中药新药申报资料中长期毒性试验存在的问题课件

1、中药新药申报资料中长期毒性试验的常见问题 一长期毒性试验的目的和意义 长期毒性试验是安全性评价重要内容之一，其目的是：观察反复给药情况下，实验动物对受试物出现的毒性反应，剂量毒性效应的关系，主要靶器官，毒性反应的性质和损害程度及可逆性等；实验动物能耐受的剂量范围，无毒反应的剂量、毒性反应剂量及安全剂量范围，还可了解毒性产生时间、持续时间、可能反复产生毒性反应的时间、有否迟发性毒性反应、有否蓄积毒性或耐受性等。 长毒试验是临床前毒性评价的主要内容，是能否过渡至临床试验的主要依据。其结果为临床安全用药的剂量设计提供参考依据，为临床毒副反应的监护及生理生化指标监测提供依据 。（1）判断受试物是否能进

2、行临床试验；（2）预测人临床用药的可能毒性反应及其安全范围；（3）为临床初始剂量选择等提供重要的参考依据；（4）确定临床试验中的防治措施和着重观测指标。 二、常见问题讨论常见问题主要集中在试验设计（包括试验周期、剂量设计、指标选择等）、结果分析和资料整理上。 长毒试验的周期应根据临床用药的实际情况并结合主治（适应症）的特点来定。建议为：临床用药期为1周内者，可做2周；1周以上，2周以内者，应为1个月；2-4周者，应为3个月；4周以上者，大鼠应为6个月，犬应为9个月，此为最长试验周期。对功能主治有若干项者，应按临床实际用药最长疗程的功能主治来确定试验周期。对一些慢性病的治疗药，如用于高血脂、高血

3、压、抗抑郁等类药物，在临床上可能会长期应用，应根据疾病实际所需疗程按最长试验周期提供长毒资料。 有很多长毒试验的试验设计按临床研究方案制订的疗程来确定长毒试验给药时间，这是不科学的，因为临床方案中疗程的设计依据是要求在确定的疗程时间内观察到药物的有效性。如某一用于糖尿病的药物，临床方案中疗程可能设计为4周，而实际用药却可能远超过4周（可能长期使用），如仅按4周的疗程设计长毒试验则明显不妥。 按照法规和相关技术要求，长毒试验一般应设3个剂量组。原则上，低剂量应略高于主要药效学研究的有效剂量，此剂量下应不出现毒性反应，高剂量力求动物出现明显毒性反应或个别动物死亡。在高、低剂量间应再设一中剂量组。

4、中药有效成分、有效部位制成的新药及中药注射剂多数来自于科研，无足够的临床应用基础，安全性显得尤为重要，这时剂量更应合理设计。故这类药物长毒试验剂量设计时主要是参考药效学试验有效剂量和急毒试验结果来确定。 很多申报者认为中药新药的长毒试验不应该出现任何毒性反应，这是一个误区。因长毒试验中的目的是为了找出中毒剂量、确定安全范围、寻找毒性靶器官、判断毒性的可逆性，给临床提供参考信息，故中药复方制剂长毒试验高剂量不应简单追求达到临床剂量的50倍，而应合理设计才能达到长毒试验的目的。一般建议高剂量尽可能采用最大给药量或出现明显中毒甚至个别动物死亡的剂量。当然，一些具体药物会因某些原因而不一定能完全按要求

5、进行，这时则应灵活掌握，具体问题具体分析。 有些试验仅设两个剂量组也不尽合理，按规范的要求应设三个剂量组。在一些情况下，高剂量组出现毒性，低剂量组虽未发现明显毒性，但因其与药效学剂量相距较近（治疗指数较小），故难以判断本品临床试验的安全性，如设一中剂量组，且未出现明显毒性反应，则有利于判断其可能的安全范围。许多资料中剂量表示方法不明确，未说明剂量单位是制剂量、提取物量还是生药量。为保证资料的规范性，建议中药有效成分或有效部位以有效成分量或有效部位量mg（或g）/kg表示，中药复方类则以g生药/kg表示。在资料中，还应说明长毒试验剂量设计的依据，说明长毒试验剂量与动物药效学有效剂量及拟临床人用剂

6、量之间的关系。 有很多试验忽视对凝血时间的观察。大多数试验血液学检查常常只注意红细胞计数而忽视网织红细胞的检查。事实上RBC计数反映红系造血抑制上不够灵敏，因为RBC寿命较长，而网织红细胞却是一个较敏感的指标。当对造血系统有影响时，还应进行骨髓涂片的观察。 4.恢复期观察及动物数等有些试验者认为在给药结束时未发现明显毒性，而不进行恢复期观察，这种试验设计明显不规范。恢复期观察的目的是为了观察毒性反应的可逆程度和可能出现的迟发性毒性反应，故应重视恢复期的观察。恢复期观察时间一般应为24周。 周期设计时还应注意动物数。一般啮齿类（常用大鼠）每组应为20-40只，非啮齿类（狗或猴）每组至少6只，原则

7、是动物数应根据试验周期的长短来进行确定，必须保证试验中期、给药结束、恢复期结束应有足够的统计样本数，试验周期长者应相应增加动物数。在犬长毒试验中尤其要注意动物数是否能达到要求。 (二)资料的整理和结果的分析做完试验后，资料整理、结果分析是重要的环节，亦是问题较集中之处。审评人员是根据申报资料中所提供的信息来评价的，故申报资料应尽可能整理规范、详实、客观。 1.申报资料过于简略:如无受试药物及配制方法，动物来源、仪器等，甚至结果描述也过于简单。有些资料将所有的试验结果罗列，而未将结果进行讨论。在这种情况下，审评人员不了解每个试验数据及病理读片情况，难以对试验结果下正确结论。故试验者应对试验数据和

8、病理结果进行详细地分析，分析毒副反应的主要特点，并确定符合实际的安全剂量范围，给临床试验提供尽可能多而准确的参考信息。 2.试验结果的统计分析：在资料中应尽可能客观地分析结果，采用合适的统计方法来分析。对于统计学P值的意义要结合临床实际来考虑。有异常变化的指标一定要如实地反映，进行详细分析，一定要用客观的态度来对待药物的安全性问题。有些申报资料将有统计学变化的指标以“均在正常范围内”一言以蔽之，描述过于简单。而且均数在正常范围内并不代表所有数据都在正常范围内，是否有正常以外的数据应予说明并加以分析。另一方面，应加强试验室动物各项生理指标的数据背景资料（data background）的积累及研究。组织病理学检查方面的问题：有些资料仅简单地说给药结束后及恢复期各组织脏器未见明显改变，从资料中看不出具体的变化。有些资料中未提供病理检报告和病理照片，或病理照片下无相应的说明，有些病理报告无病理检查人员签名及单位签章。应提供详细的有病理检查人员签名及单位正式签章的病理报告，及相应的病理照片，有异常病变的照片应报送，并有相应的文字说明，在尽可能的情况下，建议提供详细的读片记录。 4.对死亡动物的检查不重视： 长期毒性试验，由于给药时间长、影响因素多，出现动物死亡有时是难免的，但死亡又是一种严重事件，如不能准确找出死亡原因则必然会影响对受