我国工程抗体研发概况课件

1、我国工程抗体研发概况XXXYYYYYYYYYYYYYYY我国工程抗体研发概况XXXYYYYYYYYYYYYYYY1979 - 1980 国内个别单位开始单抗的研制1984年以前 基本是技术方法的建立和完善1985年以后 单抗为基础的诊断试剂用于研 究和临床1987年以后 单抗的体内诊断和治疗制剂被 列 入863计划1992年 我国第一个单抗衍生物被SDA 批准进入临床单克隆抗体技术在我国的发展1979 - 1980 国内个别单位开始单抗的研制单细胞表面抗原血型抗原组织相容性抗原白细胞分化抗原CD2CD3CD25CD10CD20CD38CD45CD71CD41CD42CD8.细胞表血型抗原组织相

2、容性白细胞分化抗原CD2.肿瘤相关抗原胃癌肺癌肝癌鼻咽癌大肠癌宫颈癌乳腺癌结肠癌卵巢癌胰腺癌喉癌脑胶质瘤骨肉瘤肿瘤相关胃癌肺癌肝癌鼻咽癌大肠癌宫颈癌乳腺癌结肠癌卵巢癌胰腺病毒HFRSV新城疫甲肝轮状登革乙肝RSV乙脑流感马雅罗Mayaro 基孔贡亚Chikungunya Ross River罗斯河 盖塔Getah柯萨奇狂犬新培斯Sindbis病毒HFRSV新城疫甲肝轮状登革乙肝RSV乙脑流感马雅罗 细菌大肠杆菌沙门氏菌痢疾杆菌军团杆菌结核杆菌绿脓杆菌麻风杆菌霍乱弧菌细菌大肠杆菌沙门氏菌痢疾杆菌军团杆菌结核杆菌绿脓杆菌麻风杆菌寄生虫血吸虫疟原虫弓形虫旋毛虫丝虫毛滴虫绦虫利什曼原虫寄生虫血吸虫疟原

3、虫弓形虫旋毛虫丝虫毛滴虫绦虫利什曼原虫可溶性抗原酶血浆蛋白毒素细胞因子补体激素小分子化合物可溶性酶血浆毒素细胞补体激素小分子单克隆抗体的主要用途诊断基础研究监测治疗单克隆抗体的主要用途诊断基础研究监测治疗单克隆抗体用于基础研究细胞种类及亚型的分析细胞信号转导途径的研究细胞膜受体及其功能研究蛋白质分离、纯化基因分离及功能研究单克隆抗体用于基础研究细胞种类及亚型的分析细胞信号转导途径的单克隆抗体用于疾病诊断传染病诊断肿瘤诊断免疫性疾病诊断内分泌疾病诊断血液病诊断单克隆抗体用于疾病诊断传染病诊断肿瘤诊断免疫性疾病诊断内分泌单克隆抗体用于食品与环境监测食品水土壤单克隆抗体用于食品与环境监测食品水土壤“

4、七五”863导向药物的研究肝癌导向药物的研究胃癌导向药物的研究肺癌导向药物的研究白血病导向药物的研究人-鼠嵌合抗体的研究人-人单克隆抗体的研究中草药及其他“弹头”药物的研究“七五”863导向药物的研究肝癌导向药物的研究“八五”863基因工程抗体及导向药物的研究肝癌导向药物的研究胃癌导向药物的研究肺癌导向药物的研究白血病导向药物的研究人-人单克隆抗体的研究高效“弹头”药物及新型交联方法的研究基因工程抗体的研究全套抗体(repertoire)表达系统的构建“八五”863基因工程抗体及导向药物的研究肝癌导向药物的研究“九五”863抗体工程 抗体为载体的导向药物 鼠抗体人源化及人源抗体 特殊功能的抗体

5、及衍生物 基因工程抗体表达系统“九五”863抗体工程 抗体为载体的导向药物抗体人源化和人源抗体嵌合抗体重构抗体鼠抗体表面氨基酸残基“人源化”抗原表位定向选择噬菌体抗体库抗体人源化和人源抗体嵌合抗体重构抗体鼠抗体表面氨基酸残基“人在我国研制成功的人源化和人源抗体 嵌合抗体（抗CEA、VEGF、TNFa、gpIIb/IIIa） 重构抗体（抗人CD3） 人源抗体（抗甲肝病毒、抗乙肝病毒、流行性 出血热、TNF）在我国研制成功的人源化和人源抗体 抗体亲和力改造链替换(Chain Shuffling)计算机辅助设计下的定点突变高亲和力克隆的选择抗体亲和力改造链替换(Chain Shuffling)计算机

6、提高抗体效应功能抗体融合蛋白双特异性抗体偶连细胞毒物质细胞内抗体提高抗体抗体融合蛋白双特异性抗体偶连细胞毒物质细胞内抗体双特异性抗体 抗人肝癌单抗 /抗人 CD3单抗 抗Her2/neu单抗/抗人CD16单抗 抗人CD20单抗/抗人CD3单抗 抗人卵巢癌单抗/抗人CD3单抗双特异性抗体抗体融合蛋白 抗人Her2/neu单抗-IL-2 CTLA-4-Ig 抗纤维蛋白-ProUK抗活化血小板-UK抗人卵巢癌单抗-IL-2抗体融合蛋白 抗人Her2/neu单抗-IL-2 偶连细胞毒物质 连接放射性同位素(131I、99mTc） 连接植物或细菌毒素（ricin、PE40） 连接细胞毒性药物（C1027

7、、柔红霉素）偶连细胞毒物质 连接放射性同位素(131I、99mTc）SDA批准进入临床的体内诊断用抗体 131I-抗人肝癌单克隆抗体(HAb18、Hepama-1） 99mTc-抗人小细胞肺癌单克隆抗体（2F7）SDA批准进入临床的体内诊断用抗体 131I-抗人肝癌单克SDA批准进入临床的治疗用单抗抗T细胞和C-ALL免疫毒素抗EGFR的人源化抗体131I-抗肝癌单克隆抗体抗人CD25单克隆抗体抗乙脑单克隆抗体抗流行性出血热抗体抗131I- CEA人源化抗体抗人CD3单克隆抗体抗人IL-8单克隆抗体SDA批准进入临床的治疗用单抗抗T细胞和C-ALL免疫毒素我国体内诊断和治疗用抗体的研制我国体内

8、诊断和治疗用抗体的研制我国工程抗体研发中存在的主要问题基因工程抗体表达量低动物细胞规模化培养技术落后新抗体我国工程抗体研发中存在的主要问题基因工程抗体表达量低动物细胞我国抗体表达载体的研究原核表达系统包涵体方式表达可溶性表达真核表达系统昆虫细胞哺乳动物细胞植物动物我国抗体表达载体的研究原核表达系统包涵体方式表达真核表达系统动物细胞培养中空纤维系统微囊培养气升式培养微载体培养悬浮培养动物细胞培养中空纤维系统今后抗体药物发展的方向寻找新的靶抗原建立高通量抗体制备和筛选技术基于抗原立体结构设计和改造抗体基于抗原-抗体相互作用设计抗体模拟物今后抗体药物发展的方向寻找新的靶抗原新的靶抗原的发现疾病发病机

9、理的研究人类基因组研究蛋白质组研究新的靶抗原的发现疾病发病机理的研究HRP-anti-E-TagscFv-E-TagAg FilterMaster Filter2xYT-AG2xYT-AG2xYT-AIColony-lift assayDevelopAg-FilterHRP-anti-E-TagscFv-E-TagAg Fi丝状噬菌体E.colitraAAB噬菌体展示技术与细菌展示技术结合的原理图丝状噬菌体E.colitraAAB噬菌体展示技术与细菌展示技AntibodyVP16 ADAntigenLexA-DBDVector 1Vector 2Co-transfect yeast cells

10、LacZ gene activationHis3 gene activationLex A-DBSor双杂交系统筛选细胞内功能性抗体AntibodyVP16 ADAntigenLexA-DBDLibrary BDHFR-f2Library ADHFR-f1lactamasecotransformSequence DNAlactamaseLib A-DHFR-f1Lib B-DHFR-f2抗原抗体DHFR-f1DHFR-f2DHFRLibrary BDHFR-f2Library ADHFR- Epitope与抗体功能FRP5 (Anti-ErbB2) +/-Herceptin (Anti-ErbB2) +/+VLVHCDRCDRVHVL Epitope与抗体功能FRP5 (Anti-ErbB2Western-blot (Z12)1 GST2 GST+hTNF92-1573 GST+hTNF1-914 GST+hTNF1 157 92 157kD263336431 914 3 2 1 M 4 3 2 1 M蛋白转膜，丽春红显色免疫印迹，DAB显色抗原表位的确定Anti-hTNFhTNFEpitopeCDRWes