医院检验中心隐血试验操作规程

医院检验中心隐血试验操作规程上消化道有少量出血时，红细胞被消化而分解破坏，由于显微镜下不能发现，故称为隐血。1）免疫学检测法[原理]大便隐血的免疫一步检验法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。该法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异地针对粪便样品中的人血红蛋白。因此，本试验不受动物血红蛋白的干扰， 试验前不须禁食肉类。[操作]取一片洁净干燥的载玻片，滴加 2—3滴蒸馏水，取粪便小许，调成均匀混悬液。取便隐血试纸条，按说明书操作，将试纸条的反应端浸湿。在 5min内观察结果。若反应线(T)和质控线(C)同时呈蓝色色带即为阳性； 若只有C线呈色为阴性；若丁线与 C线均不显色，说明试验无效。[附注]1．敏感性和特异性敏感性：样品中血红蛋白浓度超过 0．2μg／m1，就可得到阳性结果。特异性：便潜血免疫一步检验法是特异对人体血红蛋白的检验，样品中若含有如下干扰物，实验结果不会受影响：鸡血红蛋白 500μg／ml牛血红蛋白 500μg／m1马血红蛋白 500μg／ml猪血红蛋白 500μg／m1羊血红蛋白 500μg／m1兔血红蛋白 500μg／m1辣根过氧化酶 200μg／m12．试验局限性本法可以帮助医生早期发现胃肠道病变，然而，由于家族性息肉或直肠癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均匀，都可造成阴性结果。本法对正常人检验有时也会得到阳性结果，这是由于某种刺激胃肠道的药物造成便潜血所至。本检验法只能作为筛选或辅助诊断用，不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜和X光检查。[临床意义]1．消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验可阳性。2．消化道恶性肿瘤时，粪便隐血可持续阳性，溃疡病时呈间断性阳性。3．本法可作为消化道恶性肿瘤普查初筛试验。（2）试带法国内外生产以四甲基联苯胺为显色基质的隐血试验试带，使用方便，患者也可自留标本检测。3）邻甲联苯胺法[原理]血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化过氧化氢，放出新生态氧，将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。[试剂]1．10g／L

邻甲联苯胺

(o-tolidine)

溶液：取邻甲联苯胺 18，溶于冰醋酸及无水乙醇各 50m1的混合液中，置棕色瓶中，保存于 4℃冰箱中，可用8—12周，若变为暗色，应重新配制；2．3％过氧化氢液[操作]1．用竹签挑取少量粪便，涂在消毒棉签上或白瓷板上。2．墒加0．15L/L邻甲苯胺冰乙酸溶液 2—3滴于粪便上。3．滴加3％过氧化氢 2—3滴。4．立即观察结果，在 2min内显蓝色为阳性。[结果判断]阴性：加入试剂 2min后仍不显色。十，加入试剂 10s后，由浅蓝色渐变蓝色。2十：加入试剂后初显浅蓝褐色， 逐渐呈明显蓝褐色。十：加入试剂后立即呈现蓝褐色。十：加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。[附注]1．O—tolidine[3 ，3’-Dimethyl-(1 ，1’-biphenyl) —4，4’-Diamine，Cl4Hl6N2,MW212．3]，中文名称邻甲联苯胺， 亦称邻联甲苯胺。另有，O—toluidine(2-Aminot01uene ，C7H9N，MWl07。，中文名称邻甲苯胺，可用于血糖测定，两者应予区别。2．粪便标本必须及时检查，以免灵敏度降低。3．3％过氧化氢必须有效，应进行阳性对照试验，将过氧化氢滴血片上，产生泡沫，或滴加于重铬酸钾硫酸液，显褐色示有效。4．强调实验前三天内禁食动物血、肉、肝脏及富含叶