罗氏试剂盒说明书 T3 11810456001V18

1、11810456001V18三碘甲状腺原氨酸（Triiodothyronine，T3） Elecsys 和 cobas e 分析仪 5/5 2009-04, V 18 11731360 122 200测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的总T3。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。临床应用三碘甲状腺原氨酸（T3）是一种作用于各种靶器官的主要甲状腺激素。T3（3、5、3-三碘酪氨酸）

2、主要是在肝脏内由T4经酶解脱去5位的碘而生成。因此，血清中T3的浓度更能反映出外周组织的功能状态，而非甲状腺的分泌功能。由T4向T3的转化减少会导致T3浓度的下降，可见于一些药物的影响（如丙醇、糖皮质类固醇、胺碘酮）以及重症非甲状腺疾病（NTI），也被称为T3低下综合征。与T4一样，99%以上的T3与运输蛋白结合，但亲和力要低10倍左右。1，2，3，4T3检测可诊断T3型甲亢，甲亢早期的筛查和人为造成的甲状腺毒症的诊断。5，6，7ElecsysT3采用竞争法原理和特异性的T3多克隆抗体。使用8-苯基-1-萘磺酸（ANS）释放内源性的T3与添加的生物素化的T3衍生物竞争结合钌复合物标记抗体的结合

3、位点。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌检测原理竞争法，总检测时间：18分钟第一次孵育：30l样本和钌复合物标记的特异性抗T3抗体一起孵育；样本中与结合蛋白结合的T3经ANS作用而释放。第二次孵育：添加生物素化的T3和包被链霉素的磁珠微粒，前者将与未结合的标记抗体结合，形成抗体-半抗原复合物。复合物通过生物素、链霉素之间的反应结合到微粒上。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。Elecs

4、ys软件自动通过定标曲线计算得到检测结果。试剂工作溶液M包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶12ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1钌复合物标记的Anti-T3抗体（灰色瓶盖），每瓶16ml：钌复合物标记的多克隆Anti-T3抗体（羊），75ng/mL；ANS 0.8 mg/Ml;磷酸盐缓冲液100 mmol/L，Ph7.4; 防腐剂。R2 生物素化的T3（黑色瓶盖），每瓶16ml：生物素化的T3 3ng/mL；磷酸盐缓冲液100 mmol/L，pH7.4; 防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照

5、当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys T3试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上8周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析仪Elecsys 1010上8周（试剂交替放置于冰箱和20-25的分析仪中，持续

6、开盖的情况下至多20小时）样本的采集和准备下仅以下罗列的样本类型通过测试并符合检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、钠、铵，K3-EDTA，枸橼酸钠，氟化钠/草酸钾抗凝的血浆都适用。标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。稳定性： 2-8可保存7天；-20可保存1个月。4一次冻融。选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀和冰冻的样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。添加

7、叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号11731548122, T3 CalSet, 规格4 x1 ml货号11731416122, PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1和2或货号11731416190, PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1和2

8、实验室基础设备Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液 货号11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液货号11933159001, SysClean 适配器 货号11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反应管或者货

9、号11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反应管货号11706799001, Elecsys 2010 分析吸头, 30 x 120 移液管吸头 MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340190,ProCell M, 2 x 2 L 系统缓冲液货号04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L测量池洗液 货号03023141001, PC/CC杯, 12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712190,ProbeWash M, 12 x 70

10、 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137001,反应杯/吸头 组合装,84反应杯/吸头 组合装48盒,废物袋 货号03023150001, WasteLiner,废物袋 货号03027651001,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：货号11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15

11、位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。Elecsys 1010 分析仪: 将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的试剂盘（20- 25C）内。避免泡沫产生。使用前后手动开关试剂盒瓶盖。使用后保存于2-8C冰箱。定标溯源性：Elecsys T3 检测可溯源至称量掺入法参考标准。每套Elecsys T3试剂的条码标签上均含有其批号特异的定标信息。使用Elecsys T3 定标液可调整定标曲线。定校频率

12、：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010 分析仪:每盒试剂7天后（室温 20-25C）3天后（室温 25-32C）所有仪器根据需要：如失控。质控室内质控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2。也可以使用其他合适的质控品。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况

13、设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位是nmol/L，ng/mL或ng/dL。转换因子:nmol/L0.651=ng/Mlnmol/L65.09998=ng/dLng/mL1.536nmol/L 干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素599mol/L或35 mg/dL）, 溶血（血红蛋白1.2mmol/L或 2.0g/dL）, 脂血(脂肪乳剂 1800mg/dL)和生物素40.9 nmol/L或 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。浓度高达1500 IU/ml的类风湿因子和血液透

14、析样本均对检测无影响。体外对26种常用药物进行试验未发现会影响检测结果。胺碘酮治疗能够导致T3浓度的降低。苯妥英、苯基丁氮酮和水杨酸盐类能够导致结合蛋白结合的T3释放，因此导致总T3浓度的降低，但FT3水平正常。8甲状腺激素的自身抗体能够干扰检测。结合蛋白异常，如FDH患者 (家族性异常白蛋白高甲状腺素血症)在特定条件下可能会导致检测值偏离预期结果。9病理性的结合蛋白浓度（TBG、白蛋白）能够导致T3水平超出正常范围，尽管其甲状腺功能代谢是正常的（如NTI病人、妊娠、口服避孕药）。这些病例需要检测FT3和FT4的水平。少数病例中极高浓度的特异性被分析物抗体、链霉素抗体或钌抗体会影响检测结果。通

15、过适宜的实验设计可减少这些干扰。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.300-10.00 nmol/L或O.195-6.51 ng/mL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告50.00 nmol/L或6.51 ng/mL。稀释检测范围较宽，标本不需要稀释。期望值1.3-3.1 nmol/L或0.8-2.0 ng/mL：甲状腺机能正常该期望值通过检测514例健康个体的T3，取2.5th和97.5th的百分位点值获得。 注:MCE Elecsys2010，1996，校验1998年第一季度如果需要获取儿童、青春期和妊娠妇女的参

16、考区间信息可参见名为儿童和成人参考区间的小册子，货号：04640292（英语）；04625889（德语）。该手册还包含了参考人群组的甲状腺参数影响因素的研究结果。参照NACB导则的入选及排除规则也罗列在内（如：甲状腺超声检测的量和密度）。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清/血浆样本和质控品验证重复性，按照CLSI的EP5-A执行：每天6次，共10天 (n=60)。批内精密度由 MODULAR ANALYTICS E

17、170分析仪完成，n=21下面是获得的结果。分析灵敏度最低检出限0.300 nmol/L或者0.195 ng/mL最低检出限是指区别于零点的最低分析物浓度。方法学比较使用临床标本比较Elecsys T3（y）检测和酶免 T3（x） 检测，相关性数据如下（nmol/L）：标本数n=300Passing/Bablok10 线性回归y = 1.26x - 0.56 y = 1.18x - 0.35r = 0.754 r = 0.957比较样品浓度约为0.59 nmol/L(大约0.35.9 ng/mL)。分析特异性抗体交叉反应如下：D-T3 100%;L-T40.16%; D-T40.16%; L-

18、rT30.04%;L-T21.0%;3,3,5-triiodothyroacetic acid106%;3,3,5,5-tetra-iodothyroacetic acid0.01%.参考文献1. Wheeler MH, Lazarus JH. Diseases of the Thyroid. London, Glasgow, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras:2. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddrsenkrankheiten Diagnose und Therapie. Berliner Medizi

19、nische Verlagsanstalt GmbH, 1995;2:30-32,60-62.3. Fisher DA. Physiological variations in thyroid hormones; physiological and pathophysiological considerations. Clinical Chemistry 1996;42:135-139.4. Tietz NW. Clinical Guide To Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia,5. Surks MI, Chopra IJ, Mariash CN,

20、 Nicoloff JT, Solomon DH. American Thyroid Association guidelines for use of laboratory tests in thyroid disorders. JAMA 1990;63:1529-1532.6. Becker DV, Bigos ST, Gaitan E, Morris JC, Rallison ML, Spencer CA, et al. Optimal use of blood tests for assessment of thyroid function (letter). JAMA 1993;269:273.7. Klee GG. Clinical usage recommendations and analytic performance goals for total and free triiodothyronine measurements. Clinical Chemistry 1996;42:155-159.8. Wild D. The Immunoassay Ha