《细胞生物学》系列课程：实验一 显微镜的使用方法

《细胞生物学》系列课程实验一显微镜的使用方法2绪言实验室规则实验教学内容实验课考核方式与评分办法

3实验室规则不迟到、不早退或无故缺席；穿白大衣，对号入座，保持安静、关闭手机；实验期间不得进行任何与实验无关的活动；爱护仪器、标本和器械，损坏赔偿；不能随意拆卸显微镜的零部件，

有异常立即报告4

注意节约实验材料、药品、水电等；要保持实验室内卫生，实验废物及纸屑应

放到指定地点，不得随意乱丢；实验结束后要认真清理各自的实验台面，将器械清洗后按原样摆放整齐，并清点数目，无误后方可离开；值日生负责清扫实验室，并关闭水、电开关，关闭门窗，清理实验垃圾。5实验课教学内容一、显微镜的结构和使用细胞器的观察口腔上皮细胞临时制片二、细胞超微结构电镜照片识别、

细胞分裂、核型分析三、血型分析与遗传病录像、考试6考核方式与评分办法1、出勤与纪律：15分2、学习态度与科学性：15分3、实际操作能力：20分5、实验报告：50分7实验一实验内容：普通光学显微镜的结构和使用光镜下细胞器的观察口腔上皮细胞临时制片与生物绘图8实验目的了解显微镜的基本结构并初步掌握显微镜

的正确使用方法了解动物细胞的基本形态掌握生物学临时制片的方法掌握生物绘图基本要求熟悉线粒体、高尔基体的光学结构隐藏9实验用品光学显微镜、擦镜纸、油瓶载玻片、盖玻片、牙签、吸水纸、

甲基绿染液标本：①蛙血涂片(No.1)②羊毛装片(No.3)③线粒体标本④高尔基体标本(No.5)10光学显微镜的构造机械系统光学系统照明系统一、光学显微镜的构造与使用方法11机械系统镜座镜柱镜臂镜筒物镜转换器调焦螺旋（粗、细）载物台显微镜的移动方法：一手握镜臂，另一手托镜座，放置时将镜座前端先接触台面，然后放平。镜柱镜座镜臂镜筒物镜转换器调焦螺旋载物台推进尺螺旋更换镜头方法：手持螺纹部位轻轻转动注意：不能用手勾镜头，以防镜头松动而脱落粗调螺旋注意：只能在低倍镜时使用细调螺旋通光孔标尺标本夹标

本

推

进

尺标

本

放

置

方

法标本要正面朝上移

动

标

本推

进

尺

螺

旋18光学系统目镜：多为“10×”

物镜：10×低倍镜

40×高倍镜

100×油镜目镜物镜19目镜：瞳距调节20物镜

如何区分物镜头？镜头长短颜色标记镜头上标示的性能参数物镜的性能参数放大倍数镜口率镜筒长度盖玻片厚度22工作距离显微镜处于工作状态，物像调节到最清晰时，物镜下表面与盖玻片上表面之间的距离。物镜放大倍数越大，工作距离越小。三种镜头的工作距离低倍镜：7.14mm高倍镜：0.5mm油镜：0.18mm23问题如果标本放反了，能用高倍镜或油镜找到标本吗？用高倍镜和油镜时，能否用粗调螺旋调焦？24所有物镜视野构成一组同心圆

由低→高→油镜,

将物像移到视野

的正中央

物镜放大倍数越

大，视野越小照明系统光源光圈（光阑）聚光器光源照明灯开关聚光器旋钮聚光器光阑滤光片框聚

光

器

与

光

阑2829问题观察标本时，发现视野光线太亮，应如何调节才能使视野柔和适中？30光学显微镜的使用显微镜使用前的准备工作检查各部件是否齐全、有无污损显微镜的擦拭：机械部分—用纱布擦照明部分、光学部分—用擦镜纸擦将显微镜放至合适的位置

放于胸前，距实验台边缘约一横拳左右准备→低倍镜→高倍镜→油镜→绘图→清理、收镜将低倍镜头转至工作状态调光：使用粗调螺旋，使低倍镜镜头距通光孔约1cm调节视野光线，使其柔和适中放片：将标本正面朝上并移至通光孔处调焦：低倍镜的使用方法正确识别标本的正面：有盖玻片、标签面、对光反射差的一面调焦方法：①从侧面注视载物台，转动粗调螺旋，使载物台

缓慢上升至距镜头0.5cm处。②双眼在目镜中注视视野，同时缓慢转动粗调螺旋，使载物台缓缓下降，直到视野中出现物像，再用细调螺旋将物像调节至最清晰。★若镜头与标本的距离已超过1cm，尚未看到物像，怎么办？

必须重复①、②，直至看到物像。

（多数原因是载物台下降过快）视野中物像是否为标本上的物像：移动标本推进尺，如视野中物像不随之移动，则其是目镜或物镜上的异物。移动标本推进尺，如视野中物像随之移动，则为标本上物像。正确区分异物、杂质与标本：正常标本：着色均匀，浓淡合适，可区分基本的结构；异物或杂质：着色不均匀，多为浓染，看不到细胞膜、细胞质、细胞核等基本结构。如何判断是否找到欲观察之标本物像？隐藏高倍镜的使用方法⒈使用前必须:①经低倍镜将物像调至最清晰

②将所需放大部分移到视野正中央⒉从侧面注视，转换高倍镜头，再用细调螺旋前后

慢慢转动（一般0~3圈即可看到物像），使物像

达到最清晰的状态。如果看不到物像，可能为以下原因：物像未移到视野中央玻片标本放反镜头松动或镜头脏找到原因、解决问题后，重复1、2切记：使用高倍镜、油镜时不可用粗调螺旋调焦，也不可将细调螺旋连续向上或向下单向转动。35思考低倍镜下观察到物像，换成高倍镜却看不到或看不清，为什么？怎么办？高倍镜碰擦镜片，无法转换到位，为什么？怎么办？隐藏36油镜的使用方法使用前必须：①经低、高倍镜将物像调至最清晰

②将所需放大部分移到视野正中央叉开高倍镜头，滴一滴油于标本上通光孔正中央,

从侧面注视，将油镜头慢慢转动过来，注意镜头

应与油滴接触。双眼从目镜中观察，慢慢转动细调螺旋，直到出现最清晰的物像。(不能大幅度地移动玻片)油镜使用完以后，或由于某种原因未看到物像，都要先下降载物台，使油滴与镜头分开，取下标本，将油擦净；再用已醮有二甲苯的擦镜纸将镜头擦净。每次重复操作都要将镜头及标本上的油擦净！油镜使用时的注意事项油滴不能太大或太小，以免影响观察效果不能大幅度地移动玻片如发现油滴已与镜头分开，必须将镜头、标本擦净油后从低倍镜开始重新操作用后应及时将油擦净隐藏39显微镜使用注意事项不能随意拆卸显微镜零部件，有异常立即报告切勿放反标本；按低→高→油镜的顺序观察，油镜每次使用后都要立即擦净镜头及标本上的油；粗调、细调螺旋都不能连续向上或向下转动，高倍镜和油镜只能用细调螺旋进行调焦；根据标本的厚薄及染色情况调节光线强弱；双眼同时观察；用后正确放置显微镜。隐藏40显微镜使用后的放置方法下降载物台，取下标本；叉开镜头，上升载物台，使物镜与载物台相接近；下降聚光器，关闭光阑，关闭电源；罩上防尘罩，放在实验台中央。隐藏41显微镜使用练习

低倍→高倍→油镜蛙血涂片42

只在低倍镜下观察羊毛装片对准通光孔43二、光镜下细胞器的观察实验目的熟悉光镜下线粒体和高尔基复合体的形态特征及在细胞内的分布。实验用品动物肝脏切片（示线粒体）动物脊神经节切片（示高尔基复合体）光学显微镜44线粒体蟾蜍肾切片细胞质中被染成蓝黑色的颗粒状结构。高尔基复合体神经节切片细胞质中围绕核，被

染成棕褐色的弯曲线

头状或颗粒状结构。45Golgicomplex三、人类口腔上皮细胞的临时制片准备：放置载玻片→刮取口腔上皮细胞涂于其上染色：加入一滴甲基绿染液→盖好盖玻片

→吸去多余染液(盖片表面不能有染液)观察：勿用油镜绘图:用铅笔绘制高倍镜下1～2个口腔上皮细胞，

并标明各部位名称。观察结束后，丢弃使用过的牙签、载玻片与盖玻片。高倍镜低倍镜放大47临时制片注意事项盖玻片与载玻片成45°缓慢下放，尽量避免

产生气泡。细胞折光性强，染色较浅，视野应适当调暗。不用油镜观察。寻找典型物像绘图铅笔绘图、铅笔标注布局合理，大小适当实事求是，不模式化用疏密小点表示明暗标明各部位名称，引线尽量水平引出且彼此平行注明标本名称、放大倍数、绘制时间及绘制人生物学绘图要求：标本名称：放大倍数：物镜×目镜的放大倍数绘制时间：绘制人：细胞膜细胞核细胞质50作业：实验一普通光学显微镜的结构和使用1.填图：标注显微镜各部件名称51试述显微镜使用过程中的注意事项.切勿放反标本；按低→高→油镜的顺序观察，油镜每次使用后都要立即擦净镜头及标本上的油；粗、细调焦螺旋都不能连续向上或向下转动，高倍镜和油镜只能用细调螺旋进行调焦；注意根据标本的厚薄及染色情况调节光线强弱；要双眼同时观察；用后正确放置显微镜，并认真填写显微镜使用记录。3.视野中光线太亮,如何调节显微镜使光线柔和适中？52

实验二生物学临时制片与生物绘图-绘制人类口腔上皮细胞

细胞膜细胞核细胞质标本名称：放大倍数：物镜×目镜的放大倍数绘制时间：绘制人：53下次实验内容