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文档简介
1、PAGE4实验2分离以尿素为氮源的微生物【学习目标】1使用专一的培养基(含有尿素)分离专一的细菌(有脲酶的细菌)。2利用指示剂颜色的变化检知酶(脲酶)所催化的反应。【教学重点】对土样的选取和选择培养基的配置【教学难点】选择培养基的配置【知识链接】1培养基一般都含有、四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。2培养基的分类:按照物理性质可以分为、;按照化学性质分为和;按照用途分为和。3尿素可以为农作物提供肥,但是只有被分解成之后,才能被植物吸收利用。4以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象,要达到的两个主要目的是:(1);(2)。【导学过程】(一)筛选菌株1原理:人为提供有利于生长的条件
2、(包括等),同时抑制或阻止其他微生物生长。2方法:选择培养基定义:在微生物学中,将允许的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。配制的依据:在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点,加入可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏源时,可以分离固氮微生物。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在环境中培养只能得到耐高温的微生物。讨论1:怎样寻找耐高温的酶呢?讨论2如何找到能够
3、分解石油的细菌?(二)设置对照设置对照的主要目的对照试验的定义:(三)实验设计实验设计包括,所需、用具和药品,具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。(1)土壤取样从富含有机物、潮湿、的土壤层取样。(2)制备培养基准备牛肉膏蛋白胨培养基和用作为氮源的选择培养基。牛肉膏蛋白胨培养基作为,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。(3)微生物的培养与观察将土样以1、10-1、10-2依次等比稀释至10-7稀释度,按照浓度从低到高的顺序涂布平板,(是否)更换移液管。对于不同的微生物要选择不同的稀释浓度,测定细菌一般选择,测定真菌一般选择,测定放线菌一般选择。注明培养基种类、培养日期以及平板培养样品的稀释度。将涂布好的培养皿放在温度下培养。随着培养时间的延长,会有不同的菌产生。比较牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。讨论3为什么分离不同的微生物需要不同的稀释浓度?(四)操作提示1本实验中要注意那些无菌操作?2在进行多组实验过程
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