微生物的培养技术及应用基础知识-高二下学期生物人教版选择性必修3

1.2.1微生物的培养技术及应用重要知识点培养基的功能：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物培养基的分类：划分标准培养基的种类特点主要用途按照物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、保藏菌种等固体培养基微生物的分离、鉴定，活菌计数、保藏等按照化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确微生物的分类、鉴定等按照功能用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离特定的微生物，如在加入青霉素的培养基中分离酵母菌、霉菌等；在加入高浓度食盐的培养基中分离金黄色葡萄球菌鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如伊红美蓝（伊红—亚甲蓝）培养基上可以鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌微生物的主要成分：碳源、氮源、水、无机盐微生物碳源氮源能源蓝细菌CO2NH、NO等光能硝化细菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖类等有机物N2有机物大肠杆菌糖类等有机物蛋白质等有机物需要重点掌握的一些微生物培养时需要加入特殊营养物质：微生物名称特殊物质或需求乳酸杆菌添加维生素毛霉PH值调整为酸性细菌PH值调整为中性或弱碱性厌氧微生物提供无氧环境异养型生物有机碳源，如尿素、蛋白质等培养基配制的基本原则：(1)目的要明确：不同的微生物需求不同，根据培养目的进行配制。(2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。营养物质浓度过低不能满足微生物营养的需要，过高对微生物的生长有抑制作用。(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，为维持pH的相对稳定，可在培养基中加入缓冲溶剂。培养基的配置过程往往需要调节PH值，一般在培养基中加入缓冲剂进行调节，常见的有“K2HPO4和KH2PO4”固体培养基——因为含有琼脂，琼脂只作为凝固剂，不会给培养基提供营养物质，琼脂在98℃以上融化，在44℃以下凝固，温度过高，会烫伤操作者，温度过低，培养基凝固，无法操作，所以在50℃时进行倒平板无菌技术的关键是防止外来杂菌的污染，主要包括消毒和灭菌两种杀菌技术。消毒的定义：使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物灭菌的定义：使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。注意:杀菌≠灭菌，杀菌包括消毒和灭菌两种方法，选择题需要注意审题芽孢：细菌的休眠体，孢子：真菌的繁殖体13、消毒和灭菌的比较：内容种类主要方法应用范围消毒煮沸消毒法100

℃煮沸5～6

min一般物品巴氏消毒法62～65

℃消毒30

min或80～90

℃处理30

s～1

min牛奶、啤酒、果酒等不宜进行高温灭菌的液体化学药物消毒法用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等用于皮肤、伤口、动植物组织表面、空气、手术器械等紫外线消毒法紫外灯照射30

min接种室、接种箱、超净工作台灭菌湿热灭菌法用高压蒸汽灭菌锅，一般在100

kPa、121

℃的条件下维持15～30

min培养基及过重器材、物品干热灭菌法用干热灭菌箱在160～170

℃的热空气中维持2～3

h玻璃器皿、金属用具等灼烧灭菌直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，接种过程中试管口或瓶口等容易被污染的部位14、消毒和灭菌的归纳图解：15、制备培养基的流程：配制培养基→定容→分装→灭菌→冷却→倒平板16、平板划线操作重要知识点：①灼烧接种环，待其冷却后才能深入菌液，以免温度太高杀死菌种。②第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，目的是使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细胞繁殖而来的菌落。③划线时最后一区不要与第一区相连。④第一次接种前和每次划线前都要灼烧接种环，划线操作结束后，仍需灼烧接种环。（划线5次，灼烧6次）接种环灼伤的原因：灼烧时间灼烧目的第一次划线前杀死接种环上原有的微生物，防止外来微生物干扰每次划线前杀死上次划线