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文档简介

汇报人:赵新日期:2016年12月21日

SchoolofLifeScienceArtemisininconcentrationandantioxidantcapacityofArtemisiaannuadistillationbyproduct黄花蒿蒸馏副产物中青蒿素的浓度和副产物的抗氧化能力

CONTENTSCONTENTSContentsBackgroundMaterialsandmethodsResultsConclusion

Background1青蒿素(artenmisinin)青蒿素是从复合花序植物黄花蒿(ArtemisiaannuaL.,即中药青蒿)叶中提取得到的一种无色针状晶体分子式为C15H22O5。属倍半萜内酯,具有过氧键和6-内酯环倍半萜(sesquiterpenes)是指分子中含15个碳原子的天然萜类化合物。如按倍半萜结构的含氧基分类,则便于认识它们的理化性质和生理活性,例如倍半萜醇、醛、内酯等。青蒿素曾被世界卫生组织称做是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”。对折磨人类和牲畜的病原虫均有高效的对抗作用。根据世卫组织的统计数据,自2000年起,撒哈拉以南非洲地区约2.4亿人口受益于青蒿素联合疗法,约150万人因该疗法避免了疟疾导致的死亡。因此,很多非洲民众尊称其为“东方神药”。2016年12月1日,在线发表于美国Cell(《细胞》)杂志上的一项突破性研究表明,这一药物或许还可以拯救数亿糖尿病患者。

Background1黄花蒿(Artemisiaannua)不仅是工业生产青蒿素的唯一来源。在黄花蒿植物体内包含一种散发芳香气味的精油物质(essentialoil),在化妆品的制作上具有重要的使用价值。文章创新点:但是至今为止,与黄花蒿多用途的叶生物量青蒿素含量,精油产量和抗氧化剂(antioxidants)的能力却没有被研究过。本研究的目的是评估蒸馏时间与叶生物量蒸馏残留物(plantresiduefromdistillation(PRD)

中精油产量,青蒿素含量和抗氧化物能力的关系结果表明:叶生物量(leafbiomass)可以用作精油和抗氧剂的开发,但植物蒸馏残留物中并不含有青蒿素。实际应用:蒸馏残留物的高抗氧化能力表明,用于精油生产的副产品,可作为潜在的抗氧化剂来源,可实际应用于牲畜饲料的成分物质,也可作为保健品制作的化学来源

Materials2Artemisiaannuaplantsweregrownduringthe2008–2010growingseasonsTheexperimentwasinitiatedinthespringof2008.Whenseedlingsreachedapproximately12cminheight,theyweretransplantedintopreviouslypreparedraisedbedscoveredwithblackplasticmulch.Plantsobtainedin2009and2010weredevelopedthroughreseedingfromplantsgrowninthepreviousyear.In2010,A.annuaplantswereharvestedinOctoberandtheessentialoilwasextractedfrombiomassviasteamdistillationImmediatelyaftertheharvest,primarybrancheswereeparatedfromthemainstemsandthemainstemsdiscarded.Representativesubsamples(500g)ofbranchesnotthickerthan2mm,withleaves,wereusedforsteamdistillationandextractionoftheessentialoil.Thedistillationtimeswere1.25,2.5,5,10,20,40,80,160,and240min.Anundistilledsample(0mindistillation)waskeptasacontrolforfurtheranalysis.Eachdistillationtimewasreplicatedthreetimes.Immediatelyaftereachdistillationtheextractedplantresiduefromthedistillation(PRD)wasplacedintopaperbagsandoven-driedat45◦Cfor72h.

Methods2加压液相萃取法提取青蒿素Extractionofartemisininbypressurizedliquidextraction(PLE)取未进行蒸馏的对照物1g和蒸馏残留物。分别与3.5g的硅藻土混合,使用研钵和杵研磨充分。将样品倒入不锈钢容器进行加压液相萃取。使用ASE350加速溶剂萃取仪器用溶剂是石油醚和水(测试高压是否可以提高水的提取能力)将提取物进行液相色谱分析配置丙酮:水:乙酸(70:29.5:0.5)体系萃取剂用于ORAC氧自由基能力的测定。ASE350被设置为静态:5分钟;冲洗:100%;清除:60;周期:3;温度:70◦C;和1500磅,并允许夜间工作

Methods2回流法提取青蒿素Extractionofartemisininbyrefluxing取黄花蒿蒸馏产物和对照产物各1g,加入100ml蒸馏水使用索氏蒸馏器进行萃取将容器煮沸1.25到40分钟,样品随着时间进行转移。可以whatman滤纸对水的提取物进行真空过滤,然后使用100ml石油醚分两次萃取产物,最后将石油醚相在通风橱烘干青蒿素的高效液相色谱-二极管阵列检测分析AnalysisofartemisininbyHPLC-photodiodearraydetection将通过回流石油醚萃取,索氏法水萃取,加压液相萃取以与通风橱干燥的样品使用20ml乙腈重组后使用高效液相色谱进行分析

Methods2蒸馏副产品中氧自由基吸收能力的分析Oxygenradicalabsorbancecapacity(ORAC)analysisofdistillationbyproduct在ASE350丙酮水溶液提取后,对样品进行了25ml丙酮-水-乙酸的体系处理。ORAC分析原理基于以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源,SodiumFluorescein为荧光指示剂,维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准,使用荧光微孔板分析仪进行分析。统计分析Statisticalanalyses对精油的生产方式之间的差异(图1)可采用Tukey检验法进行单因素方差分析和多重比较。Sohxlet法萃取测定青蒿素的平均浓度(图2)可进行单因素方差分析方法检验(KruskalWallis)。使用加压液体萃取(PLE),回流,和输液(茶)的方法对青蒿素的提取效率(图4)可采用单因素方差、多重比较和Tukey检验法进行比较。

Results3Fig.1.ConcentrationofessentialoilinA.annuafreshbiomassaccordingtodistillationtime.Concentrationofartemisininintheplantresiduefromthedistillationfrom9differentdistillationtimesplusnon-distilledcontrol(0distillationtime).Artem...

Results3Fig.2.ExtractionofartemisininfromA.annualeavesfromacontrolsample,bySohxletwithwater(deionized,distilled),tomimicartemisininextractionduringsteamdistillation.Artemisininfromtheaqueousphasewasobtainedbypartitioningwithpetroleu...

Results3Fig.3.Antioxidantcapacityofthehydrophilicfractionofplantresiduesfromthedistillationsubjectedtodistillationfrom0min(control,undistilledsample)to240min,asquantifiedbytheoxygenradicalabsorbancecapacity(ORAC)andexpressedinμmol...

Results3Fig.4.Extractionofartemisininfromleaves(non-distilledcontrol)tocomparepressurizedliquidextraction(PLE)withpetroleumetherorwater;refluxing(Reflux)withpetroleumether(60min)orwater(1.25–20min).Artemisininextractionwithhotwater,...

Conclusion4实验的创新性:一,蒸馏时间加长,先前报道最多为120

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