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文档简介
糖类研究方法
糖的研究方法第1页一、多糖提取二、多糖分离纯化三、多糖结构分析糖的研究方法第2页
多糖提取
提取
浓缩
沉淀
洗涤
干燥原材料
多糖提取液
多糖提取物热水浸提法碱提法甲醇乙醇依次用95%乙醇、无水乙醇、无水乙醚吸干,快速转入真空干燥器中减压真空干燥(含P2O5或NaOH)直接冷冻干燥糖的研究方法第3页一、多糖提取二、多糖分离纯化三、多糖结构分析糖的研究方法第4页多糖分离纯化
纯度判定及
重复沉淀除蛋白质脱色
层析分离分子质量测定多糖提取物
均一级份多糖乙醇或丙酮,除部分极性小杂质结合蛋白:蛋白酶降解或稀碱液游离蛋白:氯仿:乙醇5:1(4:1)形成凝胶物,离心除去
活性炭吸附法离子交换法:来自植物,酚性化合物颜色深,负性离子氧化脱色:色素与糖结合时,,易被纤维素吸附。浓氨水(氢氧化钠液)调PH8.0左右,50摄氏度以下加H2O2至浅黄色,保温两小时按分子质量大小分级:分子筛层析按分子极性分级:离子交换层析电泳:单一条带高效液相色谱HPLC:单一色谱峰紫外光下:无吸收峰糖的研究方法第5页一、多糖提取二、多糖分离纯化三、多糖结构分析糖的研究方法第6页多糖结构分析
主要是对其一级结构进行测定,包含:多糖相对分子质量范围、单糖组成和百分比、单糖连接次序和连接点类型、
糖苷键构型,糖链有没有分支、分支位置及长短,
是否有羧基、氨基以及硫酸基取代及重复单元等。结构分析方法普通来说能够分为:传统化学方法
仪器分析法
酶法1.部分水解法1.分光光度法2.完全水解法2.红外光谱法3.甲醇解和乙酰解3.核磁共振法4.高碘酸氧化法
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