病毒感染的检查方法和防治原则培训课件

1、病毒感染的检查方法和防治原则 第二节 病毒感染的检查 p102标本的采集与送检 用于分离培养的标本： a、采集急性期标本 b、采集感染部位标本 c、冷藏 血清学诊断的标本： 急性期和恢复期双份血清，-20保存一、形态学检查 电镜查病毒或光镜查细胞2病毒感染的检查方法和防治原则二、病毒的分离培养与鉴定 （一）病毒的分离培养 1.最常用组织细胞培养 2.鸡胚接种：主要用于流感病毒的分离 3.动物接种少用：主要用于狂犬病病毒、 乙型脑炎病毒的分离3病毒感染的检查方法和防治原则4病毒感染的检查方法和防治原则常用的细胞培养5病毒感染的检查方法和防治原则（二）病毒在细胞内增殖的指标1.细胞病变 CPE、多

2、核巨细胞、包涵体2.红细胞吸附3.干扰现象：观察致细胞病变消失4.中和实验：观察致细胞病变消失5.细胞代谢改变6病毒感染的检查方法和防治原则7病毒感染的检查方法和防治原则病毒在细胞内增殖的指标正常细胞病变细胞细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落1细胞病变效应(cytopathic effect, CPE)8病毒感染的检查方法和防治原则形成包涵体(inclusion body)10病毒感染的检查方法和防治原则三、病毒数量和感染性测定1、蚀斑试验3、ID50 或 TCID50 病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量。 病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个

3、感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。2、血凝实验半定量11病毒感染的检查方法和防治原则四、病毒成分的检测 快速诊断（一）检测病毒抗原 抗体测病毒感染脱落细胞或细胞分泌物中的 抗原成分 病毒小瓶快速培养（二）检测病毒核酸 PCR试验 引物 核酸杂交试验 探针 基因芯片技术 基因测序12病毒感染的检查方法和防治原则 五、病毒感染的血清学诊断检测血清中的病毒抗体 已知抗原测血清中抗体测IgM， 或动态测IgG（双份血清）中和实验、血凝抑制实验、ELISA、蛋白印迹13病毒感染的检查方法和防治原则病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体

4、病毒颗粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察 光镜检查包含体 分离培养14病毒感染的检查方法和防治原则.第八章 第二节 病毒感染的特异性预防p11215病毒感染的检查方法和防治原则灭活疫苗（inactivated vaccine）减毒活疫苗（living vaccine）亚单位疫苗（subunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗基因工程疫苗 合成肽疫苗、基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗 基因缺失活疫苗、核酸疫苗（nucleic acid vaccine） 遗传重组疫苗一、人工主动免疫常用生物制品16病毒感染的检查方法和防治原则二、人工被动免疫常用生物制品 丙种

5、球蛋白 血清丙种球蛋白， 胎盘丙种球蛋白 特异性免疫球蛋白 17病毒感染的检查方法和防治原则人工被动免疫 （artificial passive immunization） 如：1.血清免疫球蛋白 用于甲肝、麻疹、脊髓灰质炎预防 2.高效价含乙肝病毒表面抗体的免疫 球蛋白 用于预防母婴乙肝传播 18病毒感染的检查方法和防治原则 策略：阻断病毒复制周期中吸附穿入、 脱壳、核酸复制、或装配释放 任一环节，从而抑制病毒复制 要求：抗病毒药物能穿入细胞选择性地 抑制病毒复制又不损伤宿主细胞第三节 病毒感染的治疗19病毒感染的检查方法和防治原则一、药物治疗 （一）核苷类药物 1.抑制病毒基因复制 碘尿苷

6、(疱疹净)用异常嘧啶取代胸腺嘧啶,眼疱疹病毒感染。也可渗入细胞DNA,故有毒性。 无环鸟苷(啊昔洛韦) ，竞争病毒复制酶。 2.抑制病毒基因转录： 病毒唑 （二）蛋白酶抑制剂 “鸡尾酒”治疗HIV，3TC加蛋白酶抑制物 （三）天然药物：黄芪、板蓝根、大青叶20病毒感染的检查方法和防治原则 二、基因治疗 1.反义寡核苷酸、反义寡核脱氧核酸(反义RNA、反义DNA)与病毒DNA RNA关键基因互补 2. 核酶：病毒RNA结合,切割降解靶RNA 3. 感染RNA 三、免疫治疗 1.中和抗体（单抗） 2.治疗性疫苗 3.干扰素21病毒感染的检查方法和防治原则一、药物治疗 1.核苷类药物 2.病毒蛋白酶抑制剂 3.天然药物如中药二、基因治疗 1.反义寡核苷酸 2. 核酶 3.干扰RNA三、免疫治疗 1.中和抗体（单抗）2.治疗性疫苗3.干扰素22病毒感染的检查方法和防治原则 核苷类药物 非核