发酵工程复习题

第一篇

微生物工业菌种与培养基一、选择题2．实验室常用的培养细菌的培养基是（

）3．在实验中我们所用到的淀粉水解培养基是一种（

）培养基A基础培养基B加富培养基C选择培养基D鉴别培养基7．实验室常用的培养放线菌的培养基是（

）8．酵母菌适宜的生长pH值为（

）A5.0-6.0B3.0-4.0C8.0-9.0D7.0-7.59．细菌适宜的生长pH值为（

）A5.0-6.0B3.0-4.0C8.0-9.0D7.0-7.510.培养下列哪种微生物可以得到淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、多肽类抗生素、氨基酸、维生素及丁二醇等产品。A枯草芽孢杆菌B醋酸杆菌C链霉素D假丝酵母二、是非题1.根据透明圈的大小可以初步判断菌株运用底物的能力()2.凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制性基质。（

）3.

6.碳源对配制任何微生物的培养基都是必不可少的．（

）7.亚硝基胍能使细胞发生一次或多次突变,特别适合于诱发营养缺陷型突变株,有”超诱变剂”之称.9.参与淀粉酶法水解的酶涉及淀粉酶、麦芽糖酶和纤维素酶等。（

）三、填空题1.菌种扩大培养的目的是

提高菌种使用率，减少生产成本

。2.进行紫外线诱变时,规定菌悬液浓度:细菌约为106个／ml,放线菌为,霉菌和酵母为106～107个／ml.紫外线(波长240-250nm)的作用机制重要是形成胸腺嘧啶二聚体以改变DNA生物活性，导致菌体死亡和变异。3.培养基应具有微生物生长所需要的六大营养要素是_碳源___、__氮源_、__能源__、__水___、__无机盐__和____生长因子___。4.碳源物对微生物的功能是__

提供能源__和__

组成菌体细胞成分的碳架

，微生物可用的碳源物质重要有__葡萄糖__、___蔗糖

_、__

麦芽糖

_、__乳糖_、__

淀粉

__等。5.工业发酵常用的有机氮源重要有_

蛋白胨_、_

黄豆饼粉_、_

尿素__、_酵母粉_、__玉米浆

_等。7.常用的纯种分离方法有平板划线,平板稀释,施加选择性压力分离法三种.9.在微生物研究和生长实践中，选用和设计培养基的最基本规定是__目的明确

_、_营养协调

_、物理条件适宜

_、_

价廉易得

_和_

化学条件适宜

_。10.液体培养基中加入CaCO３的目的通常是为了__

中和微生物生长过程中不断产生的酸

_。11.在运用平板的生化反映进行分离时,生长圈法所用的工具菌是一些营养缺陷型菌株,抑菌圈法所用的工具菌是一些抗生素的敏感菌.13.分离放线菌时,可以在样品的菌悬液中加几滴10%的酚,以克制细菌的生长,分离酵母菌时,可在培养基中添加一定量的抗生素以克制细菌的生长.14.培养基按用途分可分为

孢子培养基

、

种子培养基

、

发酵培养基

和

补料培养

四种类型。15.制备淀粉水解糖的方法有

化学法

、

酶解法

、和

生物发酵法

。四、名词解释1.培养基：是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都具有碳水化合物、含氮物质、无机盐（涉及微量元素）以及维生素和水等。3.次级代谢产物：是指微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质五、问答题1.什么是前体？前体添加的方式？答：前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。前体使用时普遍采用流加的方法。2.简述菌种保藏的基本原理和菌种保藏方法。答：基本原理：根据微生物的生理生化特性，人为地发明条件，使微生物处在代谢不活泼，生长繁殖受到克制的休眠状态，以减少菌种的变异。保藏方法：1斜面保藏法。2穿刺保藏法。3沙土管干燥保藏法。4真空冷冻干燥保藏法。5液氮保藏法。6悬液保藏法。7低温保藏法。3.微生物工业用的菌种有哪几大类，能否举出各类中常用的工业微生物名称和其反映产物。答：类型：1细菌，乳酸杆菌，产生乳酸。2放线菌，红霉素链霉菌，产生红霉素。3霉菌，青霉，产生青霉素。酵母，啤酒酵母，产生啤酒。5.在大规模发酵的种子制备过程中，实验室阶段和生产车间阶段在培养基和培养物选择上各有何特点？答：实验室阶段培养物选择的原则：种子能扩培到一定的量和质，获得一定数量和质量的孢子/菌体。培养基的选择应当是有助于菌体的生长，对孢子培养基应当是有助于孢子的生长。在原料方面，实验室种子培养阶段，规模一般比较小，因此为了保证培养基的质量，培养基的原料一般都比较精细。

生产车间阶段培养物的选择原则最终一般都是获得一定数量的菌丝体。培养基选择一方面考虑的是有助于孢子的发育和菌体的生长，所以营养要比发酵培养基丰富。在原料方面：不如实验室阶段那么精细，而是基本接近于发酵培养基，这有两个方面的因素:一是成本二是驯化。6.依据不同的分类方法，培养基有哪几种类型？答：按组成成分：1合成培养基，2天然培养基；按状态分：固体，半固体，液体；按用途分：孢子，种子，发酵。7、淀粉酶可以通过微生物发酵生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，运用诱变育种方法，获得产生淀粉酶较多的菌株，（1）写出重要实验环节。（2）根据诱发突变率和诱变不定向性的特点预期实验结果。答案：（1）重要实验环节：将培养好的菌株分两组，一组用一定剂量的诱变剂解决，另一组不解决作对照。配制含淀粉的培养基。把诱变组的菌株接种于多个含淀粉的培养基上，同时接种对照组，相同条件培养。比较两种菌株菌落大小，选出透明大的菌株。（2）预期实习结果：由于诱变率低，诱变组中大多数菌落周边的透明圈大小与对照组相同。由于诱变不定向性，诱变组中很少数菌落透明圈与对照组相比变大或变小。第二篇发酵设备选择题1.当内径为500mm的发酵罐中的挡板宽度为50mm时,则满足全挡板条件的挡板块数为A5B3C2、机械搅拌发酵罐中的档板宽度一般为A0.1-0.12DB0.3-0.4DC1-1.2DD0.2-0.3D二.是非题1.对生物进行液体深层培养的反映器称为发酵罐().2.标准式发酵罐的罐高与罐体直径比为5.4.()3.嫌气发酵罐在结构上比需氧发酵罐简朴得多,但一般须安装水力喷射洗涤装置()三.填空题1.常用的需氧发酵罐有机械搅拌通风式发酵罐、空气带升环流式发酵罐、高位塔式发酵罐、自吸式发酵罐等,其中机械搅拌通风式发酵罐作为通用式发酵罐而占据主导地位。2.发酵罐中的搅拌器按液流形式可分为轴向流和径向流两种,圆盘涡轮式搅拌器使用比较广泛,圆盘上的搅拌叶一般有箭叶式、平叶式、弯叶式三种。3.酒精发酵罐一般为圆筒形,底盖和顶盖为碟形或锥形,国内外啤酒厂使用较多的是圆筒体锥底形发酵罐。4、填写下图空气除菌设备流程图中各部分的设备名称：1粗过滤器，2空气压缩机，4冷却器，8加热器9空气过滤器。5、下图为标准通用式发酵罐的几何尺寸比例图，其中H/D=1.7-4，d/D=1/2-1/3W/D=1/8-1/12,B/D=0.8-1.0.四.名词解释1、机械搅拌发酵罐：也称标准式或通用式发酵罐，它是运用机械搅拌器的作用，湿空气和发酵液充足混合，并溶解在发酵液中，以保证微生物的生长繁殖所需要的氧气。2、气升式发酵罐：是应用最广泛的生物反映设备。这类反映器具有结构简朴、不易染菌、溶氧效率高、能耗低等优点。有多种类型，常见的有气升环流式、鼓泡式、空气喷射式等。3、自吸式发酵罐：是一种不需要空气压缩机，在搅拌过程中自吸入空气的发酵罐。五.简答题(见P85之1\4\6)1.机械搅拌发酵罐中，搅拌器的搅拌作用是什么？答：将空气打坏成小气泡，增长气液接触界面，提高氧的传质速率，同时使发酵液充足混合，液体中的固体物质保持悬浮状态。2.机械搅拌发酵罐的基本结构涉及哪些部件？答：罐体，搅拌器，挡板，轴封，冷却装置，消泡器，变速装置，空气分布装置3.判断下图分别为什么种生物反映器？请简述其操作原理。外循环帯升式发酵罐：操作原理：运用空气喷嘴射出的高速空气，将空气泡分割成细泡，与上升管的发酵液密切接触，由于上升管的发酵液轻，加上压缩空气的喷流动能，因此使上升管的液体上升，罐内液体下降而进入上升管，形成反复的循环。自吸式：运用带有固定导轮的三棱空心叶轮的搅拌器，运用其叶轮向前旋转时，叶片与三棱形平板内空间的液体被甩出去而形成局部真空，于是将罐外空气通过搅拌器中心的吸入管而被吸入罐内，并与高速流动的液体密切接触，形成细小的气泡分散在液体之中，气液混合流体通过导轮即转子流到发酵液主体。4、简述好氧发酵过程所需使用哪些设备?答：5、简述通风机械搅拌发酵罐的基本结构有哪些？答：罐体，搅拌器，挡板，冷却装置，空气分布装置，轴封，变速装置，消泡器第三篇

发酵工艺过程的控制一、选择题1．微生物分批培养时，在延迟期（

）2.)一般情况下，运用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在产生酒精阶段需要的必要条件分别是(A)玉米粉和有氧(B)大豆粉和有氧(C)玉米粉和无氧(D)大豆粉和无氧3．发酵过程中，不会直接引起pH变化的是（）A．营养物质的消耗B．微生物呼出的CO２C．微生物细胞数目的增长D．次级代谢产物的积累4、在好氧发酵过程中，影响供氧传递的重要阻力是（）A．氧膜阻力B．气液界面阻力C．液膜阻力D．液流阻力5.酵母菌培养过程中的生长曲线如图所示：a、b、c、d分别表达不同的生长时期，其中适于作为生产用菌种的时期是（） A．a B．bC．cD．d6．在实际生产中，对数期的长短取决于（）①培养罐的大小②接种量的大小③培养基的多少

④代谢产物合成的多少A.②③B．②④C．①②D．①③7．通过影响微生物膜的稳定性，从而影响营养物质吸取的因素是（）A.温度B.pHC.氧含量D．前三者的共同作用8.工业上运用谷氨酸棒壮杆菌大量积累谷氨酸，应采用（）。A．加入葡萄糖的投放量B．加大菌种的密度C．改变菌种细胞膜通透性D．改变培养基碳源很氮源的比例9、温度对发酵的影响,不对的的是A.温度过高,发酵周期缩短,产量减少.B温度不影响生物合成的途径C温度能影响菌种对营养物质的吸取.D菌体生长和产物合成所需的最适温度不一定相同10、下列关于微生物对氧的需求叙述对的的是()A产甲烷杆菌属于厌氧呼吸，但氧的存在不影响其生存。B链球菌进行厌氧呼吸，不能接触空气C黄色短杆菌在空气充足时才干产生谷氨酸D谷氨酸棒状杆菌是厌氧呼吸二、是非题1.

。（

）2.

最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度。（

）3.最低温度是指微生物能生长的温度下限。最高温度是指微生物能生长的温度上限。（

）4、连续培养达成恒定期，比生长速率等于稀释率，即μ=D。()5.

发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢产物的形成都与搅拌速度有关。()6、机械搅拌是提高溶氧系数行之有效的普遍采用的方法．三、填空题1.一条典型的生长曲线至少可分为_

延迟期

_、__对数期__、__稳定期_和_

死亡期__四个生长时期。按投料方式分,发酵过程可分为分批发酵，分批发酵,连续发酵三种类型,按菌体生长与产物形成关系分为生长相关型,部分相关型,生长不关型三种类型.3．影响pH值变化的因素有培养基的成分和微生物的代谢。4.连续培养与单批培养相比，其优点有①提高设备运用率

、②提高产量_、③便于自动控制、④便于分期控制；而缺陷重要是_菌种退化_，另一方面是_

易遭杂菌污染。5.通常，放线菌最适pH值的范围为__

_，酵母菌的最适pH范围为__

_，霉菌的最适pH范围是__

__。五、简答题1.影响微生物需氧的因素有哪些？如何调节通气搅拌发酵罐的供氧水平？答：①因素：细胞浓度直接影响培养液的摄氧率，在分批发酵中摄氧率变化很大，不同生长阶段需氧不同，对数生长后期达最大值。培养基的成分和浓度显著影响微生物的摄氧率，碳源种类对细胞的需氧量有很大影响，一般葡萄糖的运用速度比其他的糖要快。②如何调节：一般认为，发酵初期较大的通风和搅拌而产生过大的剪切力，对菌体的生长有时会产生不利的影响，所以有时发酵初期采用小通风，停搅拌，不仅有助于减少能耗，并且在工艺上也是必须的。但是通气增大的时间一定要把握好。2.泡沫对发酵有哪些有益之处，哪些有害之处？答：益处：气体分散，增长气液接触面积。坏处：①引起逃液，导致损失；②发酵液体积减少影响收率；③增长杂菌污染机会；④使菌体量减少；⑤妨碍菌体呼吸，导致代谢异常，导致菌体提前自溶。3.发酵过程温度的选择有什么依据？答：（1）根据菌种种类和生长阶段选择；（2）根据培养条件选择；（3）菌生长快，维持在较高温时间要短些，菌生长慢，维持在较高温时间可以长些。5.发酵中泡沫形成的因素是什么？常用的消泡剂有哪几类？答：因素：（1）由外界引起的气流被机械地分散形式；（2）发酵过程中微生物代谢及培养基的成分产生的气体集结而成的。分类：天然油脂，高级醇类，脂肪酸和脂类，聚醚类，硅酮类。6.发酵操作方式可分为分批、流加和连续三种，试述三种方法的优缺陷。答：一、分批发酵优点：操作简朴，周期短，染菌机会减少和生产过程，产品质量易于控制。缺陷：产率低，存在基质克制问题，出现二次生长现象，对基质敏感的产物，或者次级代谢产物，抗生素，不适宜用分批发酵。二、流加发酵优点：1能维持适当的发酵条件2减缓代谢有害物的不利影响3避免快速运用碳源的阻遏效应。缺陷：没有物料取出，产物的积累最终导致比生长率的下降，有物料的加入，增长了染菌的机会。三、连续发酵优点：设备运用率高，单位时间产量高，容易控制，可及时排除发酵过程中的有害物质。缺陷：由于长时间不断向发酵系统加入物料，增长染菌几率，连续发酵时间长，容易产生菌种突变。7.Monod方程中，Ks的意义是什么？答：Ks为称作饱和常数的系统常数（g基质/L），其值为此系统可达成的最大比生长速率值的半数（即1/2μmax值）。8.深层过滤的对数穿透定律。答：进入滤层的微粒数与穿透层的微粒数之比的对数是滤层厚度的函数。9.某菌株的比生长速率为0.15h-1，试求该微生物的倍增时间。10.氧从气相传递到细胞内要克服哪些阻力，其中最大阻力是哪一个。答：①气膜传递阻力；②气液界面传递阻力；③气液界面通过液膜的传递阻力；④液相主体的传递阻力；⑤细胞表面的传递阻力；⑥固液界面的传递阻力；⑦细胞内的传递阻力；⑧细胞壁的阻力；⑨反映阻力。其中最大最大阻力是气液界面的传递阻力。11.描述供氧与耗氧平衡方程式。答：CcQo2=KLa（C*-CL）12.简述温度对微生物生长和发酵的影响。答：任何微生物的生长温度均在一定范围内，可用最高温度,最适温度和最低生长温度进行描述。

温度影响微生物生长的机理：(1)影响酶活性；(2)影响细胞膜的流动性；(3)影响物质的溶解度。温度对发酵的影响：(1)影响产物生成速度；(2)影响发酵液性质；(3)影响产物种类：a.改变体内酶系→中间产物种类→产物种类；b.使代谢比例失调。13.简述pH值对菌体生长和代谢产物形成的影响。答：pH表达溶液氢离子浓度的负对数，纯水的[H+]浓度是10-7mol/L，因此pH为7；pH>7呈碱性，pH=5.0时，易染细菌；pH=7.5时，稳定性下降，半衰期缩短，发酵单位也下降。青霉素在碱性条件下发酵单位低，也与青霉素的稳定性有关。14.什么叫做发酵热，发酵热由哪几部分组成。答：发酵过程中释放出来的净热量，它是由产热因素和散热因素两方面决定的。由生物热，搅拌热，蒸发热和辐射热组成。15.简述发酵过程中pH值的调节及控制方法。答：①基础培养基调节pH；②在基础料中加入维持pH的物质；③通过补料调节pH；④当补料与调pH发生矛盾时，加酸碱调pH；⑤选择合适的pH调节剂；⑥发酵的不同阶段采用不同的pH值。六、计算题2、某细菌培养至对数生长期。当细胞数目为105细胞/毫升时，开始计时。一个半小时后细胞数目为8×105细胞/毫升。试问再通过多久，细胞数目会达成6.4×106细胞/毫升.3.指出下列分批发酵中的产物合成各属于哪种动力学模型，并简述之。——生物量┄┄┄代谢物①生长相关型：菌体生长，碳源运用和产物形成几乎都在相同时间出现高峰。②生长不相关型：产物形成一般在菌体生长接近或达成最高生长时期，即稳定期。③部分生长相关型：这类生长类型，产物不是碳源的直接氧化，而是菌体代谢的主流产物，所以一般产量较高呈部分相关。

第四篇

灭菌一、选择题1.实验室常规高压蒸汽灭菌的条件是（

）A

135℃—1402.化学消毒剂（

）是能损伤细菌外膜的阳离子表面活性剂A福尔马林

B结晶紫

C漂白粉

D新洁而灭

3.出于控制微生物的目的，灭菌一词指的是(

)。

A除去病原微生物

B减少微生物的数量C消灭所有的生物

D只消灭体表的微生物10.紫外线辐射重要作用于微生物的(

)。A糖类B酶类C核酸D细胞壁11、培养基灭菌时间的计算可根据（）计算。A.对数残留定律B．阿累尼乌斯方程C．莫诺方程D．气体传质方程12、高压蒸汽灭菌的原理是A高压使微生物DNA变性，B高压使微生物蛋白质凝固变性C高温可烫死微生物D高温使微生物DNA变性14.青霉素族的抗生素重要用于抗(

)。A病毒B真菌C革兰氏阴性菌D革兰氏阳性菌15.运用冷藏进行保存的一个缺陷是(

)。

A冷藏不能杀死微生物

B冷藏不能减少微生物的代谢

C冷藏能杀死也许存在的芽孢D冷藏减少微生物酶的活性二、是非题1.谷氨酸发酵最怕染噬菌体()2.消毒指的是消除所有生物涉及微生物的孢子。（

）5.干热较湿热灭菌效果好，由于干热合用于灭菌的物质如粉料物质、玻璃制品、设备和油料物质。（

）7.巴斯德消毒法是一种防腐的方法，如牛奶、啤酒和果汁，但没有灭菌效果。（

）14.巴斯德消毒法能杀死牛奶或奶制品中存在的所有微生物。（

）15.将食品在沸水中浸30～60分钟，芽孢通常被破坏。（

）16.热致死时间是在给定温度下破坏微生物所需的时间。（

）三、填空题1.按照发酵全过程来分,染菌分为前期染菌，中期染菌，期染菌，后期染菌，期中中期后果最严重。2.煮沸法是一种克制微生物的方法，但细菌的__芽孢___能在煮沸的水中存活2小时以上。3.进行湿热灭菌的方法有__流通蒸气灭菌法_、__

间歇蒸汽灭菌法__、_

高压蒸汽灭菌法

_、_

煮沸灭菌法

___和__

巴氏消毒法

_。5.试列出几种常用的消毒剂如__

甲醛

__、_

次氯酸钠

__、__高锰酸钾

__和__

环氧乙烷

__等。13.在100℃煮沸30—60分钟能破坏细菌的__营养15.按过滤除菌机制不同，可分为

绝对过滤

和

深层过滤

两种类型。16.空气介质过滤除菌的作用机制涉及

惯性冲击滞留作用、

拦截滞留作用

、布朗扩散作用、

重力沉降作用

、

静电吸引作用

。四、名词解释5.分批培养：一次投料，一次接种，一次收获的间歇培养方式。6.热致死时间：即在一定温度下杀死所有某一浓度微生物所需要的时间。7.致死温度：杀死微生物的极限温度。8.对数残留定律：在灭菌过程中,微生物的受热死亡遵循分子反映速度的理论。微生物数量由于受到温度的影响而随着时间的增长逐渐减少。也即菌的减少速率(即微生物的受热死亡速率)与任何一瞬间残存的菌数成正比,这就是对数残留定律。9.抗生素：由微生物（涉及细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。五、问答题1.简述工业发酵染菌的危害。答：1产生菌和杂菌同时在培养基中生长，结果丧失了生产能力。2在连续发酵过程中，杂菌的生长速度有时比产生菌更快，结果发酵罐以杂菌为主了。32.空气除菌的重要方法有哪些？答：加热除菌，静电除菌，介质过滤除菌3.常用灭菌方法有哪些？各有何特点？答：化学试剂除菌，一些化学药剂能与微生物发生反映而具有杀菌作用；射线除菌，运用紫外线，高能电磁波或放射性物质产生的高能粒子进行灭菌；干热除菌，常运用火焰或者热空气进行灭菌；湿热除菌，运用饱和蒸汽进行灭菌；过滤除菌，运用过滤方法阻留微生物，达成除菌的目的。六、计算题有一发酵罐内装40m3培养基，在121℃温度下进行实罐灭菌。原污染限度为每1mL有2*105个耐热细菌芽孢，121度时灭菌速度常数为1.8min-1。求灭菌失败机率为0.001发酵工程应用实例

一、选择题1．青霉素生产菌重要是（）A产黄青霉B毕赤酵母C短杆菌D黑曲霉二、是非题1.青霉素发酵的最适PH是7.5()2.谷氨酸发酵是厌氧发酵（）三、填空题1.a-淀粉酶的生产菌种重要是某些细菌和曲霉，酵母是我国产量最大用途最广的液化型淀粉酶菌种。2.酒精生产的碳源原料重要有、、三大类。3.与酒精发酵有关的微生物有糖化菌和酒精发酵微生物两大类，其中属于前者的微生物有曲霉，根霉，毛霉.属于后者的微生物是酵母4.洒精发酵工艺一般有间歇式发酵,和半连续发酵两种方法.。五、问答题1.简述抗生素的分类和青霉素生产的一般工艺..2.简述谷氨酸发酵生产的工艺控制要点.答：①合理控制通风和搅拌速度；②合理控制温度；③合理控制PH；④合理控制磷酸盐浓度。3.酒精发酵有何特点？第六章微生物的代谢调节和代谢工程一、名词解释代谢工程：通过基因工程的方法改变细胞的代谢途径的工程。诱导酶：又称适应性酶，是依赖于某种底物或底物的结构类似的存在而合成的酶。组成酶：不依赖于酶底物或底物的结构类似物的存在而合成的酶。二、简答题1．简述微生物自我调节部位从哪三方面进行？答：①细胞膜对大多数亲水分子起一种屏障作用，但又存在某些输送系统即通道；②在原核生物有两种控制通量的方法，即调节现有酶量和改变酶分子活性；③限制基质的有形接近。2、根据代谢理论，人们可以从哪些方面进行代谢调控，以达成过量产生所需产物的目的？答：（1）发酵条件的控制；（2）.改变细胞透性；（3）菌种遗传特性的改变。三、填空题1、代谢调节是指在代谢途径水平上酶活性和酶的合成的调节。酶活性调节涉及酶的激活和酶的克制两方面。酶合成调节涉及酶的诱导合成和酶的阻遏作用两方面。2、普遍被接受的酶活性调节机制理论有变构调节理论和化学修饰调节理论。第十章发酵工业与环境保护一、名词解释1.生物需氧量（BOD）：指表达水中有机化合物等需氧物质含量的一个综合指标2.活性污泥法：运用活性污泥在废水中的凝聚、吸附、氧化、分解和沉淀等作用，去除废水中有机污染物的一种废水解决方法。3.生物膜法：使废水接触生长在固定支撑物表面上的生物膜，运用生物降解或转化废水中有机污染物的一种废水解决方法。4.厌氧生物解决法：在无氧条件下，运用兼性和专性厌氧这两类微生物的来进行废水解决的方法二、简答题5.简述废水生物解决的优点。答：①成本低：省却了大量的原料，如化学净化需要耗电、耗大量试剂；②净化彻底，能明显减少COD含量，使出水标准明显高；③环保无污染，不会像化学治理那样会引入新的化学物质；④操作简朴，多种方法可行，例如氧化塘法、转盘法、活性污泥法等等。6.

废水的重要指标涉及哪几项，各有何含义？答：①化学需氧量COD指用强氧化剂氧化水中的污染物时所消耗的氧量；②生物需氧量BOD指表达水中有机化合物等需氧物质含量的一个综合指标；③PH值；④悬浮物；7.

常用的废水生物解决方法重要有哪几种？答：甲烷消化法，活性污泥法，生物膜法，氧化塘法，污水灌溉。8.简述活性污泥法污水解决的原理及影响解决效果的因素。答：原理：在连续通气并搅拌的槽中，将废物—废水与混合微生物菌群接触，混合微生物菌群是以一种絮凝悬浮液的形式存在。影响因素：温度，ph值，氧浓度，有害物质浓度，磷浓度综合测试题（一）一、选择题1．用发酵工程生产的产品，假如是菌体，则进行分离提纯可采用的方法是（）

A．蒸馏过滤C．过滤沉淀C．萃取离子D．沉淀萃取4．以下发酵产品中不属于微生物代谢产物的是（）

A．味精B．啤酒C．“人造肉”D．人生长激素5．运用酵母菌发酵生产酒精时，投放的最适原料和产生酒精阶段要控制的必要条件是（）A．玉米粉和有氧B．大豆粉和有氧C．玉米粉和无氧D．大豆粉和无氧7．对谷氨酸发酵的叙述对的的是（）A．菌体是异养厌氧型微生物B．培养基属于液态的合成培养基C．谷氨酸的形成与搅拌速度无关D．产物可用离子互换法提取8．用于谷氨酸发酵的培养基需添加的生长因子是（）A．氨基酸B．碱基C．核苷酸D．生物素9．关于菌种的选育不对的的是（）A．自然选育的菌种不通过人工解决B．诱变育种原理的基础是基因突变C．通过有性杂交可形成工程细胞D．采用基因工程的方法可构建工程菌10．谷氨酸棒状杆菌扩大培养时，培养基应当是（）A．C：N为4：1

B．C：N为3：1C．隔绝空气

D．加大氮源、碳源的比例11．灭菌的目的是（）A．杀灭细菌B．杀灭杂菌C．杀灭所有微生物D．杀灭芽孢12．能影响发酵过程中温度变化的因素是（）A．微生物分解有机物释放的能量

B．机械搅拌C．发酵罐散热及水分蒸发D．B、C都对13．在发酵中有关氧的运用对的的是（）A．微生物可直接运用空气中的氧B．微生物只能运用发酵液中溶解氧C．温度升高，发酵液中溶解氧增多D．需向发酵液中连续补充空气并不断地搅拌14．当培养基pH发生变化时，应当（）A．加酸B．加碱C．加缓冲液D．加培养基15．大量生产酵母菌时，不对的的措施是（）A．隔绝空气B．在对数期获得菌种C．过滤沉淀进行分离D．使菌体生长长期处在稳定期19．不能作为异养微生物碳源的是（）A．牛肉膏B．含碳有机物C．石油D．含碳无机物29．可用于微生物分离鉴定的培养基是（）A．固体、天然、选择培养基B．固体、化学、鉴别培养基C．半固体、天然、鉴别培养基D．半固体、天然、选择培养基30．下列营养物质中，不是同时具有碳源、氮源和生长因子的是（）A．牛肉膏B．蛋白胨C．生物素D．酵母粉31．鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成，这些物质是（）A．指示剂或化学药品B．青霉素或琼脂C．高浓度食盐D．维生素或指示剂50.常作为生产菌种和科研材料的细菌群体，应当是代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳定的。所以应选择在它的（）A

迟滞期

B对数期

C稳定期

D衰亡期51.某些放线菌产生的抗生素，是它们的（）A初级代谢产物

B次级代谢产物

C代谢中间产物

D代谢废物53.下列关于发酵工程的说法，错误的是（）A．发酵工程的产品是指微生物的代谢产物和菌体自身B．通过人工诱变选育新品种C．培养基、发酵设备和菌种必须通过严格的灭菌D．环境条件的变化，不仅会影响菌种的生长繁殖，并且会影响菌体代谢产物的形成57．发酵是运用微生物生产有用代谢产物的一种生产方式，通常说的乳酸发酵属于（）A.厌氧发酵B．氨基酸发酵C．液体发酵D．需氧发酵59．某药厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸，结果代谢产物没有谷氨酸而产生乳酸及琥珀酸，其因素是A．温度控制不适B．通气量过多C.pH呈酸性D.溶氧局限性60．下列可用于生产谷氨酸的菌种是（）A.谷氨酸棒状杆菌、金黄色葡萄球菌B．链球菌、大肠杆菌C.谷氨酸棒状杆菌，黄色短杆菌D．大肠杆菌、乳酸菌61．发酵过程中，不会直接引起pH变化的是（）A．营养物质的消耗B．微生物呼出的CO２C．微生物细胞数目的增长D．次级代谢产物的积累62．关于灭菌和消毒的不对的的理解是（）A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是相同的C．接种环用烧灼法灭菌D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法69．在发酵工程中，(

)是发酵成功与否的关键。

A无目的微生物

B无目的微生物以外的微生物

C无菌

D无氧70．(

)是生物技术产业化，发展大规模生产的最关键环节。A细胞工程和基因工程

B细胞工程和酶工程

C基因工程和酶工程

D酶工程和发酵工程三、判断题3.发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢产物的形成都与搅拌速度有关。()5.消毒就是把被解决物表面和内部的所有微生物杀死。()7.精拟定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量已知的培养基，称为天然培养基。()8.凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制基质。（

）9.碳源对配制任何微生物的培养基都是必不可少的．（

）四、填空题1.发酵工程的重要内容涉及发酵条件的优化与控制、反映器的设计及产物的分离、提取与精制2.根据微生物与氧的关系，发酵可分为__需氧发酵____和____厌氧发酵__两大类。3.在无氧条件下能将丙酮酸分子转变成乙醇分子的微生物是___酵母__。4.诱发突变的方法分为物理方法和化学方法，物理方法重要是__紫外线__，__x射线___，__B射线__和_激光__；化学诱变剂涉及_碱基类似物_____，_烷化剂__和_吖啶色素__。5.消毒和灭菌的区别在于前者是杀死或除去

病原微生物营养体细胞

，而后者则指杀死

涉及芽孢在内的所有微生物

。6.紫外线照射能使DNA产生

胸腺嘧啶二聚体

，从而导致DNA复制产生错误；用紫外线诱变微生物应在

红灯

条件下进行，以防止

光复活效应

现象的产生。7.巴斯德效应的本质是能荷调节

，表现为呼吸克制发酵。8.乳酸发酵一般要在__无氧__条件下进行,它可分为__同型乳酸发酵__和__异型乳酸发酵__乳酸发酵。五、综合填空题2．如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g(CH2O)30gH2O1000ml青霉素0.1万单位

1)依物理性质，该培养基属于

液体

培养基。依用途划分，则属于

选择

培养基。2)依培养基原料，所培养微生物的代谢类型是异样型，培养的微生物也许是酵母或霉菌。3)该培养基中的碳源是（CH2O），生长因子是无。六、名词解释巴斯德效应：有氧氧化克制糖的无氧酵解的作用。是有氧氧化产生了较多的ATP克制了糖酵解的一些酶所致，有助于能源物质的经济运用。七、问答题1.在发酵过程中，培养液的pH为什么会发生变化？应当如何调节和控制培养液的pH？答：由于微生物自身的代谢特性，培养基的成分，通气条件的变化，菌体自溶或杂菌污染，所以引起pH发生变化。2.哪些因素会影响发酵过程中的温度？答：发酵热，涉及：生物热，搅拌热，蒸发热和辐射热。3.按物理性质可将培养基分为哪几类？各有何用途？答：固体培养基：用于菌种的培养和保存，广泛用于产生子实体真菌的生产；半固体培养基：用于菌种鉴定，细菌运动性鉴定和噬菌体效价鉴定；液体培养基：利于大规模工业生产，由于它有助于氧和物质的传递。4.按化学成分可将培养基分为哪几类？各有何用途？答：①合成培养基：多用于研究和育种；②天然培养基：适于工业生产。5.按用途可将培养基分为哪几类？答：孢子培养基，种子培养基和发酵培养基。6.细菌群体从开始生长到死亡分为哪四个时期？答：延迟期，对数期，稳定期和衰亡期。7．简述发酵热产生的因素答：提醒：微生物分解有机物释放的能量，一部分用于合成ATP，另一部分散发到培养基中时，会引起发酵温度升高；机械搅拌也会产生一部分热量引起温度升高。此外，发酵罐壁散热，水分蒸发会带走部分热量，使发酵温度减少。八、分析应用题1.在发酵过程中，如何保证菌种生长和代谢的正常进行。答：①培养基中的营养物质应全面，缺少营养物质，会影响菌种的生长繁殖及正常的代谢活动。如生物素是谷氨酸棒状杆菌的生长因子，缺少生物素，谷氨酸的合成就会受到影响。②各种营养物质的比例和浓度会影响菌种的代谢途径等。如在碳源和氮源的比为3∶1时，谷氨酸棒状杆菌会大量合成谷氨酸，但当碳源和氮源的比为4∶1时，谷氨酸棒状杆菌只生长而不合成谷氨酸。③当pH下降，呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌就会生成乙酰谷氨酰胺。在发酵过程中，培养液的pH发生变化的重要因素是培养基中营养成分的运用和代谢产物的积累。如当谷氨酸棒状杆菌运用糖类物质不断生成谷氨酸时，培养液的pH就会下降。而碱性物质的消耗和氨的生成等则会导致培养液的pH上升。调节和控制培养液pH的方法有：在培养基中添加缓冲液，在发酵过程中加酸或碱。

综合测试题（二）一、选择题5．作为生产用和科研材料用的菌种，常选（）A.稳定期B．衰亡期C．对数期D.调整期16．下列可用于生产谷氨酸的菌种是（）A.谷氨酸棒状杆菌、金黄色葡萄球菌B．链球菌、大肠杆菌C.谷氨酸棒状杆菌，黄色短杆菌D．大肠杆菌、乳酸菌23.初级代谢产物产生的最佳时期是

(

)A、对数期

B、稳定期

C、调整期

D、衰亡期24.根据培养基的物理状态，划分的发酵种类是

(

)A抗生素发酵

B、维生素发酵

C、氨基酸发酵

D、液体发酵26．在微生物生长的过程中，细胞产生的毒素和细胞的形态最多的时期分别是

（）A.对数期、稳定期

B.衰亡期、稳定期C.稳定期、衰亡期

D.衰亡期、对数期27．发酵是运用微生物大量生产有用代谢产物的一种生产方式。通常说的谷氨酸发酵又属于（）A.液体发酵和需氧发酵

B．液体发酵和厌氧发酵

C．固体发酵和需氧发酵

D．固体发酵和厌氧发酵29．某细菌培养至对数生长期。当细胞数目为105细胞/毫升时，开始计时。一个半小时后细胞数目为8×105细胞/毫升。试问再通过多久，细胞数目会达成6.4×106细胞/毫升（

）

A．30分钟

B．45分钟

C．一小时

D．一个半小时31．微生物分批培养时，在延迟期（

）A微生物的代谢机能非常不活跃

B菌体体积增大C菌体体积不变

D菌体体积减小38．在化学消毒剂中，通过凝固蛋白作用杀菌的是（

）A新洁尔灭

B乙醇

C甲醛

D拮抗44．工业生产用的菌种，在下列哪个时期选取最佳（

）

A调整期

B对数期

C稳定期

D衰亡期二、判断题1.微生物的次生代谢产物是主代谢不畅通时，由支路代谢产生的。（

）4.微生物生长量的大小取决于限制性底物的浓度。（

）5.菌种退化重要由培养或菌种保藏条件引起的。（

）三、填空题1.根据不同的分类原则，工业发酵可分为若干类型。如按发酵形式来区分，有传统工艺发酵和现代工业发酵；按发酵培养基的物理性状来区分，有固态发酵、半固态发酵和液态发酵；按发酵工艺流程来区分，有分批式发酵、连续式发酵和流加式发酵；按发酵过程中对氧的不同需求来区分，有厌氧发酵和需氧发酵。2.发酵工业上常用的微生物有细菌（如枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、乳酸菌、状芽孢杆菌）、酵母菌、霉菌（如根霉、曲霉）和放线菌四大类群。3.微生物群体的生长过程，大体可划分为４个阶段：延滞期、对数期、稳定期和衰亡期。4.微生物生长所需的基本营养物质有碳源、氮源、无机盐类、生长因子和水分。5.发酵工业生产中的碳源重要是糖类和淀粉，如葡萄糖、玉米、大米、大麦、高梁、麸皮等。氮源重要是玉米浆、花生饼粉等有机氮源，也有尿素、硫酸铵、硝酸铵等无机氮液。6.筛选新菌种的具体环节大体可分为采样、增殖培养、纯种分离、发酵实验、性能测定等。7.菌种的选育方法常用的有新菌种的分离与筛选、诱变育种和基因重组育种。8.常见的菌种保藏方法有：斜面转接保藏法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、冷冻干燥保藏法和液氮保藏法。9.培养基的种类繁多，一般可根据其营养物质的不同来源分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基，根据培养基的不同用途分为基础培养基、增殖培养基、鉴别培养基和选择培养基；根据培养基的物理状态的不同分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。在工业发酵中，依据生产流程和作用的不同分为斜面培养基、种子培养基以及发酵培养基。10.灭菌是指完全杀死所有微生物涉及繁殖体和芽孢的方法；消毒是指杀死一药有害健康的致病微生物。11.发酵生产中常用的除菌方法有高压蒸汽灭菌法、巴斯德消毒法、空气过滤除菌法、辐射灭菌法和化学试剂消毒等。四、综合填空题2．家庭酿造甜米酒的具体操作过程：先将米加热煮至七成熟，待冷却至30度，加少许的水和一定量的“酒药”（实际是酵母菌菌种）与米饭混合后置于一瓷坛内（其他容器也可），在米饭中央挖一个小洞，加盖后置于适本地方保温（28℃1)先将米煮一煮的目的是重要为了杀灭其他杂菌

。2)为什么要冷却到30℃后才干加入“酒药”？太高的温度会杀死或克制酵母菌

3)在中央挖一个小洞的因素是有助于透气，可保证酵母菌在开始生长时有足够的氧气，短时间内迅速繁殖；。4)发酵坛并没有完全密封，坛内无氧发酵的环境是如何形成的？有氧呼吸消耗了氧气；呼吸产生的水使发酵液增多，淹没了米饭，形成了无氧环境

。5)家庭酿酒的关键是保温和放“酒药”，假如米的量很多而放的“酒药”太少，经常导致甜米酒因变质而失败。其重要因素是米多酒药少，导致酵母菌起始密度太低，不能迅速繁殖形成生长优势，往往导致杂菌感染。7．据下图回答问题：1)图为微生物的连续培养装置。其目的是延长稳定期，提高代谢产物产量。为此需发明微生物生长繁殖的条件，重要做法是：以一定速度不断添加新的培养基。同时又以同样的速度不断放出老的培养基。2)对加入的［3］规定是无菌，意义是增长溶氧。3)在横线上填写名称：［1］新鲜培养基［3］无菌空气［4］流出物五、名词解释1.巴氏灭菌：巴氏灭菌是指将待消毒物品加热62℃30分钟，或70℃15分钟，以杀死其中的病源菌和一部分微生物的营养体，从而达成消毒或防腐的目的。巴氏灭菌（消毒）只能杀死营养体细胞，但不能杀死芽孢。巴氏灭菌广泛地应用于牛奶、啤酒、黄酒、酱油、食醋等食品行业。2.代谢控制发酵技术：以动态生物化学和微生物遗传学为基础，通过诱变选育适合生产某种产品的突变住，再在有控制的条件下大量生产人们所需的产品。

3.连续发酵：在发酵过程中，有物料连续流入，同时有等量物料连续流出，使细胞在近似恒定的状态下生长。4.临界溶氧值：各种微生物的呼吸强度是不同的，并且呼吸强度是随着培养基中溶氧浓度的增强，直至达成一个临界值为止。这个临界值称临界氧浓度。5.氧传质方程：在稳定情况下，氧分子从气体主体扩散到液体主体的传递效率既氧的传质方程。OTR=KLa(C*-CL)6.发酵热：发酵过程中释放出来的净热量。7.生理酸性物质:被微生物运用后，导致发酵液pH减少的物质。8.次级代谢：在一定的生长时期（一般是稳定生长期），微生物以初级代谢产物为前体合成的对微生物自身的生命活动没有明确功能的物质的过程。9.连续培养：在培养过程中，连续地向发酵罐中加入培养基，同时以相同流速从发酵罐中排出具有产品的培养基，这种操作方式成为连续培养。六、问答题1、一般情况下，典型的发酵过程可以划分为哪几个基本组成部分？答：一般情况下，典型的发酵过程可以划分为6个基本组成部分：①繁殖菌种和发酵生产所用的培养基的配制；②培养基、发酵罐以及辅助设备的消毒灭菌；③将已培养好的有活性的纯菌株以一定量接种到发酵罐中；④控制发酵罐中的菌株在最适条件下生长并形成代谢产物；⑤产物的提取和精制，以得到合格的产品；⑥回收或解决发酵过程中所产生的废物、废水。2、写出酒母扩大培养的工艺流程。答：斜面菌种─→液体试管培养─→三角瓶培养─→卡氏罐─→小酒母罐─→大酒母罐─→成熟酒母（─→接种至发酵罐）。3、简述菌种保藏的原理。答：菌种保藏的原理是：用人工方法发明条件，如低温、干燥、缺氧等，使微生物代谢处在不活跃状态，生长繁殖受到克制处在休眠状态，同时，使菌种避免污染死亡和变异，根据这个原理可有效地保藏菌种，使菌种保持原有性状，减少衰退，突变的发生。4．举例说明生物化学意义上的“发酵”和工业意义上的“发酵”概念的异同。答：生物化学意义上的“发酵”，指微生物在无氧条件下分解各种有机物质产生能量的一种方式。如葡萄糖在无氧条件下被微生物运用产生酒精并放出二氧化碳，同时获得能量；丙酮酸被还原为乳酸而获得能量等。而工业意义上的“发酵”，它泛指运用微生物制导致生产某些产品的过程。它涉及厌氧培养的生产过程，如酒精、乳酸、丙酮丁醇等，以及通气（有氧）培养的生产过程，如抗生素、氨基酸、酶制剂等的生产。产品既有微生物细胞代谢产物，也涉及菌体细胞（如单细胞蛋白SCP）、酶等。5．简述发酵过程中pH的调控方法答：（1）调节基础培养基的配方。C/N、碳源种类和浓度（2）补料的控制。①简朴的加酸加碱；②补入无机氮源；③同时补入碳氮源。6．有机酸发酵时，其产物经常改变培养液的pH或克制发酵，生产上是如何解决这一问题的？答：1)限量添加Mn2+，提供充足的O2。2)选育耐酸性强的菌株。3)中和盐法：添加CaCO3等，中和产生的有机酸。4)采用发酵与提取相耦合的发酵工艺。5)采用固定化细胞的方法。7．微生物菌种保藏的原理是什么，基于这些原理菌种保藏可分为哪些方法？答：根据微生物的生理生化特性，人为地发明条件，使微生物处在代谢不活泼，生长繁殖受到克制的休眠状态，以减少菌种的变异。①斜面保藏法；②沙土管干燥保藏法；③真空冷冻干燥保藏法；④液氮保藏法；⑤悬液保藏法；⑥低温保藏法。微生物工程作业一、选择题1.发酵工程的前提条件是指具有()和()条件。A.具有合适的生产菌种 B.具有控制微生物生长代谢的工艺C．菌种筛选技术 D.产物分离工艺E．发酵设备 2.在好氧发酵过程中，影响供氧传递的重要阻力是（）A．氧膜阻力B．气液界面阻力C．液膜阻力D．液流阻力3.微生物发酵工程发酵产物的类型重要涉及:（）A.产物是微生物菌体自身 B.产品是微生物初级代谢产物C.产品是微生物次级代谢产物 D.产品是微生物代谢的转化产物E.产品是微生物产生的色素4.引起发酵液中pH下降的因素有：（）A.碳源局限性B.碳、氮比例不妥C.消泡剂加得过多 D.生理酸性物质的存在E.碳源较多5.发酵培养基中营养基质无机盐和微量元素的重要作用涉及:()A.构成菌体原生质的成分 B.作为酶的组分或维持酶活性C.调节细胞渗透压 D.缓冲pH值E.参与产物的生物合成6．在冷冻真空干燥保藏技术中，加入5%二甲亚砜和10%甘油的作用是（）P80A营养物B保护剂C隔绝空气D干燥7．发酵是运用微生物生产有用代谢产物的一种生产方式，通常说的乳酸发酵属于（）A.厌氧发酵B．氨基酸发酵C．液体发酵D．需