓瘤患者在免疫电泳后,可观察到异常的M蛋白沉淀弧。四、免疫固定电清,当抗与某区带中的单克隆免疫球蛋白结合,便形成抗原抗体复合物而沉淀。五、交叉免疫电交叉免疫电泳是一种有效的抗原蛋白定量技术,可一次同时对多种抗原定量。分辨率较高,有利于各第五节沉淀反应在医学检验中的免疫浊度法主要用于血液、体液中蛋白质的测定,如免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4、(/L(CV%免疫固

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